三拗芎葶合剂对低氧性肺动脉高压大鼠血浆anpcnp影响的实验分析-experimental analysis of the effect of san - xiong - ting mixture on plasma anp cnp in hypoxic pulmonary hypertension rats.docxVIP

声明硕士学位论文《三拗芎葶合剂对低氧性肺动脉高压大鼠血浆ANP/CNP影响的实验研究》是本人在成都中医药大学攻读硕士学位期间在导师指导下完成的，该论文涉及的有关知识产权归成都中医药大学所有。有关该学位论文成果的开发、转让、论文发表等，均需征得导师和成都中医药大学同意。研究生（签名）：导师（签名）：２００7年５月前言低氧性肺动脉高压（HypoxicPulmonaryHypertension,HPH）是慢性阻塞性肺疾病向肺心病发展的中心环节，它的产生及严重程度明显影响着肺心病的发生、发展、病程及预后。因此，有关HPH发病机制和治疗研究一直是国内外研究前沿的重点、难点和热点。现代医学认为，低氧性肺血管收缩及血管结构的重建在其发病机制中占重要地位。慢性低氧可使肺血管收缩，是由于各种血管收缩因子的增多或松弛因子的降低所致的血管舒缩失衡之缘故。低氧还可产生多种促平滑肌细胞和内皮细胞增殖因子，这些因子在肺内分布和表达增多对低氧性肺动脉高压和肺血管重建的形成起关键作用。因此在进行肺动脉高压防治研究过程中必须同时考虑如何减少肺血管重建的问题。以往认为缺氧性肺血管构型重建是不可逆的，但近年来的研究正逐步改变这一看法[1]。判断肺动脉高压存在与否，主要依据两个指标：一是血流动力学指标，即测定肺动脉压力，二是形态学指标，即肺血管重建和右心室肥厚程度，其中肺血管重建主要包括管壁增厚和管腔狭窄。因此治疗上以降低肺动脉高压和逆转肺血管重建，改善右室肥厚为出发点。目前西医多采用氧疗、血管扩张剂（包括α受体阻滞剂、钙离子拮抗剂、钾离子通道开放剂及一氧化氮吸入等）以及各种细胞因子和介质拮抗剂，促细胞生长因子阻滞剂等治疗，临床已取得一定效果。但是充分氧疗并不能完全扭转或降低低氧性肺动脉高压,在我国大多数COPD患者尚无条件进行充分氧疗,且许多血管扩张剂在降低肺动脉的同时,会引起体循环血压下降,导致冠脉血流减少,使右心功能恶化,影响肺内通气血流比而加重低氧血症。鉴于西药治疗的局限性，突出中医药特色，充分发挥中医药优势，提高中医药治疗的疗效已成为国内外研究HPH防治的一个新热点。近年来，我国中医药学者发现了不少具有降低肺动脉高压的中药复方和单味药，并进行了有关药理作用和临床应用等方面的研究，对临床应用具有很大的指导意义。我们研究认为痰瘀阻肺为COPD继发肺心病HPH的主要病机,复方三拗芎葶合剂由导师杨仁旭总结多年中西医结合临床经验，采撷传统中医之精华并结合现代中药药理学研究进展，针对上述基本病理改变，采用了宣肺化痰，行气化瘀法进行组方，主要由麻黄、杏仁、川芎、葶苈子等组成。该组方经辨证加减试用于临床已具有较好疗效，因此，进一步研究开发是必要及有益的。本实验研究的目的在于,用自制常压低氧舱建立慢性HPH大鼠模型,旨在观察慢性缺氧大鼠血浆中ANP,CNP含量变化,观察肺动脉压、右心室肥厚的变化、肺血管结构重建以及肺组织形态学改变,通过研究中药复方制剂三拗芎葶合剂对HPH的干预作用,进一步探讨肺血管结构重建以及ANP、CNP在HPH发病机制中的作用，并为三拗芎葶合剂在临床上防治肺动脉高压提供实验依据。1实验材料1.1实验动物及分组实验研究健康成年SD大鼠50只，雄性，体重192.3～237.8g，由四川省中医研究院实验动物中心提供[合格证号：scxk(111)2004-15]。按照随机数字表，分为5组：正常对照组、模型组、卡托普利组、三拗芎葶合剂中、高剂量组，每组各10只。分笼饲养，自由饮水和摄食。1.2饲养及饲养环境全价颗粒饲料喂养（内含钙1.1％，磷0.61％），自由摄食、饮水，室温18-22℃，空气流通，相对湿度55-80﹪。1.3实验药物与试剂（1）三拗芎葶合剂：由四川省药材公司提供合格药材，经成都中医药大学附属医院药剂加工厂煎煮、回收挥发性成分、浓缩，制成含生药100g/100ml的药液；（见附件一）（2）卡托普利：安徽仁济制药有限公司，批号：060412；（3）肝素：为苏州生化制药厂产品，批号（4）氨基甲酸乙酯：为成都科龙化工试剂厂生产，批号（5）碱石灰：辽宁沈阳医药股份有限公司经销，批号：010201；（6）无水氯化钙：成都市联合化工试剂研究所，批号：2006081442（7）ANP,CNP试剂盒：由解放军总医院科技开发中心免疫所提供，批号（8）氮气：四川拓展特种气体有限责任公司提供1.4实验仪器及设备（1）常压低氧舱：自制(见附件二)（2）BH-20LYMPUS光学显微镜：成都中医药大学病理教研室提供（3）Mias-2000病理图像分析系统：成都中医药大学病理教研室提供（4）TS-12G自动脱水机：湖北省医用电子仪器厂（5）病理组织包埋冷冻台：常州郊区中威电子仪器厂（6）病理组织漂烘处理仪：常州郊区