液相色谱方法建立.pdfVIP

下载本文档

12
1
约3.15万字
约 82页
2018-07-24 发布于浙江
举报
版权申诉

液相色谱方法建立.pdf

1、本文档共82页，可阅读全部内容。
2、原创力文档（book118）网站文档一经付费（服务费），不意味着购买了该文档的版权，仅供个人/单位学习、研究之用，不得用于商业用途，未经授权，严禁复制、发行、汇编、翻译或者网络传播等，侵权必究。
3、本站所有内容均由合作方或网友上传，本站不对文档的完整性、权威性及其观点立场正确性做任何保证或承诺！文档内容仅供研究参考，付费前请自行鉴别。如您付费，意味着您自己接受本站规则且自行承担风险，本站不退款、不进行额外附加服务；查看《如何避免下载的几个坑》。如果您已付费下载过本站文档，您可以点击这里二次下载。
4、如文档侵犯商业秘密、侵犯著作权、侵犯人身权等，请点击“版权申诉”（推荐），也可以打举报电话：400-050-0827(电话支持时间：9:00-18:30)。
5、该文档为VIP文档，如果想要下载，成为VIP会员后，下载免费。
6、成为VIP后，下载本文档将扣除1次下载权益。下载后，不支持退款、换文档。如有疑问请联系我们。
7、成为VIP后，您将拥有八大权益，权益包括：VIP文档下载权益、阅读免打扰、文档格式转换、高级专利检索、专属身份标志、高级客服、多端互通、版权登记。
8、VIP文档为合作方或网友上传，每下载1次，网站将根据用户上传文档的质量评分、类型等，对文档贡献者给予高额补贴、流量扶持。如果你也想贡献VIP文档。上传文档

HPLC方法建立分离的简单原则出得来分得开尽量快 HPLC方法建立样品情况、分离目的样品预处理？检测器、设置预实验；优化分离条件检查问题或特殊步骤定量、定性、纯化论证方法 HPLC方法建立的一般步骤 1、实验前应知道 样品的性质：所含化合物的数目化合物的化学结构式化合物的分子量化合物的UV光谱图化合物在样品中的浓度范围样品的溶解度分离目的 定量？杂质？提纯？ 解析样品中所有成分？ 定量准确度与精密度？ 样品基质？样品形态?多种HPLC方法？ 样品数量？缩短柱长或加快流速牺牲分离度 设备、柱恒温？梯度洗脱？ 员工技能？ 方法通用性？ 2～3、样品预处理与检测样品来源形式不同，可能以如下形式出现可直接进样的溶液需稀释、pH缓冲、加入内标或其他定容操作的溶液必须首先溶解或提取处理的固体样品需预处理以除去干扰物，或对样品进行富集检测性质所选择的检测器能检测到所有的被测样品组分衍生化技术产生原因提高检测器上无响应或响应很小的化合物的检测灵敏度。衍生化反应必备条件：  反应速度要快  要发生定量反应，至少要有好的重复性  反应产物是单一产物  衍生试剂与衍生产物能分离测定18种氨基酸 200 4 17 150 12 100 mV 5 8 9 1 6 11 14 50 10 3 7 2 15 13 16 18 0 10 20 30 40 Time(minutes) 试样溶剂的影响等度条件下进样溶剂对基线的影响试样溶剂对峰形的影响蜂蜜中苯酚HPLC 分析甲醇溶剂 • Agilent Zorbax XDB-C18色谱柱，规格为150×4.6mm ， 5μm； • 流动相：乙腈+水（18/82, v/v）；流速 1.0mL/min； • 检测波长195nm；乙腈溶剂进样量：80μL。样品溶剂的影响 2 1 样品溶剂：A. 100% 乙腈；B. 流动相色