Box―Behnken响应面法优化亚贡多糖脱蛋白工艺研究.docVIP

Box―Behnken响应面法优化亚贡多糖脱蛋白工艺研究 　　【摘 要】 目的：筛选亚贡多糖的脱蛋白工艺。方法：采用酶法脱蛋白，应用Box-Behnken 响应面法优化最佳工艺，以多糖质量分数和蛋白脱除率为评价指标，考察温度、反应时间及酶浓度对指标的影响。结果：最优工艺条件为：反应温度为56-2℃，反应时间为1-27 h，酶终浓度3-7%；多糖质量分数达67-5%，蛋白脱除率为80-4%。结论：该工艺简单可行，可用于亚贡多糖的纯化。 　　【关键词】 亚贡；多糖；脱蛋白；Box-Behnken 响应面法 　　【中图分类号】R914-1 【文献标志码】 A 【文章编号】1007-8517（2015）18-0012-02 　　Study on Deproteinization from Polysaccharides of Smallanthus sonchilius 　　WANG Xiaoling GAO Xiang WANG Qiuyue ZHANG Lingyan 　　The Second Hospital of Tianjin Medicine University， Tianjin 300211， China 　　Abstract：Objective To optimum conditions for deproteinization form polysaccharides of Smallanthus sonchilius. Methods Box-Behnken Design-Response surface methodology was used to optimize the process of deproteinization and the method was evaluated by the ratio of protein removing and the mass fraction of polysaccharide. Results The better conditions for the deproteinization of crude polysaccharide from Smallanthus sonchilius were that the temperature was 56-2℃， the final concentration of enzyme was 3-7%（m/v） and the reaction time was 1-27 h. Under these conditions， the content of crude polysaccharide was 67-5% and percentages of protein removing of crude polysaccharide was 80-4%. Conclusion The method of enzyme effective method for removal of protein. 　　Keywords：Smallanthus sonchilius； Polysaccharides； removal of protein； Box-Behnken Design-Response surface methodology 　　亚贡（yacon）为菊科多年生草本植物亚贡Smallanthus sonchifolius H-Robinson的块根，又称雪莲果、雪莲薯、菊薯、亚龙果等。常用于加工为饮料、茶及蔬菜等各种产品，也可作为水果直接食用。研究表明，亚贡除作为营养保健品外，还具有一定的药用价值，具有降血糖、抗动脉粥样硬化、调节免疫、抗氧化、改善胰岛素抵抗等药理活性[1-5]。目前，亚贡的研究主要集中在根茎中的低聚果糖及叶片中多糖的提取分离及应用，尚未见亚贡根茎中多糖的研究。而植物多糖具有免疫调节、降血糖、降血脂等作用，对亚贡多糖的研究具有一定意义。多糖在提取和纯化的过程中常伴有大量植物蛋白，脱蛋白成为提高多糖纯度的必备工艺。常用的脱蛋白方法包括：Sevage法（正丁醇与氯仿混合）、三氯乙酸法（TCA法）、酶法。Sevage法和TC法是应用化学试剂使蛋白变性，反应较为强烈，对多糖造成一定的损耗[6]，而酶法条件较为温和，简单易行，专属性强。研究选用酶法，以多糖质量分数和蛋白脱除率为考察指标，采用响应面法对酶法提取的反应温度、时间和酶的浓度进行优化，为亚贡多糖的合理开发提供实验依据。 　　1 仪器与材料 　　1-1 仪器 TU-1810紫外可见分光光度计（北京普析通用仪器有限责任公司）；旋转蒸发仪（天津科诺仪器设备有限公司）；电子天平（北京赛多利斯仪器系统有限公司）。 　　1-2