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(3)大肠杆菌不能降解纤维素,但转入上述建构好的表达载体后则获得了降解纤维素的能力,这是因为________________________________________。 Ⅱ.温度对BglB酶活性的影响。 (4)据图1、2可知,80 ℃保温30分钟后,BglB酶会______________;为高效利用BglB酶降解纤维素,反应温度最好控制在______________(单选)。 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 A.50 ℃ B.60 ℃ C.70 ℃ D.80 ℃ 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 Ⅲ.利用分子育种技术提高BglB酶的热稳定性。在PCR扩增bglB基因的过程中,加入诱变剂可提高bglB基因的突变率。经过筛选,可获得能表达出热稳定性高的BglB酶的基因。 (5)与用诱变剂直接处理嗜热土壤芽胞杆菌相比,上述育种技术获得热稳定性高的BglB酶基因的效率更高,其原因是在PCR过程中______________(多选)。 A.仅针对bglB基因进行诱变 B.bglB基因产生了定向突变 C.bglB基因可快速累积突变 D.bglB基因突变不会导致酶的氨基酸数目改变 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 解析:(1)bglB基因存在于嗜热土壤芽孢杆菌基因组中,故应以该菌的基因组DNA为模板进行基因扩增。(2)目的基因与质粒进行重组时,需将目的基因插入到启动子和终止子之间,且应靠近启动子和终止子,结合示意图可知,应在扩增的bglB基因两端分别引入NdeⅠ和BamHⅠ两种限制酶的识别序列。(3)该基因表达载体中含有bglB基因,其可表达产生β-葡萄糖苷酶,其可分解纤维素,这样大肠杆菌就获得了分解纤维素的能力。(4)由图2可知,BglB酶在80 ℃保温30分钟后,该酶就会失活;由图1可知,当温度为60~70 ℃时,酶活性较高,而由图2可知70 ℃时保温30分钟,酶活性开始减弱,而60 ℃保温30 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 分钟后酶活性基本不发生变化,由此可知为高效利用BglB酶降解纤维素,反应温度最好应控制在60 ℃,故选B。(5)在bglB基因扩增过程中加入诱变剂进行诱变处理,相比于诱变剂直接处理嗜热土壤芽孢杆菌,针对性更强;基因突变是不定向的;由于PCR过程基因扩增即DNA复制快速进行,发生突变后可进行快速积累,进而便于筛选;基因突变可能导致氨基酸数目的改变,如突变后的密码子变为终止密码子,可导致蛋白质合成提前终止,进而导致氨基酸数目变少。 答案:(1)嗜热土壤芽孢杆菌 (2)NdeⅠ BamHⅠ (3)转基因的大肠杆菌分泌出有活性的BglB酶 (4)失活 B (5)A、C 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 要点探究 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 蛋白质工程 基因工程 区 别 过 程 预期蛋白质功能→设计预期的蛋白质结构→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列 获取目的基因→构建基因表达载体→将目的基因导入受体细胞→目的基因的检测与鉴定 实 质 定向改造或生产人类所需的蛋白质 定向改造生物的遗传特性,以获得人类所需的生物类型或生物产品 结 果 可生产自然界没有的蛋白质 只能生产自然界已有的蛋白质 联 系 (1)蛋白质工程是在基因工程基础上,延伸出来的第二代基因工程 (2)基因工程中所利用的某些酶需要通过蛋白质工程进行修饰、改造 名师点睛 基因工程与蛋白质工程的比较 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 提能演练 1.(2014·天津卷)为达到相应目的,必须通过分子检测的是( ) A.携带链霉素抗性基因受体菌的筛选 B.产生抗人白细胞介素-8抗体的杂交瘤细胞的筛选 C.转基因抗虫棉植株抗虫效果的鉴定 D.21三体综合征的诊断 B 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 高分秘笈 解析:可通过将受体菌接种在含链霉素的培养基中筛选携带链霉素抗性基因的受体菌,A错误;抗人白细胞介素的杂交瘤细胞应通过抗原-抗体杂交技术筛选产生,B正确;在棉花田中人工放入害虫可检验转基因抗虫棉的抗虫效果,C错误;可利用显微镜检测21三体综合征,D错误。 基础回顾 要点探究 提能演练 栏目链接 高分秘笈 2.阅读如下材料: 资料甲 科学家将牛生长激素基因导入小鼠受精卵中,得到了体型巨大的“ 超级小鼠” ;科学家采用农杆菌转化法培育出转基因烟草。 资料乙 T4溶菌酶在温度较高时易失去活性。科学家对编码T4溶菌酶的基因进行了改造,使其表达的T4溶菌酶第3位的异亮氨酸变为半胱氨酸,在该半胱氨酸与第97位的半胱氨酸之间形成了一个二硫键,提高了T4溶菌酶的耐热性。 基础回顾 要点探究 提
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