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再力花叶枯病病原菌鉴定 　　摘要：鉴定了在湖北省武汉市解放公园、月湖公园湿地植物种植区的再力花（Thalia dealbata）叶片上发现的1种病原未知的再力花病害的病原菌种类。从叶片上分离得到病菌，经柯赫氏法则验证为致病病原菌，据病原菌培养性状和形态特征将该病原菌鉴定为新月弯孢菌[Curvularia lunata （Wakker） Boed]。弯孢菌危害再力花，引起叶枯病。 中国论文网 /1/viewhtm　　关键词：再力花；叶枯病；病原鉴定；新月弯孢菌 　　中图分类号： S432.4+4文献标志码： A文章编号：1002-1302（2015）09-0164-02 　　再力花（Thalia dealbata）别称水竹芋，原产于北美地区，为竹芋科再力花属多年生草本植物，1992年再力花作为观赏植物自日本引入中国[1]。再力花对氮、磷的去除效果好，易成活、繁殖快，具有一定的耐寒性，因此被广泛应用于人工湿地[2]。2008年7月，笔者在湖北省武汉市解放公园、月湖公园湿地植物种植区的再力花叶片上发现了1种病原未知的再力花病害，发病率达30%。本研究鉴定了该病害的病原菌种类，旨在为做好该病害的防治工作提供依据。 　　1材料与方法 　　1.1材料 　　病原菌采自武汉市解放公园、月湖公园再力花发病典型的病叶。 　　1.2症状描述 　　按常规方法对病株出现的症状进行描述。 　　1.3病原菌的分离和菌种纯化 　　采用常规组织分离法进行分离。切取发病典型的再力花叶片病健交界处5 mm×5 mm小块，用70%乙醇消毒5 s，01%HgCl2表面消毒30 s，灭菌水冲洗3～4次，无菌操作接种到马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）上，28 ℃培养，培养5 d待产孢后进行单孢分离纯化，再转入试管斜面保存。 　　1.4病原菌致病性的测定及形态观察 　　将纯化、产孢的病原菌孢子用无菌水配制成106个/mL的孢子悬浮液，选取健康再力花植株叶片，用无菌水将再力花叶片表面蜡粉洗净，喷洒孢子悬浮液于叶片上，以无菌水作为对照；保湿，观察并记录叶片发病情况。将病原菌接种于PDA培养基上，于28 ℃恒温培养箱培养3 d，观察菌落颜色、形状、大小，产孢后观察分生孢子颜色、形态及分生孢子梗形态。 　　2结果与分析 　　2.1症状描述 　　该病主要危害叶片，叶尖、叶缘发生多（图1），发病初期叶出现褪绿斑，病斑逐渐扩展成不规则形，中央灰白色，周缘有褪绿晕圈。高温高湿时病斑扩展快，叶尖叶缘褪绿成青枯状，叶片卷曲，严重时病斑联合形成大面积组织坏死，导致叶片枯死。潮湿条件下，病斑正面、反面均可产生分生孢子梗及分生孢子，呈灰黑色霉状物（图2）。田间发病始于4月中下旬，7―9月发病严重。 　　2.2病原菌培养性状及形态 　　PDA培养基上菌丝初期为白色，逐渐转为墨绿色至黑色，菌落圆形、平展，周缘整齐（图3）。分生孢子梗褐色，有隔，直或弯曲，顶部呈屈膝状合轴式延伸。分生孢子褐色，大多3个隔分成4个细胞；从基部数第3个细胞向一侧膨大，深褐色，第2个细胞为淡褐色，顶部、基部细胞色浅。分生孢子光滑，弯月形、广梭形、棍棒形或近椭圆形，少数丫形（三角形）。分生孢子大小为（22.5～32.5）μm×（7.5～15.0）μm（图4）。根据病原菌分生孢子梗、分生孢子及菌丝形态特征，认定该菌为半知菌亚门丝孢纲丝孢目暗梗孢科弯孢霉属新月弯孢菌[Curvularia lunata （Wakker） Boed][3-6]。 　　2.3致病性测定 　　接种7 d，用孢子悬浮液接种的叶片均发病，病斑初期为褪绿小点，随着病害的发展，病斑中央灰白色有褪绿晕圈，从病斑上重新分离到相同的病原菌，遵循柯赫式法则。对照叶片均不发病。 　　3结论与讨论 　　再力花是观赏价值极高的优良的湿地挺水植物。近年来，再力花叶枯病在武汉市发生日益严重，叶枯病造成再力花叶片干枯卷曲，影响观赏价值。本研究结果表明，新月弯孢菌[Curvularia lunata （Wakker） Boed]是武汉市再力花叶枯病的致病菌。朱明旗等对新月弯孢菌的生物学特性进行了初步研究，该菌生长、孢子萌发最适温度为25～35 ℃，相对湿度在98%以上时，孢子萌发率达78%以上[7]。武汉市7―9月为高温高湿天气，适合菌丝生长、孢子萌发。新月弯孢菌在PDA培养基、琼胶燕麦培养基上，采用28 ℃恒温培养，12 h光照和12 h黑暗交替诱导产孢的方法产孢量均很大，说明光暗交替有利于孢子形成，符合朱明旗等的结论[7]。戴法超等研究结果表明，干燥是弯孢病菌存活、越冬的首要条件，在潮湿环境下，菌丝不复存在[8]。再力花存在于湿地环境中，其病菌越冬、发生规律、病害循环及防治措施有待进一步研究。 　　参考文献： 　　[1]田军东，史团省，朱世新，等. 引种植物水竹