环氧树脂固定化L谷氨酸氧化酶.PDFVIP

第 １６卷第４期 生　 物　 加　 工　 过　 程 Ｖｏｌ１６ Ｎｏ４ ２０１８年７月 ＣｈｉｎｅｓｅＪｏｕｒｎａｌ ｏｆ Ｂｉｏｐｒｏｃｅｓｓ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｊｕｌ． ２０１８ － ｄｏｉ：１０３９６９／ ｊｉｓｓｎ１６７２ ３６７８２０１８０４００５ 环氧树脂固定化Ｌ 谷氨酸氧化酶 １ １ １ ２ 张利坤 ，肖延铭 ，杨卫华 ，李敬亚 （１ 长兴制药股份有限公司 工业生物催化与转化浙江省工程研究中心，浙江 长兴 ３１３１００； ２ 郑州大学 化学与分子工程学院，河南郑州 ４５０００１） 摘　 要：通过环氧树脂作为载体对经（ＮＨ ） ＳＯ 盐析处理后的Ｌ 谷氨酸氧化酶（ＬＧＯＸ）进行固定化，优化固定化 ４ ２ ４ 工艺条件，并利用固定化ＬＧＯＸ转化产α 酮戊二酸（α ＫＧ）。 结果表明：饱和度４５％的（ＮＨ ） ＳＯ 为最佳盐析浓 ４ ２ ４ 度；当选用环氧树脂ＥＳ １０５作为固定化载体、树脂加量为２０ ｍＬ酶液（１４ Ｕ／ ｍＬ）加入３５ ｇ载体、固定化Ｋ ＰＯ ３ ４ 缓冲液浓度为０２ ｍｏｌ／ Ｌ（ｐＨ７０）、固定化温度２５ ℃、固定化时间２４ ｈ 时，固定化ＬＧＯＸ酶活力最高，其酶活回收 率为８５９％，比酶活５５７Ｕ／ ｇ。 利用该固定化酶转化Ｌ 谷氨酸产α ＫＧ，当谷氨酸钠质量浓度为１００ｇ／ Ｌ，反应２０ ｈ，产物收率达９８２％。 固定化酶重复使用１４批次后，产物收率仍有９０％以上；重复使用２０批，收率有８３２％。 因 此，该固定化酶具有具良好的操作稳定性。 关键词：环氧树脂；Ｌ 谷氨酸氧化酶；固定化；α 酮戊二酸；生物转化 － － － 中图分类号：Ｑ８１９　 　 　 　 文献标识码：Ａ　 　 　 　 文章编号：１６７２ ３６７８（２０１８）０４ ００３０ ０６ Ｉｍｍｏｂｉｌｉｚａｔｉｏｎ ｏｆ Ｌ⁃ｇｌｕｔａｍａｔｅ ｏｘｉｄａｓｅ ｂｙ ＥＳ⁃１０５ ｅｐｏｘｙ ｒｅｓｉｎ １ １ １ ２ ＺＨＡＮＧ Ｌｉｋｕｎ ，ＸＩＡＯ Ｙａｎｍｉｎｇ ，ＹＡＮＧ Ｗｅｉｈｕａ ，ＬＩＪｉｎｇｙａ （１Ｚｈｅｊｉａｎｇ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｃｅｎｔｅｒ ｏｆ Ｉｎｄｕｓｔｒｉａｌ Ｂｉｏｃａｔａｌｙｓｉｓ ａｎｄ Ｔｒａｎｓｆｏｒｍａｔｉｏｎ，Ｃｈａｎｇｘｉｎｇ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌ Ｃｏ．，Ｌｔｄ．，Ｃｈａｎｇｘｉｎｇ ３１３１００，Ｃｈｉｎａ；２Ｃｏｌｌｅｇｅ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｓｔｒｙ ａｎｄ Ｍｏｌｅｃｕｌａｒ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ，Ｚｈｅｎｇｚｈｏｕ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，