纤维素降解菌分离 鉴定及产内切纤维素酶基因工程乳酸菌构建-isolation and identification of cellulose degrading bacteria and construction of endo-cellulase gene engineering lactic acid bacteria.docxVIP

纤维素降解菌的分离、鉴定及产内切纤维素酶基因工程乳酸菌的构建 plasmid into competent cell of Lactococcus lactis MG1614. The recombinant transformants vaccinated to the M17 plates containing CMC could produce degradation halo. The sizes of expressed recombinant proteins was 54 KD by SDanalysis and Western blot analysis. Screening of high effective cellulose degradation strains, cloning of eg gene, constructing of Lactobacillus expression vector pMG36e-eg and recombinant genetic engineering Lactococcus lactis producing endoglucanases were completed in the study. It is expected that highly active cellulase are produced to use Lactobacillus expression system , and multi-functional microecological products producing endo cellulose are developed. Key words：Cellulose-Degrading Strains? Identification? Endoglucanases? Lactococcus lactis 4 符号说明 Amp： bp： ampicillin， base pairs， 氨苄青霉素 碱基对 CMC： Emr： Carboxymethyl cellulose， Erythromycin， 羧甲基纤维素钠 红霉素 DTT： dNTP Dithiothreitol， Deoxyribonuleoside triphosphate， 二硫苏糖醇 脱氧核糖核苷三磷酸 EB： EDTA： ethidium bromide， ethylendiamine tetraacetate， 溴化乙锭 乙二胺四乙酸 g： h： Gram， Hour， 克 小时 HRP： Kb： Horseradish peroxidase， Kilobases， 辣根过氧化物酶 千碱基对 kD： L： kilo Dalton， Liter， 千道尔顿 公升 LB： Min： Luria-bertani medium， Minute， LB-培养基 分钟 OD： PAGE： Optical dendity， Polyacrylamidegel electropHoresis， 光密度 聚丙烯酰胺凝胶电泳 PBS： PCR： pHospHate-buffered saline， polymerase chain reaction， 磷酸盐缓冲液 聚合酶链式反应 rpm： S： round per minute， Second， 转速 秒 SDS： Tris： sodium dodecyl sμLfate， Tri-(hydroxymethy1) –aminomethane 十二烷基硫酸钠 三羟甲基氨基甲烷 TCA： mg： trichloroacetic acid， Microgram， 三氯乙酸 微克 μl： U： Microliter， Unit， 微升 单位 关于学位论文原创性和使用授权的声明 本人所呈交的学位论文，是在导师指导下，独立进行科学研究所取得 的成果。对在论文研究期间给予指导、帮助和做出重要贡献的个人或集体， 均在文中明确说明。本声明的法律责任由本人承担。 本人完全了解山东农业大学有关保留和使用学位论文的规定，同意学校 保留和按要求向国家有关部门或机构送交论文纸质本和电子版，允许论文 被查阅和借阅。本人授权山东农业大学可以将本学位论文的全部或部分内 容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或其他复制手段保存论 文和汇编本学位论文，同时授权中国科学技术信息研究所将本学位论文收 录到《中国学位论文全文数据库》，并向社会公众提供信息服务。 保密论文在解密后应遵守此规定。 论文作者签名： 导 师 签 名： 日 期： 山东农业大学硕士学位论文 山东农业大学硕士学位论文 纤维素降解菌的分离、鉴定及产内切纤维素酶基因工程乳酸菌的构建 纤维