脓汁和粪便标本中病原菌的检测2课件.pptVIP

器材准备;自然界中的微生物;医学微生物学实验综合性实验三  Comprehensive Experiment 3 ;空气的细菌学检查P38;实验方法：自然沉降法是根据空气中细菌气溶胶粒子，在地心引力的作用下，以垂直的自然方式沉降到培养基表面；培养以后，计数菌落形成单位（ colony forming unit ，CFU），了解空气的污染情况。 实验步骤：每组1个营养琼脂平板，选择采样地点（实验室、宿舍、卫生间、饭堂或任选地点），将平板盖打开，盖朝下放置在平板旁，平板暴露于空气中15分钟，然后盖上盖子，作标记。37℃温箱培养24小时，观察结果。 ★ CFU/m3 ＝ 50000N÷AT≈86N(直径7cm平板）。 N：平板上的菌落数。 A：平板面积(平方厘米)。 T：采样时间(分钟)。;空气的细菌学检查 暴露法（Exposure Method);手指皮肤的细菌学检查P41;医务人员，经常要与病人接触，不管是直接接触，还是间接接触，都有传播病菌的可能。虽然病菌的直接来源是患者, 但是造成病菌扩散的主要途径则是气溶胶和医务人员的手。因此，经常洗手和消毒是控制医院内交叉感染的主要方法。 实际上，预防感染措施中，最简单又十分有效的方法就是洗手。据测定，只用自来水洗手可使暂住菌总数减少40%，用肥皂洗手可减少80%以上。 洗手？;常规的洗手方法（甲和丙操作）;医学微生物学实验室标准洗手方法（乙和丁操作）;1.掌心对掌心搓擦 2.手指交错掌心对手背搓擦 3.手指交错掌心对掌心搓擦;医务人员洗手指征;1 ;医学微生物学实验综合性实验一(P2);常见病原性球菌的检查程序P47： 直接涂片、革兰染色、镜检 脓汁、痰、咽部分泌物 观察菌落性状、溶血性、色素 血琼脂平板培养 涂片染色镜检 挑取可疑菌落 生化反应 ↑ 纯培养 动物实验 药敏实验 血液、穿刺液 → 肉汤增菌培养 → 培养液涂片染色境检 常见肠道致病菌的检查程序P48： 粪便 → SS琼脂、伊红美蓝平板培养 → 挑取可疑菌落 ↑ ↓ 血清学鉴定 血、骨髓 → 增菌培养 双糖铁培养基 染色镜检 生化反应 ;平板划线分离法 Streak Plate Method;平板分区划线分离法步骤（5区） 接种环烧灼灭菌，以免污染标本。 取标本在平板表面上方密集涂布5～10mm2。 烧掉接种环上多余的标本（火焰背面烤干→烧灼）。 晃动平板，当看到平板表面象镜面有反光的时候，保持这个角度，划线时就能看清划线痕迹，以便控制划线。 接种环与平板呈30～40度角，通过密集涂布部分1～3次，使接种环重新沾上少量标本(细菌)，然后在平板表面，以曲线的形式，作大幅度来回连续划线，边划边退，线段要划得长而密集，每区划线不少于30条。 转动平板，接种环通过第一区1次，同样的 方法划第二区。如此依次划完3～5区。 接种环烧灼灭菌，以免污染环境。 将平板倒置37℃培养18～24h 。 ★充分利用平板面积，不能划破琼脂。;平板划线分离小组分工;实验分组;杆12～14cm;接种环烧灼灭菌 Flame Loop;酒精灯无菌操作区;环面水平离开液面：快速6ul,慢速2ul。;①;;;正确 correct;;5～10mm2 ↓;37℃培养24小时 ;37℃培养24小时 ;生物安全警告;思考题;实验内容;常用器材摆放顺序：电源插座→试管架→酒精??→污物盘。 试管架上器材：靠近插座一侧第1和第2列分别放置接种针 和接种环，另一侧中间两行放置油性笔和打火机。;实验器材 整齐有序;微生物学器材柜-2（边台东侧中段）