炭疽毒素致死因子的重组制备与检测方法分析-recombinant preparation of lethal factor of anthrax toxin and analysis of its detection method.docx

主要缩 主要缩略词表 主要缩 主要缩略词表 英文缩写A英文全名a 英文缩写 A 英文全名 alanine 中文译名 丙氨酸 AP alkaline phosphatase 碱性磷酸酶 BCA bicinchoninic acid 二喹啉甲酸 BSA bovine serum albumin 牛血清白蛋白 cAMP cyclic adenosine monophosphate 环腺苷酸 D asparaginic acid 天冬氨酸 DNA deoxyribonucleic acid 脱氧核糖核酸 EC50 EDTA 50% effective concentration ethylenediamine tetraacetic acid 半数有效浓度 乙二胺四乙酸 EF edema factor 水肿因子 ELISA enzyme linked immunosorbent assay 酶联免疫吸附测定法 ET edema toxin 水肿毒素 FBS fetal bovine serum 胎牛血清 G glycine 甘氨酸 H histidine 组氨酸 His histidine 组氨酸 HRP horseradish peroxidase 辣根过氧化物酶 IPTG isopropylthio-β-D-galatoside 异丙基硫代半乳糖苷 LB Luria-Bertain broth LB 培养基 LF lethal factor 致死因子 LT lethal toxin 致死毒素 M methionine 甲硫氨酸 MAPKK kinases 促分裂原活化蛋白激酶激酶 mitogen-activated protein 促分裂原活化蛋白激酶激酶/细 kinases/ERK kinases 胞外信号调节激酶激酶 MEM minimum essential media 最小必需培养基 mRNA message ribonucleic acid 信使核糖核酸 mitogen-activated protein kinases MEK MTT 3-(4,5-Dimethylthiazol-2-yl)-2,5-di phenyltetrazolium bromide  溴化噻唑蓝四氮唑 I PAGE PAGE IV III III N asparagine 天冬酰胺 OD optical density 光密度 OmpA outer membrane protein A 外膜蛋白 A PA protective antigen 保护性抗原 PAGE polyacrylamidegel electrophresis 聚丙烯酰胺凝胶电泳 PBS phosphate buffered saline 磷酸盐缓冲液 PCR polymerase chain reaction 聚合酶链式反应 pNPP SDS p-nitrophenylphosphate sodium dodecylsulfate 磷酸对硝基苯酯 十二烷基磺酸钠 TBS/T tris buffered saline/tween20 三羟甲基氨基甲烷缓冲盐溶液/ 吐温 20 WB western blot 蛋白质印迹法 中文摘 中文摘要 中文摘 中文摘要 炭疽毒素致死因子的重组制备与检测方法研究 (摘要) 炭疽是一类严重威胁人类健康的烈性传染病，其病原体为炭疽芽孢杆菌（简 称炭疽杆菌）。炭疽杆菌在不适宜的生存条件下会形成具有极强抗逆性的芽孢， 其芽孢由于具有存活时间长、易于制备、易于散布等特性，是非常理想的生物战 剂和生物恐怖的原材料。 炭疽杆菌的毒力因子有两大类，一是荚膜，一是外毒素。荚膜的功能是抵抗 宿主的吞噬作用，帮助炭疽杆菌在宿主体内感染和生存。而炭疽杆菌的外毒素则 被认为是其致死的最主要因素，包含三种成分，水肿因子（edema factor，EF）， 致死因子（lethal factor，LF），保护性抗原（protective antigen，PA）。其中 PA 可 以与其细胞表面受体结合，被 furin 样蛋白酶切割并组装成七聚体或八聚体；EF 和 LF 可以与 PA 多聚体结合，形成的复合物通过内吞作用进入细胞。在胞质内， EF 具有腺苷酸环化酶的活性，能够上调 cAMP 的水平，LF 具有金属蛋白酶的活 性，能够切割 MEK 蛋白家族的成员。学界目前对炭疽感染者损伤甚至死亡的具 体机制还不清楚，但认为两类炭疽毒素，致死毒素 LT（lethal toxin，即 PA 与 LF 的混合物）和水肿毒素 ET（edema toxin，即 PA 与 EF 的混合物）在其中发挥着 主要作用，这也是炭疽感染晚期单纯的抗生素治疗难以发挥疗效的原因。 因此，在炭