PTEN在宫颈癌组织中表达及对宫颈癌发生发展作用.docVIP

PTEN在宫颈癌组织中表达及对宫颈癌发生发展作用 　　[摘要] 目的 探讨第10染色体同源丢失磷酸酶-张力蛋白基因（PTEN）在宫颈癌组织中的表达及对宫颈癌发生、发展的作用。 方法 选取广东省汕头市中心医院2009年6月～2010年6月宫颈石蜡包埋组织90例，其中正常宫颈组织20例，宫颈癌组织70例；采用SP法检测两类组织中PTEN的表达情况；分析PTEN表达与宫颈癌临床病理指标的关系。 结果 ①PTEN在正常宫颈组织阳性表达率[100%（20/20）]高于在宫颈癌组织中的阳性表达率[70%（49/70）]，差异有高度统计学意义（χ2 = 7.83，P 0.05）；PTEN在中高分化和低分化宫颈癌的阳性表达率[71.7%（43/60），60.0%（6/10）]差异无统计学意义（χ2 = 0.56，P 0.05）；PTEN在无淋巴结转移的宫颈癌组织中阳性表达率[73.6%（39/53）]与有淋巴结转移的宫颈癌组织中的阳性表达率[58.8%（10/17）]差异无统计学意义（χ2 = 1.34，P 0.05）。 结论 PTEN蛋白的表达缺失可能与宫颈癌的发生、发展相关。 　　[关键词] 宫颈癌；第10染色体同源丢失磷酸酶-张力蛋白基因；SP法 　　[中图分类号] R737.33 [文献标识码] A [文章编号] 1673-7210（2013）05（c）-0037-03 　　宫颈癌是全球妇女第二高发恶性肿瘤，仅次于乳腺癌，在发展中国家其发病率居第一位[1]。近年来，宫颈癌的发病率有明显上升趋势，尤其是年轻宫颈癌患者。第10染色体同源丢失磷酸酶-张力蛋白基因（phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten，PTEN）是一种肿瘤抑制基因，在细胞生长、凋亡、黏附、迁移、浸润等方面有重要作用。近年来发现PTEN基因变化与人类多种恶性肿瘤的发生发展密切相关[2]，而PTEN与宫颈癌病变的关系目前尚无定论，所以PTEN的研究对宫颈癌的诊断和治疗有重要价值。本研究采用一抗+生物素化二抗+辣根酶标记链霉卵白素酶标亲和素-生物素技术（labelled streptavidin-biotin technique，SP）检测宫颈癌及正常宫颈组织中PTEN的表达水平，结合临床病例的分期、肿瘤分级、淋巴结是否转移进行统计学分析来探讨PTEN对宫颈癌发生、发展的作用。 　　1 材料与方法 　　1.1 一般资料 　　选取广东省汕头市中心医院病理科2009年6月～2010年6月保存的宫颈石蜡包埋组织90例，包括正常宫颈组织20例（从因子宫肌瘤全宫切除的石蜡包埋组织中选取），宫颈癌组织70例；患者年龄23～70岁，平均35.8岁，所有患者取标本前均未接受放、化疗及免疫治疗，所有的组织标本均由两名职称、年资相当的病理医师诊断。宫颈癌的临床分期采用国际妇产科联盟（FIGO）2009年修订的临床分期，其中Ⅰ期41例，Ⅱ期29例，中高分化60例，低分化10例，淋巴结转移17例。 　　1.2 实验方法 　　标本制好后免疫组化染色采用SP法，具体实验操作步骤如下：抗原修复后的组织切片用磷酸盐缓冲液（PBS）冲洗，5 min×3次；3%过氧化氢甲醇溶液，孵育10 min；PBS冲洗，5 min×3次；每张切片加50 μL非免疫性动物血清，室温下孵育10 min后吸去多余的液体；每张切片加50 μL的一抗，置于4℃冰箱过夜；PBS冲洗，5 min×3次；每张切片加50 μL生物素标记的二抗，室温下孵育10 min；PBS冲洗，5 min×3次；每张切片加50 μL链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶溶液，室温下孵育10 min；PBS冲洗，5 min×3次；二氨基联苯胺（DAB）显色苏木精复染，中性树胶封固。用PBS代替一抗作阴性对照。以细胞核着色为PTEN蛋白阳性反应。 　　1.3 统计学方法 　　采用统计软件SPSS 13.0对数据进行分析，计数资料以率表示，采用χ2检验。以P 0.05为差异有统计学意义。 　　2 结果 　　2.1 PTEN在正常宫颈组织及宫颈癌组织中的表达 　　正常宫颈组织中表达呈黄褐色或棕黄色，主要表达于细胞核中；宫颈癌中表达呈不着色或浅黄色，主要表达于细胞核中。见图1～4。 　　PTEN在正常宫颈组织阳性表达率为100%（20/20），PTEN在宫颈癌组织中的阳性表达率为70%（49/70），宫颈癌中PTEN的表达明显低于正常宫颈组织，差异有高度统计学意义（χ2 = 7.83，P 0.01）。见表1。 　　2.2 PTEN表达与宫颈癌临床病理指标的关系 　　PTEN在宫颈癌临床分期Ⅰ期的阳性表达率为75.6%（31/41），PTEN在宫颈癌临床分期Ⅱ