渗透胁迫对玉米幼苗根尖细胞质膜calt2gt通道及calt2gtatpase活性的影响-effects of osmotic stress on cal t2 gt channel and cal t2 gt atpase activity in apical cytoplasmic membrane of maize seedlings.docxVIP

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2018-08-01 发布于上海
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渗透胁迫对玉米幼苗根尖细胞质膜calt2gt通道及calt2gtatpase活性的影响-effects of osmotic stress on cal t2 gt channel and cal t2 gt atpase activity in apical cytoplasmic membrane of maize seedlings.docx

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渗透胁迫对玉米幼苗根尖细胞质膜calt2gt通道及calt2gtatpase活性的影响-effects of osmotic stress on cal t2 gt channel and cal t2 gt atpase activity in apical cytoplasmic membrane of maize seedlings

摘摘要钙离子是细胞的第二信使，其浓度变化直接反映了细胞受外界刺激的变化情况。渗透胁迫下Ca2+浓度变化表明其在细胞抗旱生理反应过程中起重要的调控作用。钙离子通道和Ca2+．ATP鹊e(钙泵)是Ca2+跨膜运输的主要载体。本实验首先采用膜片钳技术，通过不同外源试剂处理，对渗透胁迫下玉米根尖细胞质膜钙通道的的变化特性进行了初步探索，同时测定了细胞质膜上Ca2+．ATPase的活性变化。旨在进一步探明Ca2+在植物干旱胁迫信号转导过程中的作用机制，为进一步研究Ca2+信使在植物抗旱生理中的作用提供理论依据。试验采用全细胞膜片钳技术，初步研究了渗透胁迫下质膜钙通道的存在类型及特性，记录到了玉米根尖细胞质膜存在的超极化激活的电压依赖性钙离子通道。PEG处理后钙离子电流强度增大，钙通道的开放时间明显提前。分别用ABA(脱落酸)，EGTA，VP (异搏定)，TFP(三氟拉嗪)处理发现：ABA作用使得钙电流增强，而EGTA，VP，TFP 均使得钙电流不同程度的减弱。这说明：PEG胁迫下，ABA可通过激活钙通道来促进钙离子内流，而EGTA，vP和TFP可能通过直接或间接抑制钙通道来阻止钙离子内流。实验以PEG6000模拟渗透胁迫，分别用EGTA、Ⅵ，和TFP进行外源处理，对玉米根尖细胞质膜钙离子御T酶活性进行了测定，结果表明：钙离子螯合剂EGTA和钙通道阻断剂Ⅵ，，以及钙调素抑制剂TFP能明显抑制质膜Ca2+．ATPaSe活性，而ABA则能提高质膜Ca2+．ATPaSe活性。实验结果表明，膜片钳与ca2+．ATPase活性检测两部分实验的结果显示：干旱和 ABA可以促进钙离子内流，而EGTA，vP和TFP可以阻止钙离子内流，胞内钙离子在干旱信号传递过程中发挥重要作用。关键词：玉米，渗透胁迫，钙离子信号，膜片钳， Ca2+．ATPase m AbstractAs Abstract As a seconda巧messeIlger in plant cell，c”os01ic ca2+conceIl饥ltion directly renects the chan百ng of sti舢lation outside of廿1e cell．Ca2+play趾important role iIl re鲥ating plant respollse to osmotic s臼．ess aIld drougllt resistance．Ca2+．p锄eable inward Ch锄el and ca2+．ATP嬲e are inlportant Ca2+胁1Spons in pl嬲ma m翎小ralle．h this p印er，the effect of osmotic s仃css on activi够of calci啪ch籼el a11d Ca2+．ATPaSe waS investigated to veri矽Ⅱ1e role of cytos01ic calci啪in si朗al仃aIlsduction of osmotic stimulation． By usiIlg wh01e-cell patch cl觚lping，a hype印01耐zation—actiVated calci啪pe姗eable ch锄e1 w邪recorded ill plasma meI】曲raIle of maize root tip cell．觚er osmotic stimulation (PEG骶atIllent)，t11e蝴t intellsity increased remafkably，and me opeIl v01tage of the cali吼collductaIlce elevated．ABA has sililar e行bct witll osmotic stress．The activation of calciu】[Il ch籼e1 i11itiated by ABA or osmotic s仃ess can be stron百y i|111ibitcd by EGTA， v印锄il and TFP．111e result suggest that osmotic s仃ess may exert it e虢ct by using ABA iIlduced calcil肛n innuX t11I．ou曲calci啪ChaIlnels w11ich seIlsitiVe t0 Verap锄il，and in仃acellular calIIlodulin play a role in this si鳃al caScade． Result丘om ca2+．ATPase measurement show that