NFκBP65,pIκBα,IκKα在皮肤SCC和BCC中表达和意义.docVIP

NFκBP65,pIκBα,IκKα在皮肤SCC和BCC中表达和意义 　　[摘要]目的：探讨NF-κB信号转导通路中真核细胞转录因子κB(NF―κB／P65)、磷酸化NF-κB抑制蛋白(p―IκBα)以及真核细胞转录因子抑制蛋白激酶(IκKα)在皮肤SCC和BCC中的表达和三者之间关系，为临床治疗提供新思路。方法：采用免疫组化SP法检测53例皮肤癌组织(其中SCC27例，BCC 26例)和20例正常皮肤组织中NF-κB／P65，p-IκBα和IκKα蛋白的表达。结果：与正常皮肤组织相比，NF―κB／P65，p―IκBα和IκKα三者在SCC，BCC中均高表达(ρ＜0．05)；三者在SCC和BCC中的表达具有统计学意义(ρ＜0．05)；IκK蛋白的表达与SCC的分化程度无明显相关性(ρ＜0．05)。在BCC和SCC中，IκKα的表达与p-IκBα的表达呈正相关关系(r=0．5 36，ρ＜0．05)，NF-κB／P65和p-IκBα的表达呈正相关关系(r=0．435，ρ＜0．05)。结论：NF-κB信号传导通路可能在BCC和SCC的发生中起重要作用。 　　[关键词]真核转录因子κB／P65(NF-κB／P65)；磷酸化NF-κB抑制蛋白(p-IκBα)；NF-κB抑制蛋白激酶(IκKα)；皮肤鳞状细胞癌；皮肤基底细胞癌：表达 　　[中图分类号]Q527 R7 39．5　[文献标识码]A　[文章编号]1008―6455(2006)12-1339-03 　　基金项目：河南省科技厅基金资助项目(编号：0124170636) 　　通讯作者：刘林?，主任医师，教授，硕士研究生导师；主要研究方向：恶性皮肤癌的预防和治疗 　　E-mail：liulinbo@zzu．edu．cn 　　 　　皮肤鳞状细胞癌(squamous cell carcinoma,SCC)和基底细胞癌(basal cell carcinoma,BCC)的发病率均较高。近年来，有关学者在SCC和BCC的分子生物学方面的研究中取得了很大的进展。真核转录因子κB(NF-κB)信号转导通路是重要的细胞转录调控通路，该通路包括真核转录因子κB(NF-κB)，NF-κB抑制蛋白(IκB)以及IκB的激酶(IκK)等，其中IκKα结构的改变是IκK激活的重要因素之一。IκBa是IκB的家族成员，其本身是NF－κB的反应基因，是调控NF-κB活性的结构基础，其磷酸化形式是在上游激酶IκK作用下的产物。为了解该通路与SCC和BCC的发生发展是否相关，本实验采用了免疫组化SP法检测了NF-κB／P65蛋白，磷酸化NF-κB／P65抑制蛋白(p-IκBa)和IκB激酶复合体的分子之一(IκKα蛋白)在SCC和BCC中的表达，并分析三者之间的相互关系，探讨在临床中应用的意义。 　　 　　1　材料和方法 　　 　　1．1标本来源：53例标本取自郑州大学第一附属医院整形外科手术切除标本。SCC 27例、BCC 26例；其中男性25例，女性28例，平均年龄56．6岁。皮肤鳞状细胞癌Ⅰ级分化20例，Ⅱ级分化5例，Ⅲ级分化2例，Ⅳ级分化0例。所有病例术前均无化疗、放疗等特殊治疗。正常皮肤20例来自非癌需植皮的病人，均为全厚皮片。 　　1．2方法：采用免疫组化SP法。鼠抗人NF-κB／P65单克隆抗体、兔抗人p-IκBa多克隆抗体，SP免疫组化试剂盒，DAB显色试剂盒均购自北京中山公司。兔抗人IκKα多克隆抗体，购自武汉博士德公司。用已知阳性切片做阳性对照；以PBS代替1抗作空白对照。 　　1．3结果判定：NF-κB／P65，p-IκBα和IκKα阳性表达均定位于细胞浆，呈黄色颗粒。三者阳性表达水平采用染色强度评分×阳性细胞面积评分的积分表示。染色强度分为4级：完全阴性，与背景色一致为0级；弱阳性染色，淡黄色，略高于背景色为1级；阳性染色，黄色，明显高于背景色为2级：强阳性染色，棕褐色为3级。阳性细胞面积分为4级：阴性为0级；阳性细胞面积／细胞总面积≤10％为1级；阳性细胞面积／细胞总面积11％～50％为2级；阳性细胞面积／细胞总面积51％～75％为3级；阳性细胞面积／细胞总面积＞75％为4级。两者定性积分表达≥2分为阳性表达。 　　1．4统计学处理：应用SPSS13．0软件，两样本率的比较采用四格表资料的卡方检验，不满足卡方检验条件时采用Fisher精确概率检验法，多样本率的比较采用行列表资料的卡方检验；相关分析使用Spearman相关分析。以α=0．05为检验水准。 　　 　　2　结果 　　 　　2．1 NF-κB／P65，p-IκBα和IκKa在SCC和BCC中的表达(图1-9，见中插2)：NF-κB／P65，p-IκBα和IκKa在正常皮肤中的阳性表达率与在SC