MF168-M5纤维类组织RNA快速提取试剂盒-聚合美.DOCVIP

M5 纤维类组织RNA快速提取试剂盒 使用说明书 产品名称 单位 货号 M5 纤维类组织RNA快速提取试剂盒 50T MF168-05 【储存条件】1) 所有溶液应该是澄清的，如果环境温度低时溶液可能形成沉淀，此时不应该直接使用，可在37℃水浴加热几分钟，即可恢复澄清。 2) 不合适的储存于低温（4℃或者-20℃）会造成溶液沉淀，影响使用效果，因此运输和储存均在室温下（15℃-25℃）进行。 3) 为避免降低活性，方便运输，提供蛋白酶K为冻干粉状，收到后，可短暂离心后，加入0.25ml （20次）和0.5ml （50次）RNase-free H2O溶解。因为反复冻融可能会降低酶活性，因此溶解后可立即按照每次使用量分装冻存，-20℃保存。 4) 避免试剂长时间暴露于空气中产生挥发、氧化、PH值变化，各溶液使用后应及时盖紧盖子。 【产品简介】独特的裂解液/β-巯基乙醇迅速裂解细胞和灭活细胞RNA酶，然后用乙醇调节结合条件后,RNA在高离序盐状态下选择性吸附于离心柱内硅基质膜， 再通过一系列快速的漂洗－离心的步骤, 去蛋白液和漂洗液将细胞代谢物，蛋白等杂质去除， 最后低盐的RNase free H2O将纯净RNA从硅基质膜上洗脱。 【产品特色】1) 离心吸附柱内硅基质膜全部采用特制吸附膜，柱与柱之间吸附量差异极小，可重复性好。 2) 不需要使用有毒的苯酚，氯仿等试剂，也不需要乙醇沉淀等步骤。 3) 快速，简捷，单个样品操作一般可在30分钟内完成。 4) 多次柱漂洗确保高纯度，OD260/OD280典型的比值达1.9～2.0，基本无DNA残留,可用于RT-PCR，Northern-blot和各种实验。 【产品组份】 50T 注意事项 裂解液RLT 50 ml 室温密闭干燥保存 去蛋白液RW1 40 ml 室温密闭干燥保存 漂洗液RW 10 ml 初次使用前请按瓶标说明加入指定量的无水乙醇 RNase-Free H2O 40 ml 室温密闭干燥保存 蛋白酶K粉末 20mg -20度 RNase-Free吸附套管 50套 室温密闭干燥保存 【注意事项】 1. 所有的离心步骤均在室温完成，使用转速可以达到13,000 rpm的传统台式离心机，如Eppendorf 5415C 或者类似离心机。 2. 需要自备乙醇， β-巯基乙醇，一次性注射器，研钵，水浴锅等。 3. 裂解液RLT 和去蛋白液RW1中含有刺激性化合物，操作时要戴乳胶手套，避免沾染皮肤，眼睛和衣服。若沾染皮肤、眼睛时，要用大量清水或者生理盐水冲洗。 4. 预防RNase 污染，应注意以下几方面：1) 经常更换新手套。因为皮肤经常带有细菌，可能导致RNase 污染。 2) 使用无RNase 的塑料制品和枪头避免交叉污染。 3) RNA 在裂解液RLT 中时不会被RNase 降解。但提取后继续处理过程中应使用不含RNase 的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿可在150℃烘烤4 小时，塑料器皿可在0.5 M NaOH 中浸泡10 分钟，然后用水彻底清洗，再灭菌，即可去除RNase。 4) 配制溶液应使用无RNase 的水。（将水加入到干净的玻璃瓶中，加入DEPC至终浓度0.1%( v/v)，37℃放置过夜，高压灭菌。） 5. 关于DNA 的微量残留： 一般说来任何总RNA提取试剂在提取过程中无法完全避免DNA的微量残留,本公司的EASYspin系列RNA提取产品，由于采取了本公司独特的缓冲体系和选择了特殊吸附能力的吸附膜，在大多数RT-PCR 扩增过程中极其微量的DNA残留（一般电泳EB染色紫外灯下观察不可见）影响不是很大, 如果要进行严格的mRNA表达量分析如荧光定量PCR,我们建议在进行模板和引物的选择时： 1) 选用跨内含子的引物,以穿过mRNA中的连接区,这样DNA就不能作为模板参与扩增反应。 2) 选择基因组DNA和cDNA上扩增的产物大小不一样的引物对。 3) 将RNA提取物用RNase-free的DNase I 处理。本试剂盒还可以用于DNase I处理后的RNA清洁(cleanup),请联系我们索取具体操作说明书。 在步