p16蛋白表达及HPV检测在宫颈上皮内瘤变中诊断意义.docVIP

p16蛋白表达及HPV检测在宫颈上皮内瘤变中诊断意义 　　【摘要】 目的 探讨p16和HPV检测在评估宫颈低度鳞状上皮内瘤变和高度鳞状上皮内瘤变分型中的价值。方法 对宫颈低度鳞状上皮内瘤变和高度鳞状上皮内瘤变患者同时采用第2代杂交捕获（HC2）试验系统检测高危型HPV感染及检测p16蛋白的表达，比较宫颈低度鳞状上皮内瘤变和高度鳞状上皮内瘤变HPVDNA负荷量和p16蛋白表达的差异。结果 宫颈低度鳞状上皮内瘤变中p16表达率为36.67%（11/30），高度鳞状上皮内瘤变中表达率为100%（40/40），二者比较差异有显著性 （P0.01）。30例低度鳞状上皮内瘤变中HC2检测阳性率为6333%（19/30），高度鳞状上皮内瘤变中为97.5%（39/40），二者比较差异有显著性（P0.01）。HPV感染与p16表达呈正相关。结论 宫颈上皮内瘤变中p16的强阳性染色和全层染色支持高度鳞状上皮内瘤变的诊断，高度鳞状上皮内瘤变与高危型HPV感染有关，对于宫颈高度上皮内瘤变的诊断，最好HPV与p16联合应用，以提高其病理诊断准确性。 　　【关键词】 宫颈组织；乳头状瘤病毒感染；HC2检测；p16蛋白表达 　　文章编号：1003-1383（2013）04-0513-03 中图分类号：R737.33 文献标识码：A 　　宫颈上皮内瘤变（cervical intraepithelial neoplasia，CIN）是一组与浸润性宫颈癌密切相关的癌前病变的统称。由于CIN发展形成宫颈癌的病程较长，各类CIN分级的临床处理方法不一，低级别CIN患者一般采取定期随访，高级别CIN患者一般行宫颈Leep术。因而对CIN的准确病理学诊断尤为重要，但仅根据HE切片对于低度鳞状上皮内瘤样病变（CINⅠ）和高度上皮内瘤样病变（CINⅡ～Ⅲ级）之间的鉴别诊断，不同病理医师在诊断时常存在争议[1]。本研究旨在探讨p16和高危型HPV感染 　　作者简介：缪卫娟（1975-），女，江苏省江阴市人，医师。研究方向：妇科病理。在鉴别二者中的意义。 　　对象与方法 1.研究对象 回顾性选择2011年6月～2012年5月在江阴市妇幼保健院及常州市肿瘤医院妇科门诊就诊的宫颈环切组织患者，经常规制片、HE染色，由2位有经验的病理医生严格统一诊断，共挑选宫颈上皮内瘤变（CIN）患者70例，其中低级别上皮内瘤变（CINⅠ级）患者30例，高级别上皮内瘤变（包括CINⅡ级、CINⅢ级及原位癌）患者40例。研究对象年龄22～50岁，均为非妊娠期，非月经期。 　　2.方法 　　（1）HPVDNA检测：在受检者宫颈管及宫颈外口刷取标本，用美国Digene公司第二代杂交捕获试验（hybrid capture，HC2）行高危型人乳头状瘤病毒（HPVDNA）的测定，测定HPVDNA含量，判断结果分为阳性和阴性。检测值1.0 pg/ml为阴性，≥1.0 pg/ml为阳性。 　　（2）免疫组化检测：采用EnVision二步法。p16鼠单克隆抗体购自北京中杉生物技术有限公司，以已知阳性标本作为阳性对照，以PBS代替一抗作为阴性对照。p16表达定位于细胞核或细胞质，判读结果参照张建兰等标准[2]：阴性（-）：阳性细胞数50%。 　　3.统计学方法 统计分析采用SPSS 13.0统计软件。系统相关资料采用χ2检验比较两种方法是否存在差异，P0.05为差异有显著性。 　　结 果 1.宫颈病变中HPV表达相关性 70例标本中HC2的检出率为82.86%（58/70），其中30例低级别CIN患者中HC2检测阳性率为63.33%（19/30），高级别CIN中检测阳性率为97.5%（39/40），二者比较差异有显著性（χ2=14.09，P0.01）。见表1。 　　2.宫颈病变中p16表达相关性 70例标本中，p16的表达率为72.86%（51/70）。其中低级别CIN中p16表达率为36.67%（11/30），高级别CIN表达率为100%（40/40），二者比较差异有显著性（χ2=34.77，P0.01）。低级别组p16表达呈局灶性，散在弱阳性。高级别组p16表达主要呈全层弥漫性，强阳性，且p16表达类型逐渐从弱阳性转变为强阳性。见表2。 　　3. HPV与p16的关系 本研究中高级别CIN中39例HPV感染者全部表达p16（+），低级别CIN中19例HPV感染者有10例p16（+），二者比较差异有显著性（χ2=18.40，P0.01）。表明高危型HPV感染与p16呈正相关，同时还提示：随着CIN级别进展，HPV的检出率和p16蛋白的表达也同时升高。 　　讨 论 目前大量研究已经证明高危型HPV生殖道持续感染是引起CIN及宫颈癌的必要条件。HPV感染是一种通过性生活传播的疾病，性活跃妇女