协同信号分子b7-h3对肺炎链球菌脑膜炎小鼠脑损伤的影响研究-effect of b7 - h3 on brain injury in mice with streptococcus pneumoniae meningitis.docxVIP

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  • 2018-08-07 发布于上海
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协同信号分子b7-h3对肺炎链球菌脑膜炎小鼠脑损伤的影响研究-effect of b7 - h3 on brain injury in mice with streptococcus pneumoniae meningitis.docx

协同信号分子b7-h3对肺炎链球菌脑膜炎小鼠脑损伤的影响研究-effect of b7 - h3 on brain injury in mice with streptococcus pneumoniae meningitis

苏州大学学位论文独创性声明 本人郑重声明:所提交的学位论文是本人在导师的指导下,独立进 行研究工作所取得的成果。除文中已经注明引用的内容外,本论文不含 其他个人或集体已经发表或撰写过的研究成果,也不含为获得苏州大学 或其它教育机构的学位证书而使用过的材料。对本文的研究作出重要贡 献的个人和集体,均已在文中以明确方式标明。本人承担本声明的法律 责任。 论文作者签名: 日 期: 苏州大学学位论文使用授权声明 本人完全了解苏州大学关于收集、保存和使用学位论文的规定,即: 学位论文著作权归属苏州大学。本学位论文电子文档的内容和纸质论文 的内容相一致。苏州大学有权向国家图书馆、中国社科院文献信息情报 中心、中国科学技术信息研究所(含万方数据电子出版社)、中国学术期 刊(光盘版)电子杂志社送交本学位论文的复印件和电子文档,允许论 文被查阅和借阅,可以采用影印、缩印或其他复制手段保存和汇编学位 论文,可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索。 涉密论文□ 本学位论文属 在 年 月解密后适用本规定。 非涉密论文□ 论文作者签名: 日 期: 导 师 签 名: 日 期: 协同信号分子 B7 协同信号分子 B7-H3 对肺炎链球菌脑膜炎小鼠脑损伤的影响 中文摘要 中文摘要协同信号分子 B 中文摘要 协同信号分子 B7-H3 对肺炎链球菌脑膜炎小鼠脑损伤的影响 协同信号分子 B7-H3 对肺炎链球菌脑膜炎 小鼠脑损伤的影响 中文摘要 实验目的: 细菌性脑膜炎是儿童时期较严重的中枢神经系统感染性疾病,近年来,尽管给予 有效的抗生素治疗,但是细菌性脑膜炎仍有较高的死亡率和致残率,因此进一步研究 细菌性脑膜炎的免疫病理机制,寻找新的免疫干预手段意义重大。细菌性脑膜炎导致 血脑屏障破坏和脑组织损伤,而脑组织损伤的严重程度决定了细菌性脑膜炎患者的预 后。有诸多研究已证实在细菌性脑膜炎时脑内神经元会发生坏死、凋亡等改变。神经 元特异性烯醇化酶(neuron-specific enolase,NSE)和 S100b 已经被证实是脑损伤的特 异性标志物,诱导型一氧化氮合成酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)能够生物 合成(nitric oxide,NO),它已经被证实在细菌性脑膜炎引起的神经细胞凋亡中扮演者重 要角色。协同信号分子是介导抗感染免疫应答过程的重要成分,B7 同源性 3(B7 Homology 3,B7-H3)是 B7 家族的新成员,它在抗感染免疫应答中发挥着重要的免 疫调控作用。我们前期研究发现细菌性脑膜炎患儿体内可溶性 B7-H3 分子异常高表 达,此外还发现在小鼠肺炎链球菌(S. Pneumoniae,SP)脑膜炎模型中 B7-H3 加剧 了 SP 脑膜炎的病理损伤(血脑屏障的破坏),增强了炎症趋化作用。本研究是在以 上前期工作的基础上进一步观察分析 B7-H3 对细菌性脑膜炎动物模型脑组织中神经 元坏死、脑细胞凋亡的影响,以及对脑损伤标志物 NSE、S100b、iNOS 表达的影响, 探讨 B7-H3 对细菌性脑膜炎小鼠脑损伤的影响,了解其在细菌性脑膜炎病情进展中 的作用,以期为细菌性脑膜炎的免疫干预提供新的思路和实验依据。 实验方法: 1、研究 B7-H3 对 SP 脑膜炎小鼠神经行为学改变、体质量的变化的影响,取月 龄为 1.5-2 月的健康雄性 BALB/C 小鼠 48 只,随机分为 4 组:生理盐水对照组(CON 组)、B7-H3 组(B7-H3 组)、肺炎链球菌组(SP 组)、肺炎链球菌+B7-H3 蛋白组 I PAGE IV PAGE IV PAGE III PAGE III (SP+B7-H3 组);每组 12 只小鼠。腹腔注射诱导麻醉后,通过侧脑室定位注入 10ul 无菌生理盐水+5ul 肺炎链球菌混悬液来建立小鼠细菌性脑膜炎模型;CON 组注射 15ul 无菌生理盐水,B7-H3 组注入 10ul 浓度为 0.33μg?ul-1B7-H3 蛋白+5ul 无菌生理盐水, SP 组注入 10ul 无菌生理盐水+5ul 肺炎链球菌混悬液,SP+B7-H3 组注入 10ul 浓度为 0.33μg?ul-1B7-H3 蛋白+5ul 肺炎链球菌混悬液。 2、分别于侧脑室注射后 18h、48h、72h 对各组小鼠进行:1)神经行为学评分、 2)记录体质量的变化(分别记录注射前后在不同时间点小鼠的体重,分析前后体重 差值的变化)。研究 B7-H3 对 SP 脑膜炎小鼠脑组织中神经细胞丢失(Nissl 染色) 和脑组织细胞凋亡(Tunel 染色)的影响,评价脑损伤情况。关于动物模型及分组同 实验方法 1.分别于侧脑室注射后 18h、48h、72h 检测小鼠脑组织中神经

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