红大戟中蒽醌和三萜类化学成分.docVIP

红大戟中蒽醌和三萜类化学成分 　　[摘要] 运用硅胶、MCI、Sephadex LH-20柱色谱及半制备型HPLC等色谱方法，从红大戟95%乙醇提取物中分离得到9个化合物， 通过理化性质和NMR、MS等波谱数据鉴定化合物的结构为1，3-二羟基-2-羧基-9，10-蒽醌（1）， 1-甲氧基-3，6-二羟基-2-羟甲基-9，10-蒽醌（2）， 1，2，3-三羟基-9，10-蒽醌（3）， 阿江榄仁酸（4）， 2α，3β，24-三羟基齐墩果-12-烯-28-酸（5）， 2α，3β，19α，24-四羟基乌苏-12-烯-28-酸（6）， 2α，3β，24-三羟基乌苏酸（7）， 2α，3β，23-三羟基乌苏-12-烯-28-酸（8）和胡萝卜苷（9）。化合物1～9均为首次从该属植物中分离得到。 　　[关键词] 红大戟； 蒽醌； 三萜； 化学成分 　　红大戟Knoxia roxburghii（Sprengel）[1]， 原称K. valerianoides， 为茜草科Rubiaceae红芽大戟属植物， 多年生草本， 分布于我国南部多个省份， 主产于广西。红大戟的块根入药， 有泻水逐饮、攻毒消肿散结的功效； 主治胸腹积水、二便不利、痈肿疮毒等症[2]。红芽大戟属药用植物主要含有蒽醌、黄酮苷和色原酮苷类成分， 药理活性研究报道较少[3]。前期工作从红大戟中得到蒽醌、三萜、木脂素、香豆素、甾酮等成分， 体外活性筛选实验结果表明， 部分蒽醌具有抑制巨噬细胞分泌NO及肝细胞损伤保护活性[3-6]。为进一步寻找红大戟中的活性成分， 本实验对其95%乙醇提取物进行系统研究， 从中得到9个化合物， 均为首次从该属植物中分离得到， 本文报道它们的分离和结构鉴定。 　　1 材料 　　质谱用VG Autospec 3000型质谱仪测定；NMR用Bruker Avance Ⅲ 500核磁共振仪测定， TMS作内标；MCI树脂为Mitsubishi Chemical 公司生产；凝胶Sephadex LH-20为Amersham Pharmacia公司生产；柱色谱硅胶为青岛海洋化工厂生产；薄层色谱板为烟台江友硅胶发展有限公司生产；Waters 600型高效液相色谱仪， Ultimate XB-C18色谱柱（20 mm×250 mm，5 μm）， Waters 2489检测器；所用试剂均为分析纯或色谱纯。红大戟药材购自河北省安国中药市场， 经中国医学科学院药物研究所马林副研究员鉴定为红大戟K. roxburghii， 标本现存于中国医学科学院药物研究所植物标本室， 标本号为HDJ070413。 　　2 提取与分离 　　红大戟的干燥块根20 kg， 用95%乙醇超声提取3次， 减压浓缩得浸膏3.9 kg，将其分散于4 L水中， 用乙酸乙酯萃取3次， 得乙酸乙酯萃取部分400 g。该部分用硅胶柱色谱分离， 石油醚-丙酮梯度洗脱得到9个部分（Fr.1～Fr.9）。 　　Fr.6（30 g）用硅胶柱色谱分离， 氯仿-甲醇梯度洗脱得到7个小部分（Fr.6-1～Fr.6-7）。Fr.6-5（4.7 g）用甲醇溶解， 经MCI树脂充分吸附后， 用甲醇-水梯度洗脱。60%甲醇洗脱部分用凝胶Sephadex LH-20（150 g， 石油醚-氯仿-甲醇5∶5∶1）柱色谱分离， 再经半制备型HPLC（甲醇-水67∶33）纯化得到化合物6（13.2 mg）。70%甲醇洗脱部分用凝胶（石油醚-氯仿-甲醇5∶5∶1）柱色谱分离得到2个小部分（M-70-1和M-70-2）， M-70-1（50 mg）用半制备型HPLC（甲醇-水85∶15）分离得到化合物5（14.4 mg）和7（15.4 mg）， M-70-2（42 mg）用半制备型HPLC（甲醇-水 80∶20）分离得到化合物4（19.3 mg）和8（6.4 mg）。Fr.6-6浓缩过程中析出白色沉淀， 过滤并用甲醇反复洗涤得到化合物9（200 mg）。 　　Fr.7（20 g）用甲醇溶解， 经MCI树脂充分吸附后， 用甲醇-水梯度洗脱。60%甲醇洗脱部分用凝胶Sephadex LH-20（150 g， 氯仿-甲醇1∶1）柱色谱分离， 得到化合物1（6 mg）， 70%甲醇洗脱部分用凝胶Sephadex LH-20（150 g， 氯仿-甲醇1∶1）柱色谱分离， 得到化合物2（8 mg）和3（10 mg）。 　　3 结构鉴定 　　化合物1 橙红色无定形粉末；ESI-MS m/z 283[M-H]-。1H-NMR（DMSO-d6，500 MHz）δ：6.94（1H，s，H-4），8.13（1H，d，J=7.5 Hz，H-5），7.89（1H，t，J=7.5 Hz，H-6），7.80（1H，t，J=7.6 Hz，H-7），8.10（1H，d，J=7.5