ILK与PPKB蛋白在卵巢肿瘤组织中表达及意义.docVIP

ILK与PPKB蛋白在卵巢肿瘤组织中表达及意义 　　【摘要】 目的 探讨ILK和PKB在正常卵巢、卵巢良性肿瘤、卵巢交界性肿瘤、卵巢癌组织中的表达及其临床意义。方法 采用免疫组织化学SP染色检测正常卵巢组织、良性卵巢肿瘤、交界性肿瘤、卵巢癌中ILK和P-PKB的表达。结果 ILK和P-PKB蛋白在卵巢癌中表达率明显高于良性肿瘤中的表达率(P0．05)；与临床分期、有无腹水及淋巴转移显著相关，(P0．01)。上皮性卵巢癌中ILK表达与P-PKB蛋白表达显著正相关，(r=0．739，P0．01)。结论 ILK、P-PKB蛋白的表达与卵巢上皮性肿瘤的发生、发展密切相关。? 　　【关键词】整合素连接激酶;蛋白激酶B;卵巢肿瘤;免疫组化 　　 　　整和素连接激酶(integrin-linked kinase,ILK)对细胞的生长、分化及细胞凋亡、细胞周期、增殖等进行调控，在肿瘤的发生、发展中发挥重要作用。活化的ILK可介导细胞内多种底物磷酸化，其中重要的有PKB，磷酸化PKB(P-PKB)通过抑制凋亡、促进肿瘤新生血管形成及细胞周期进展等起到参与调节肿瘤的作用。本研究通过检测卵巢癌组织中ILK和P-PKB的表达，评估其临床意义。? 　　1 资料与方法? 　　1．1 临床资料 收集沈阳医学院奉天医院、辽宁省肿瘤医院、沈阳市第五人民医院近年手术切除的病理标本存档蜡块共210例。其中良性卵巢肿瘤30例，交界性肿瘤44例，卵巢癌106例， 30例正常卵巢组织。按WHO分化标准:高分化37例，中分化30例，低分化39例。按FIGO分期:Ⅰ~Ⅱ期60例，Ⅲ~Ⅳ期46例。? 　　1．2 方法 免疫组化检测卵巢组织ILK和P-PKB的表达及结果判定标准SP试剂盒购自北京中山生物技术有限公司，免疫组化实验步骤参照SP试剂盒说明书进行，抗ILK和PKB抗体的工作液浓度均为1?∶?200。结果判定:盲法下，光镜观察，每张切片选择5个高倍视野，每高倍视野计数100个瘤细胞，由三名病理医师独立计数，每张切片的阳性细胞百分率及染色强度记分，行半定量分析。? 　　1．3 统计学方法 应用SPSS10．0统计软件包行秩和检验和相关分析，P0．05为差异有统计学意义。? 　　2 结果? 　　2．1 ILK和P-PKB在各类型卵巢组织中的表达(见表1)。? 　　其中子宫内膜样癌阳性多表达于细胞膜，其他组织类型癌阳性多表达于细胞质中。在间质中也有非特异性阳性或强阳性表达，多表达于纤维母细胞瘤及血管内皮细胞中。? 　　2．2 ILK和P-PKB的表达与上皮性卵巢癌临床病理特征的关系(见表2)。? 　　2．3 上皮性卵巢癌中ILK和P-PKB蛋白表达相关性分析(见表3)。? 　　 　　 　　3 讨论? 　　ILK的N端通过与PINCH蛋白、Nck-2、胰岛素应答底物1(insulin-responsive substrate-1,IRS-1)结合，介导整合蛋白与血管内皮生长因子（VEGF）受体、血小板衍生生长因子（PDGF）受体以及胰岛素受体信号传导偶联复合物的形成[1]，对胞外基质的信号传递起着关键作用。ILK的微小变化，如表达和活性改变，都可引起信号通路及其随后的细胞周期变化，将可能引起细胞异常生长与增殖，导致肿瘤形成。Chung 等[2]研究发现,ILK在尤文氏瘤、成神经管细胞瘤、神经母细胞瘤中表达， ILK可能成为多数神经分化肿瘤的一种新型标志物。Qi等[3]于2005年研究显示，ILK 表达量与前列腺肿瘤形成密切相关，ILK表达激增可作为某些前列腺瘤的复发指标。 　　PKB是生长因子受体酪氨酸激酶下游主要的调节靶点，以PI3K依赖方式活化。最新研究结果证明，在卵巢癌、乳腺癌、前列腺癌和胰腺癌等多种肿瘤中存在PKB的持续激活[4-5]。PKB信号传导途径在肿瘤形成过程中起关键调节作用，包括恶性转化细胞的增殖、抑制凋亡、增强端粒酶活性、促进肿瘤新生血管形成以及增加肿瘤细胞的侵袭力。本研究结果显示，在卵巢癌组织中ILK和P-PKB的表达强度明显高于卵巢交界性肿瘤、良性肿瘤及正常卵巢组织(P0．01)，提示ILK和P-PKB与卵巢肿瘤的发生密切相关。? 　　实验结果中，卵巢癌不论其分化程度如何，ILK和P-PKB表达均高于良性或交界性卵巢肿瘤(P0．05)。ILK和P-PKB的强表达与肿瘤的分期、分级、淋巴结转移及有无腹水等因素有显著的相关性。ILK和P-PKB在卵巢癌中的表达，临床Ⅰ~Ⅱ期均明显低于Ⅲ~Ⅳ期(P[6]。? 　　最近证明，依赖整合蛋白的细胞粘附能够激活磷脂酰肌醇-3-激酶，而PI3K能够激活PKB[7]。活化的PKB也能上调血管内皮细胞生长因子的表达，后者是促进肿瘤血管生成的一个关键因子，可促进肿瘤的生长和侵袭。?