芍药苷对sd大鼠脓毒症性急性肝损伤模型nrf2γ-gcs表达的影响-effect of paeoniflorin on nrf 2γ - gcs expression in sd rats with sepsis-induced acute liver injury.docxVIP

南华大学学位论文原创性声明本人声明，所呈交的学位论文是本人在导师指导下进行的研究工作及取得的研究成果。尽我所知，除了论文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得南华大学或其他单位的学位或证书而使用过的材料。与我共同工作的同志对本研究所作的贡献均已在论文中作了明确的说明。本人完全意识到本声明的法律结果由本人承担。作者签名：年月日南华大学学位论文版权使用授权书本学位论文是本人在南华大学攻读硕士学位期间在导师指导下完成的学位论文。本论文的研究成果归南华大学所有，本论文的研究内容不得以其它单位的名义发表。本人同意南华大学有关保留、使用学位论文的规定，即：学校有权保留学位论文，允许学位论文被查阅和借阅；学校可以公布学位论文的全部或部分内容，可以采用复印、缩印或其它手段保留学位论文；学校可根据国家或湖南省有关部门规定送交学位论文。同意学校将论文加入《中国优秀博硕士学位论文全文数据库》，并按《中国优秀博硕士学位论文全文数据库出版章程》规定享受相关权益。同意授权中国科学信息技术研究所将本学位论文收录到《中国学位论文全文数据库》，并通过网络向社会公众提供信息服务。对于涉密的学位论文，解密后适用该授权。作者签名：年月日导师签名：年月日目录中英文对照表Ⅰ摘要IIIAbstractV第1章绪论11.1国内外研究现状11.2研究内容及意义1第2章材料与方法32.1实验材料32.1.1主要药物及试剂32.1.2主要仪器设备及耗材42.1.3实验动物52.2实验方法52.2.1模型制备、分组及干预方案52.2.2生存率观察52.3统计学方法14第3章结果153.1一般情况观察及生存率比较153.2血清ALT、肝组织SOD、MDA、IL-6、TNF-α水平153.3肝组织病理改变163.4肝组织Nrf2、γ-GCS表达17第4章讨论194.1脓毒症性ALI实验模型194.2PF抑制炎症反应在脓毒症性ALI发挥保护作用194.3PF在脓毒症性ALI抗氧化作用20第5章结论23参考文献25综述29硕士期间的科研成果37致谢39中英文对照词表ALIacuteliverinjury急性肝损伤AREantioxidantresponseelements抗氧化反应元件CLPCecalligationandpuncture盲肠结扎穿孔IL-6interleukin-6白细胞介素-6Keap1kelch-likeECH-associatedprotein1Kelch样ECH相关蛋白1MDAMalondialdehyde丙二醛Nrf2NF-E2-relatedfactor2核因子EF-E2相关因子PFpaeoniflorin芍药苷ROSreactiveoxygenspecies活性氧γ-GCSγ-glutamylcysteinesynthethase谷氨酰半胱氨酸合酶Real-TimePCRreal-timepolymerasechainreaction实时荧光定量聚合酶链反应SODTNF-αsuperoxidedismutasetumornecrosisfactor-alpha超氧化物歧化酶肿瘤坏死因子-αIII芍药苷对SD大鼠脓毒症性急性肝损伤模型Nrf2/γ-GCS表达的影响摘要:背景脓毒症是一种全身炎症反应综合征，易并发多器官功能衰竭。至今，脓毒症仍具有高发病率、高治疗费、高死亡率三大特点。脓毒症性急性肝损伤（ALI）是脓毒症重要的并发症之一，直接影响预后。目前氧化应激反应失衡被认为是脓毒症性ALI重要的发病机制之一。越来越多的研究证实芍药苷（PF）在肝脏疾病中发挥抗氧化作用，Nrf2-ARE是机体重要的抗氧化系统，但PF是否对脓毒症性ALI有保护作用，及通过调控Nrf2抗氧化通路发挥作用，目前国内外鲜有报道。目的观察PF对盲肠结扎穿孔（CLP）术诱导大鼠脓毒症性ALI的保护作用，探索PF干预作用是否通过调控Nrf2/γ-GCS发挥抗氧化作用。方法采用CLP术诱导建立脓毒症性ALI大鼠模型。第一部分：将36只SD雄性大鼠随机分成3组，每组12只，即假手术组、模型组、PF干预组。PF干预组术后立即予PF腹腔注射给药（90mg/kg/d），用生理盐水注射液配置，浓度为15mg/ml，按等浓度不等体积注射。观察造模处理后48h内各组大鼠的一般情况，及时清点大鼠的存活数，计算存活率，绘制生存曲线及进行生存分析。第二部分：将30只SD雄性大鼠随机分成3组，每组10只，分组及干预处理同上，术后6h处死存活鼠，留取血清标本，测定ALT水平；观察肝脏大体形态及HE染色肝组织病理改变；用黄嘌呤氧化酶法测定SOD活力，硫代巴比妥酸法测定MDA含量；III采用ELISA检测肝组织TNF-α和IL-6水平。采用WesternBlot检测Nrf