酶工程教学课件 酶工程绪论.pptVIP

酶工程;绪论; 1、 酶的概念;酶包括： （1）Enzyme proteins 酶是由生物体产生的具有催化剂活性的蛋白质（2）Ribozyme RNAs 本身就是一段RNA，不需要额外的蛋白酶就可以对自身进行剪切。;;酶工程;;1. 酶的产生;酶工程研究的内容;3、酶和细胞固定化： 酶和细胞固定化研究是酶工程的中心任务。 为了提高酶的稳定性，重复使用酶制剂，扩大酶制剂的应用范围，采用各种固定化方法对酶进行固定化，制备了固定化酶，如固定化葡萄糖异构酶、固定化氨基酰化酶等，测定各种固定化酶的各种性质，并对固定化酶作各种应用和开发研究。 目前，固定化酶仍具有强大的生命力，它受到生物化学、化学工程、微生物、高分子、医学等领域的高度重视。 ; 4、酶分子改造：又称为酶分子修饰。 为了提高酶的稳定性，降低抗原性，延长药用酶在机体内的半衰期，采用各种修饰方法对酶分子结构进行改造，以便创造出天然酶所不具备的某些优良特性（如较高的稳定性、无抗原性、抗蛋白酶水解等），甚至于创造出新的酶活性，扩大酶的应用，从而提高酶的应用价值，达到较大的经济效益和社会效益。 改造包括（A）用蛋白质工程技术对酶分子结构基因进行改造，希望获得一级结构和空间结构较为合理的具有优良特性、高活性的新酶（突变酶）。（B）用化学法或酶法改造酶蛋白的一级结构，或者用化学修饰法对酶分子中侧链基团进行修饰，以便改变酶学性质。;5、有机介质中的酶反应： 由于酶在有机介质中的催化反应具有许多优点，因此，近年来酶在有机介质中催化反应的研究，成为酶工程中一个新的发展方向。酶在有机介质中要呈现很高的活性，必须具备哪些条件？有机介质对酶的性质有哪些影响？如何影响的？近年来，对这些问题的研究，已取得重要进展。 ;6、酶的传感器：又称为酶电极。 酶电极是由感受器（如固定化酶）和换能器（如离子选择性电极）所组成的一种分析装置，用于测定混合物溶液中某种物质的浓度。其研究内容包括：酶电极的种类、结果与原理；酶电极的制备、性质及应用。 ; 酶反应器的类型、特性，设计和制造，应用等;8、抗体酶、核酶和人工模拟酶： 抗体酶是一类具有催化活性的抗体。是抗体的高度专一性与酶的高效催化能力二者巧妙结合的产物。 研究内容是：抗体酶的制备、结构、特性、作用原理、催化反应类型、应用等。; 人工酶是用人工合成的具有催化活性的多肽或蛋白质，据1977年Dhar等人报道，人工合成的Glu-Phe-Ala-Glu-Glu-Ala-Ser-Phe八肽具有溶菌酶的活性。其活性为天然溶菌酶的50％。 利用有机化学合成的方法合成了一些比酶结构简单得多的具有催化功能的非蛋白质分子，这些物质分子可以模拟酶对底物的结合和催化过程，既高效又能够克服酶的不稳定性。这样的物质分子称为模拟酶。目前用环状糊精已成功地模拟了胰凝乳蛋白酶等多种酶。 ;9、酶的应用技术;三、酶工程的发展概况;;;酶学理论研究 1890年，Fisher——锁钥学说。 1902年，Henri——中间产物学说。 1913年， Michaelis 和 Menten——米氏学说。 1958年， Koshland——诱导契合学说。 1960年，Jacob 和 Monod——操纵子学说。;;;酶学研究领域中的诺贝尔奖获得者;1、1975美国的特明和巴尔蒂莫尔发现了逆转录酶 2、1978年瑞典的阿尔伯、美国的内森斯和史密斯 －限制性内切酶的发现和应用 3、2009年三位美国科学家伊丽莎白·布莱克本、卡萝尔·格雷德、杰克·绍斯塔克发现了端粒和端粒酶保护染色体的机理。 诺贝尔生理或医学奖 ;（1）新酶的发现和鉴定 发现有25000多种酶，数千种酶已鉴定，数百种酶得到了结晶，并测出了一级结构，每年都有新酶发现。;（2）酶一级结构与活力的关系 过去主要用化学修饰的方法研究酶一级结构与活力的关系;（3）酶分子高级结构的 测定;（4）酶活性部位结构及催化机理的研究，这是酶学研究最核心的问题。 （5）Ribozyme的发现，过去认为，酶是由活细胞产生的具有催化作用的蛋白质，近年来，发现生物体中的一些RNA和DNA也具有催化作用，具有酶的类似性质，被称为Ribozyme（核酶）。Ribozyme是生物催化剂，可切割特异性RNA序列的RNA分子。这一重大的发现，对于生命起源和生物进化的研究，对于基因、病毒和肿瘤的治疗，具有重大的意义。; 采用生物体生产酶剂是从19世纪末开始的。 1894年，日本的高峰让吉首先从米曲霉中制备得到高峰淀粉酶，用作消化剂，开创了近代酶的生产和应用的先例。 1908年，德国的罗姆（Rohm)从动物胰脏中制得胰酶，用于皮革的软化； ; 1908年，法国的波伊