《医学实验室认可技术要求的关键控制点pcr专业》ppt课件.pptVIP

5.6 检验程序的质量保证(4-4) 5.6.6 实验室用两套及以上检测系统检测同一项目时，应有比对数据表明其检测结果的一致性，比对频次每年至少2次，每次不少于5份样本，浓度水平覆盖测量范围；比对结果的系统偏倚应符合附录A的要求。 使用不同生物参考区间的检测系统间不宜进行比对。 5.6.7 实验室管理层应定期检查室内质量控制记录（最少每月一次）和能力验证结果。应有针对内部质量控制和外部质量评价“不满意”结果采取纠正措施的记录。质量控制记录至少应保留2年。 5.6 检验程序的质量保证 一般核酸提取试剂促使靶核酸从细胞内释出的原理 核酸的分离纯化 靶核酸提取的质量 临床标本及核酸提取中可能存在的抑制和干扰物质 核酸样本制备及扩增检测的质控 产物检测的质控 核酸样本的制备、扩增检测及其质量控制 5.6 检验程序的质量保证 一般核酸提取试剂促使靶核酸从细胞内释出的原理 靶核酸可以与宿主细胞整合，核内游离及胞浆内各种构形存在于细胞内，如测定的是病原微生物,则靶核酸存在于细菌、病毒、原虫或真菌细胞内，如果上述细胞破裂,则靶核酸亦可存在于细胞外。 一般均使用去垢剂(如Triton-100)裂解细胞，用一种蛋白裂解酶(如蛋白酶K)消化结合于核酸的蛋白质，从而将靶核酸从细胞内释放出来。 5.6 检验程序的质量保证 核酸的分离纯化 核酸的分离纯化就是要将蛋白、脂类等干扰核酸扩增的物质去除。 经典方法 硅吸附法 对于商品核酸提取试剂盒，临床实验室在使用前，必须对其核酸提取纯度和效率进行评价。 5.6 检验程序的质量保证 靶核酸提取的质量 纯化的靶核酸的完整性：可使用凝胶电泳将样本的核酸提取物与一核酸标准比较测定。 核酸提取的产率：可在A260读数测定。 核酸纯度：可通过提取物A260/A280比率判定 血清或血浆中病原体核酸纯化纯度：采用一种间接的方法，即使用已知病原体含量的溶血和/或脂血标本用待评价试剂提取，然后进行扩增检测，比较所得到的结果。 非典型病原体感染对临床带来的挑战目前中国医药市场形势简析医药咨询公司难点热点问题讨论1例多发伤患者护理的思考脑卒中后吞咽障碍的神经肌肉电刺激治疗内科学第十八章第一节急性胰腺炎 医学实验室认可技术要求PCR专业的关键控制点 沈佐君 shenzuojun@163.com 《临床基因扩增检验实验室管理暂行办法》（卫医发[2002]10号） 《医疗机构临床实验室管理办法》（卫医发[ 2006]73号） 《医疗机构临床基因扩增检验实验室管理办法》（卫办医政发〔2010〕194号） 《临床基因扩增检验实验室基本设置标准》 《临床基因扩增检验实验室工作导则》 ISO15189 准则（CL02） CNAS-GL26医学实验室质量和能力认可准则在基因扩增检验领域的指南 CNAS医学实验室质量和能力认可准则在基因扩增检验领域的应用说明 参考依据 概 述 基因体外扩增检验通常称为PCR检验； 该检验项目是目前我国临床检验项目中唯一一项需要通过卫生部或省级临床检验中心现场技术验收合格方可开展临床检验的技术准入项目。 概 述 对实验室的要求： 实验室验收合格证书 人员上岗证书 实验室的布局 仪器设备要求 质量手册、管理程序文件、操作程序文件、作业指导书、记录表格等 1 范围 本文件规定了CNAS对医学实验室基因扩增检验领域的认可要求，包括病原体核酸扩增检验和病理学检查等领域涉及的人体基因扩增检验。 2 规范性引用文件 下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件仅注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件，其最新版本（包括修改单）适用于本文件。 GB/T 20468-2006《临床实验室定量测定室内质量控制指南》 卫办医政发〔2010〕194号《医疗机构临床基因扩增管理办法》 CNAS-RL02《能力验证规则》 4 管理要求 4.1.1 从事基于组织/细胞形态学基础项目检测的医学实验室，应具有病理学诊断资质。 5 技术要求 5.1 人员 5.1.2 基因扩增实验室（以下简称实验室）操作人员应经过有资质的培训机构培训合格取得上岗证后方可上岗。 5.1.4实验室负责人至少应具有以下资格：中级职称，医学相关专业背景，二年以上基因扩增工作经验。 5.1.11 实验室应制定员工能力评审的内容和方法，每年评审员工的工作能力；至少每半年评审新员工工作能力，并保存胜任的证据。当职责变更时，应有政策规定对员工进行再培训和再评审。没有通过评审的人员应经再培训和再评审，合格后才可继续上岗，并记录。 5.1.13 实验室应提供工作人员对患者隐私及结果保密的声明及签字。 5.1 人 员 操作人员考核的主要内容： 1. 标本接收与处理：流程和标本是否合格的要点 2. 试剂耗材质检：