伤寒沙门菌质粒对巨噬细胞thp-1自噬、凋亡和炎症反应影响-effect of salmonella typhi plasmid on macrophage thp - 1 autophagy, apoptosis and inflammatory response.docxVIP

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2018-08-07 发布于上海
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伤寒沙门菌质粒对巨噬细胞thp-1自噬、凋亡和炎症反应影响-effect of salmonella typhi plasmid on macrophage thp - 1 autophagy, apoptosis and inflammatory response

PAGE PAGE VI 伤寒沙门菌质粒对巨噬细胞 THP-1 自噬、凋亡和炎症反应的影响中文摘要 ST8 及回补株 ST8-c-pRST98 （ p0.05）。细菌与细胞共作用 3 h， CQ 干预组 LC3-Ⅱ/β-actin 值及 p62/β-actin 值较对照组上升（p0.05），但突变株 ST8-ΔpRST98 的上升量仍显著高于野生株 ST8 及回补株 ST8-c-pRST98（p0.01）。 4. 用 mRFP-GFP-LC3 质粒转染 THP-1 细胞后，CLSM 检测结果显示，细菌与细胞共作用 1 h，CQ 干预组突变株 ST8-ΔpRST98 感染细胞的点状聚集物数量高于对照组，而野生株 ST8 和回补株 ST8-c-pRST98 感染细胞中未见显著差异。细菌与细胞共作用 3 h，CQ 干预组 3 株菌感染细胞的点状聚集物数量均高于对照组，其中突变株 ST8-ΔpRST98 的上升量显著高于野生株 ST8 及回补株 ST8-c-pRST9（8 二、伤寒沙门菌质粒对巨噬细胞 THP-1 凋亡和炎症反应的影响 p0.01）。 1. FCM 检测细胞凋亡率结果显示，Beclin 1 蛋白过表达组，在细菌与细胞共作用的 1 h、3 h、5 h 和 9 h，野生株 ST8、回补株 ST8-c-pRST98 及突变株 ST8-ΔpRST98 感染 THP-1 细胞的凋亡率均上升；细菌与细胞共作用 13 h，野生株、回补株与突变株感染 THP-1 的凋亡率未见显著性差异。对照组在细菌与细胞共作用的 1 h 和 3 h，凋亡率未见显著差异。细菌与细胞共作用 5 h、9 h 和 13 h，突变株 ST8-ΔpRST98 感染 THP-1 细胞凋亡率低于野生株 ST8 和回补株 ST8-c-pRST98 感染组（p0.05），且随时间延长愈加明显。 2. ELISA 检测细胞因子结果显示，细菌和细胞共作用 1 h、3 h 和 5 h，Beclin 1 过表达组及对照组突变株感染细胞的 IL-1β 及 IL-18 表达水平高于野生株和回补株（p0.05），而突变株感染细胞的 IL-10 表达水平低于野生株和回补株（p0.05）。但细菌与细胞共作用 9 h 后，野生株、回补株与突变株感染细胞的 IL-1β、IL-18 和 IL-10 表达水平未见显著差异。细菌和细胞共作用 1 h、3 h 和 5 h，Beclin 1 蛋白过表达组较对照组 3 株受试菌感染 THP-1 细胞的 IL-1β 及 IL-18 表达水平上升，而 IL-10 表达水平下降。细菌与细胞共作用 9 h，3 株受试菌感染 THP-1 细胞 IL-1β、 IL-18 和 IL-10 表达水平未见显著差异。结论： 1. CQ 干预前后，比较 THP-1 细胞自噬过程中自噬标志蛋白 LC3-Ⅱ、底物蛋白 p62、自噬体和自噬溶酶体的实验结果显示，伤寒沙门菌质粒 pRST98 作用在 THP-1 细胞自噬过程的前期，早于溶酶体降解的过程。 2. Beclin 1 作为自噬标志蛋白，过表达后可上调沙门菌感染细胞的自噬水平及中文摘要伤寒沙门菌质粒对巨噬细胞 THP-1 自噬、凋亡和炎症反应的影响凋亡率，加剧细胞炎症反应并最终影响感染的结局。关键词：伤寒沙门菌；质粒；巨噬细胞；自噬；CQ；Beclin 1 作者：王贝贝指导老师：黄瑞 The influence of Salmonella enterica serovar typhi plasmid on THP-1 autophagy, apoptosis and inflammation Abstract The influence of Salmonella enterica serovar typhi plasmid on THP-1 autophagy, apoptosis and inflammation Abstract Objective: To research the influence of Salmonella enterica serovar typhi (S.typhi) plasmid on THP-1 autophage, apoptosis and inflammation, we established the cells model infected by Salmonella infection with the autophagy blocker chloroquine (CQ) and Beclin 1 overexpression, therefore provi