动物繁殖学实验（1043418F7）_ 山东农业大学ppt课件.pptVIP

（四）精子形态的分类 1．头部畸形的精子 包括：窄头、头基部狭窄、梨形头、圆头、巨头、小头、头基部过宽、双头、顶部脱落等。但以前六种居多。 2．尾部畸形精子 包括：带原生质滴的精子（近端、远端）、无头的尾（它和无尾的头往往是一个精子的两部分，在分析时一般算作尾部的畸形）、单卷尾、多重卷尾、环形卷尾、双尾等。 3．中段畸形 包括：颈部肿胀、中段纤丝裸露、中段呈螺旋状、双中段等。 二、材料 1．实验动物： 5～6周龄昆明白系雌性小鼠为超数排卵的供体，成年同系公鼠与之1:1配比。 2．药物与试剂： PMSG、hCG、75％酒精、冲胚液（mPBS）、矿物油。 3．器材： 一次性1ml注射器、镊子、剪刀、表面皿、巴氏吸管、Ф直径35mm培养皿、实体显微镜等。 三、超数排卵方法及胚胎采集 取5～6周龄昆明白系雌性小鼠，间隔48h分别腹腔注射10IU PMSG和hCG，hCG注射后与性成熟公鼠合笼，次日检查阴道栓。 有栓雌鼠在注射hCG后78～84h处死、摘取子宫。 在实体显微镜下，用含有mPBS液的1ml注射器将子宫置于表面皿中冲洗3遍，以回收桑椹胚及早期囊胚。 操作液和胚胎置于37℃恒温台上保存。 四、胚胎质量鉴定 将回收的胚胎用mPBS洗净后，移入新鲜的覆盖有矿物油的100μl mPBS液滴中，在4×10倍以上实体显微镜下进行胚胎质量鉴定。 （一）胚胎的级别划分 目前对胚胎的质量鉴定基本上采用形态学的方法 将胚胎分为A级（1级）、B级（2级）、C级（3级）和D级（4级）四个级别。 其中A级和B级胚胎为可移植胚胎。 （二）异常胚胎 异常胚胎指胚胎体积过小、过大、呈椭圆形、扁形、带有大型极体，细胞内有大空泡，透明带破裂、收缩，卵裂球色泽发暗、界限不清、个别萎缩、边缘变得粗糙，空透明带，在透明带内无一定结构的变性胚胎等。 （三）未受精卵 呈圆球形，外周有一圈折光性强且发亮的透明带，中央为质地均匀色泽较暗的细胞质，透明带和卵黄膜之间的空隙很小甚至看不到。 五、作业 将观察到的不同发育阶段的正常胚胎、异常胚胎或未受精卵绘图并加以说明。 实验五 人工授精器材的认识和假阴道的安装 一、目的和要求 1．熟悉人工授精所用的采精和输精器材,了解其用途及使用方法。 2．练习假阴道的安装方法。 二、材料和仪器设备 1．采精器材： 各种公畜采精用假阴道，牛、羊电刺激采精棒，猪手握法采精用的橡胶手套等。 2．输精器材： 各种母畜输精器、阴道开张器、额灯和手电筒。 3．辅助器材及药品： 高压灭菌器、酒精灯、长柄钳、镊子、玻璃棒、棒状温度计、漏斗、量杯、灭菌凡士林、70％和95％酒精棉球、滑石粉、来苏儿、洗衣粉等。 三、方法和步骤 先讲解人工授精器材的构造、各部名称和用途，并作假阴道安装的示范。然后学生分组观察并作假阴道的安装练习。 （一）人工授精器材的认识： 1．假阴道： 长筒状，由外壳、内胎和集精杯（管）三个主要部分组成。 外壳 内胎 集精杯（管） 2．输精器： 苏式牛、羊输精器为一长颈玻璃注射器。 目前常用的为金属或塑料制成的输精管，其后连接一个橡皮球。冷冻细管精液输精则使用特制的卡苏枪或输精器。 对一些家畜的输精需借助阴道开张器和额灯或手电筒照明进行。开张器的种类和大小因畜种而异。 （二）假阴道的准备要点 1．假阴道外壳及内胎的检查 2．采精器材的清洗 3．内胎的安装： 4．消毒 5．集精杯（管）的的安装 6．注水： 7．涂润滑剂： 8．调节假阴道内腔的压力： 9．假阴道内腔温度的测量： 10．用一块褶成四折的消毒纱布盖住假阴道入口，以防灰尘落入，即可准备采精。 (三) 输精器材的准备 金属和玻璃制成的输精管、输精枪，最好用高压蒸汽消毒，在输精前最好将输精管用稀释液冲洗1～2次。 细管冷冻精液的输精器一般由金属外壳和里面的推杆组成。使用前金属外套应进行消毒，前端的金属套不能连续使用。使用时将细管的一端剪去，另一端插在输精枪的推杆上。借助推杆，推动细管中的活塞即可将精液推出。 若采用开张器法输精，需对开张器先进行严格消毒方可使用。 四、作业 指出各种公畜采精器材的异同及优缺点，试提出改进意见。 实验六 精液品质的肉眼检查及精子活率评定 一、目的和要求 掌握检查精子密度、评定活率的方法； 熟悉肉眼检查精液品质的方法； 验证观察理化因素对精子运动及生存能力的影响。 二、材料和仪器 1．精液： 牛、猪或兔等任一种动物的精液。 2．药品器械： 显微镜、显微镜保温箱（或显微镜恒温台）、载玻片、盖玻片、搪瓷盘、温度计、滴管、擦镜纸、纱布、试管、3%和0.9%氯化钠溶液、2%煤酚皂溶液、1/1000新洁而灭溶液、76%酒精、5%伊红、1%苯胺黑。 3．精子密度的投影图表 三、内容和方法 （一）精