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稳定态二氧化氯溶液作用效果研究 　　摘要：利用分光光度计法测定稳定态二氧化氯溶液活化后的有效二氧化氯含量，比较不同食品级活化剂的活化效果，并研究不同浓度的二氧化氯活化母液对标准菌株的杀菌效果及实际食品的杀菌效果。结果显示：食品添加剂盐酸是最有效的稳定态二氧化氯溶液的活化剂；3%以上的二氧化氯母液对大肠杆菌和沙门氏菌作用30min、6%以上的二氧化氯母液对金黄色葡萄球菌和白色念珠菌作用30min、9%以上的二氧化氯母液对黑曲霉作用30min，其杀灭率均可达99.999%以上；9%的二氧化氯母液可有效杀灭榨菜、卷心菜、花菜和木耳中存在的细菌，而杀灭泡菜中存在的细菌则需要12%-15%的浓度， 6%以上浓度的二氧化氯母液可有效杀灭测试蔬菜和木耳及泡菜食品中存在的霉菌和酵母。 　　关键词：稳定态二氧化氯溶液 活化剂 作用效果 　　中图分类号：TQ12 文献标识码：A 文章编号：1672-5336（2014）10-0072-02 　　二氧化氯（ClO2）作为第4代新型消毒剂以其高效、安全的性能广泛用于医疗卫生、食品保鲜、水质及空气净化等方面，我国食品安全国家标准也被允许作为食品防腐剂用于经表面处理的新鲜蔬菜、水果及水产品中[1]。因二氧化氯极其不稳定，食品添加剂用二氧化氯是将二氧化氯气体用食品添加剂碳酸盐吸收制得的稳定态二氧化氯溶液，使用时用食品级酸先进行活化[2]，再进行稀释使用，因此，产品的活化率及稳定性直接决定着产品的使用效果，本文主要研究食品添加剂稳定态二氧化氯溶液的活化工艺及活化后的溶液对部分微生物及部分食品的作用效果，为产品真正应用于食品中提供参考。 　　1 材料与方法 　　1.1 材料 　　稳定态二氧化氯溶液，公司自己生产； 　　食品原料：榨菜、泡菜、卷心菜、花菜、木耳，均为当地菜市场购买； 　　菌株：沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌、黑曲霉、大肠杆菌； 　　试剂：无水氯化钙、六水合硫酸镁、氯化钠、硫代硫酸钠，国药集团购买；TSA琼脂、PDA琼脂、平板计数琼脂、孟加拉红琼脂，北京陆桥公司购买。 　　1.2 试验仪器 　　FA2004N电子天平：上海菁海仪器有限公司；LRH-250生化培养箱：上海一恒科学仪器有限公司；生物安全柜：南通嘉程仪器有限公司；高压灭菌器：海三申医药器械有限公司；722可见分光光度计：上海精密仪器仪表有限公司。 　　1.3 实验方法 　　1.3.1 二氧化氯溶液中有效二氧化氯含量的测定[2] 　　根据GB25580-2010中的分光光度法测定稳定态二氧化氯活化液中有效二氧化氯的含量。 　　1.3.2 食品添加剂稳定态二氧化氯的活化方法 　　称取100g稳定态二氧化氯溶液，分别添加4g柠檬酸、4g富马酸、4g酒石酸以及4g盐酸，常温活化两个小时，测定溶液在430nm处的吸光度，以确定活化后溶液中有效二氧化氯的含量，通过比较不同活化剂活化出的溶液中有效二氧化氯的含量，以选择最有效的活化剂。 　　1.3.3 稳定态二氧化氯活化后母液的稀释 　　按照1.3.2中的活化方法对稳定态二氧化氯溶液进行活化，活化后的溶液称为母液，试验时对母液进行系列稀释，配制成15%、12%、9%、6%、3%和1.5%的稀释液。 　　1.3.4 测试用菌液制备 　　大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌和黑曲霉菌新鲜培养物，用生理盐水配制菌悬液，浓度约为1×103cfu/ml～5×103cfu/ml。 　　1.3.5 稳定态二氧化氯活化后母液对标准菌株的杀菌效果 　　取0.5ml大肠杆菌、沙门氏菌、金黄色葡萄球菌、白色念珠菌和黑曲霉菌悬液，加入0.5ml有机干扰物质3%BSA溶液混匀，置20℃±1℃水浴中5min后，加入4.0ml不同稀释浓度的稀释液，迅速混匀并记时。试验菌与消毒剂相互作用30min后，分别吸取0.5ml混合液加入4.5ml中和剂混匀，作用30min后，分别取1mL进行平板计数。 　　1.3.6 稳定态二氧化氯活化后母液对食品样品中微生物杀灭效果测试 　　将食品原料按1：1的比例浸入稀释液中，作用30min后，取1mL进行细菌、霉菌和酵母计数。 　　2 结果与分析 　　2.1 二氧化氯溶液中有效二氧化氯含量的测定 　　利用碘量法测定二氧化氯贮备液中二氧化氯的浓度，以制备二氧化氯标准溶液。分别取0.00mL、10.00mL、20.00mL、40.00mL、60.00mL、80.00mL、100.00mL二氧化氯溶液，置于七个100mL容量瓶中，用无氯蒸馏水稀释至刻度，摇匀。在430nm波长下，选用1cm比色皿，以无氯蒸馏水调零，测量吸光度，如图1。 　　碘量法测定贮备溶液有效二氧化氯含量为246.7mg/L，通过标准曲线得出吸光度为0.1对应的二氧化氯浓度为 44.5mg/L。 　　2.2 不同活化方法对