温厚朴的现代炮制加工及uplc-dad-tof-ms指纹图谱研究-modern processing of magnolia officinalis and study on uplc - dad - tof - ms fingerprint.docxVIP

在特征翻译为药品的特征 指纹 。它具有 整体性和棋糊性两大特点 ，能较 为全面客观的反 应药品 的质:jJ[O) 。将指纹图 普·作为饮片的质1.主控制手段能够更加全面 的反应中药饮片的质量。但在 以往的中药HPLC指纹图谱研究中，始终 有两个方面 的不 足在制约着这一研究的快速发 展 : 1) 合适指纹阁谱色谱条件的选择，受色谱柱分离能 力的制约， 一个合适的色谱条件 往往需要经过长时间的不断摸索才能最终确定，且不 能明确对色谐峰 定性。 2) 以指纹图谱作为质量控制手段时，样品测定时间过长 。很多 己建立的指纹图谱测定条件，样品都要运行将近 一小时或者更多。这明显不能满足现 代分析检测的 高通量、高效率的要求 。 超高效液相色谱 CUPLC) 作为 一种在借助于HPLC 的理论及原理发展起来 ，涵盖了 小颗粒填料 、极低系统体积及快速检测手段等的新技术 ，增加了分析的通量 、灵敏度 及色 告峰容量。 随着色谱技术的快速发 展，UPLC 作为中药指纹阁谱技术的有力支持军 [1 完善被逐步引入中药研 究与分析中[11-1匀，它有着传统HPLC 所不能比拟的超 高柱效的分 离能力和分离速度 ，在分离效果近似或 更好 的情况下 ，能大大缩短样品运行的时间 [16， 17)。尤其是 与质谱联用后 ，利用质谱提供的色谱峰中成分的质谱信息，解析成分结构 ， 从而大大增加了中药研究与分析的深度和 l 广度。因此UPLC -DAD-MS指纹图谱技术作 为理想的中药质id控制的手段 ，有着广阔的应用前景。 另外， 在前册调查 中发现， 因温厚朴药材的植物来源有厚朴 Magnolia o}，开cinalis及 I:!:!:I 叶厚朴Magnolia biloba两个和1 ，且来源于这两个手中的药 材外观较为相似 ，这就给药材 的品种鉴定造成了一定的困难 。同时，经文献查阅，有文献显示(1 7叫， 基于样品指纹 图谱数据的统计分析，例如相似度分析 、聚类分析和判别分析等，可为药材的质量评 价、分类和确定关键分类参数等提供可靠的方法。 综合 以上情况，为了对温厚朴的现代化炮制力IJ工改革提供参考依据，同时为祖厚朴 药材及其炮制品的质量控制提供更科学有效的方法 ，本课题拟从 一下三方面来进行研 究: 第一 ，采用单因素实验和l正交实验的方法 ，以厚朴盼与和1厚 朴盼的总含量为指标 ， 对传统的的 莹，炙法 、斐，煮法 以及炙法工艺革新常采用的斐， 烘丰n姜汁微波法等四种炮制 方法进行优化，通过比较四利优化 后的炮制方法的有效成分的含量 ，进而确定温厚朴 的最佳炮制工艺; 第二 ，采用SPME-GC-MS法分别对植 厚朴药材和最佳 工艺炮制品中挥发性 成分进行 分析，了解炮制前后挥发性成分的组成和 变化: 第三 ，采用UPLC-DAD-TOF-MS技术 ，分别建立植厚朴药材和l最佳工艺炮制品的指 纹图谱，井利用相似度分析建立药材和 l炮制品的相似度质:w:评价标准，利用聚类分析 和判别分析 尝试建立温厚朴药材和炮制品植物来源的鉴定方法。 - 5- - - 6- 实验 1 温厚朴姜制闷润条件优选 温厚朴为中药厚朴的道地药材之一，主产于浙江，其产1M:大、质 id好，为中药厚朴 的主要来源之一。 厚 朴为木 兰科植 物 厚 朴Magnolia 0)，开cinais Rehd.et Wils 或凹叶厚 朴Magnolia q庐cinalis Rehd. et Wils. var. biloba Rehd. et Wils 的干燥干皮、根皮及枝皮(1。) 载于《神 农本革经)) ，又名厚皮 、1 1朴、紫油厚朴。性扭，味苦 、辛，具有具有抗菌 、消炎 、 抗胃溃扬、抗氧化等作用 [2338]，对人的咽喉有一定的剌激作用，故内服一般不生用， 姜制后可消除对 咽喉的刺激性， 同时可增强宽中和胃的作用。厚朴中的主要成分厚朴 酣与和厚朴酌为联苯型木脂索类 [29]，以游离态与植物胶、树脂等脂溶性成分共存。姜 制厚朴的炮制方法目前应用的主要有姜炙法 和l生姜汁煮法 (5.叫。莹，炙法中只规定了生姜 的用量，而未确定姜汁的体积和l闷润时间。但药材的闷润环节在中药炮制中起着十分 重要的 作用，为了考察药材闷润时的 最佳莹，汁体积和l闷润时间对姜制厚朴有效成分的 影响，我们以样品中的厚朴盼与和 1厚朴盼的总含量为指标，对、温厚朴姜制过程中的闷 润条件进行了工艺优化研究。 1实验材料 1.1仪器与试药 Waters 2695液相分离单元(在线脱气机 、自动进样器、四元梯度泵 、柱温箱)、 Waters 2996 PDA检测器、 νffiTTLER 十万分之 一分析天平 、METTL ER 万分之一分析 天平、色谱纯甲醇(天津四友公司) 、MILLIPOR