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MMP3在大肠癌中表达及意义 　　【摘要】 目的 探讨大肠癌组织MMP-3表达及其临床意义。方法 用免疫组化SP法测定66例大肠癌组织及癌旁正常组织MMP-3表达，分析MMP-3表达与大肠癌临床病理因素之间的关系。结果 癌组织和癌旁正常组织MMP-3表达有显著性差异(P0．05）。结论 MMP-3表达同大肠癌生物学行为密切相关，可能与大肠癌的发生、发展及预后有关联。? 　　【关键词】 大肠肿瘤；间充质溶解素3；免疫组织化学?? 　　 Clinical significance of tissue MMP-3 expression in patients with colorectal carcinoma 　　ZHOU Wen-peng, FAN Qing-xia, FAN Kui-sheng, et al. 　　Department of Oncology, the First Affiliated Hospital of Zhengzhou University, Zhengzhou 450052, P．R．China.? 　　【Abstract】 Objective To, we investigate cancerous tissue MMP-3 expression in patients with colorectal carcinoma and evaluate its clinic significance. Methods Immunohistochemical method was used to detect tissue MMP-3 expression in 68 patients with colorectal carcinoma and its relationship with many pathologic parameters. Result Tissue MMP-3 expression was found to be significantly elevated in patients with colorectal carcinoma, compared with normal tissue (P0．05). Conclusions Tissue MMP-3 expression correlated significantly with biological behavior of colorectal carcinoma. the high expression of MMP-3 might be related with the occurrence and progress of colorectal cancer． ? 　　【Key words】 Colorectal carcinoma; MMP-3；Immunohistochemistry 　　 　　肿瘤浸润与转移是恶性肿瘤的主要生物学特征，是造成临床治疗失败和患者死亡的主要原因。而细胞外基质和基底膜是恶性肿瘤浸润与转移的重要组织屏障。MMP-3作为基质金属蛋白酶中的一员,能降解细胞外基质和基底膜中的许多组成部分,从而参与肿瘤的发生发展。因此，应用免疫组化法检测大肠癌患者癌组织MMP-3表达，并分析其与临床病理因素之间关系。? 　　1 材料与方法? 　　1．1 检测对象 大肠癌切除标本68例。男39例，女29例。年龄31～85岁，平均55岁。病例为浙江大学附属邵逸夫医院肿瘤外科，2002 年7月至2004年7月的住院患者。所有标本均经过病理证实。其中，结肠癌34例，直肠癌34 例。组织学类型：乳头状腺癌10例，管状腺癌50例，黏液腺癌8例。本研究将乳头状腺癌和高、中分化腺癌定为分化好型，将低分化及黏液腺癌定为分化差型。临床病理分期按TNM分期。全部病例术前均未接受化疗及放疗，所有组织均用10%福尔马林液固定,常规石蜡包埋。? 　　1．2 免疫组化 采用免疫组化SP法，第-抗体为Santa Cruz 公司生产的抗MMP-3单克隆抗体，免疫组化试剂盒购于迈新公司。具体步骤如下①4 μm厚石蜡切片常规脱蜡及水化，TBS缓冲液洗涤3次；②切片经3%H?2O?2溶液在室温下孵育15 min,TBS洗涤3次,经微波炉抗原修复15 min,取出室温冷却,TBS洗涤3次；③非免疫血清保护20 min；④鼠抗人MMP-3单克隆抗体(浓度1：50)孵育60 min后放入4℃冰箱过夜；⑤TBS洗涤3次，羊抗鼠IgG血清孵育20 min,TBS洗涤3次；⑥蛋白过养化酶试剂孵育10 min,TBS洗涤3次；⑦0．04%DAB显色；⑧流水洗涤；⑨苏木素复染分化，常规脱水，透明封固。用TBS替代第一抗体作为空白对照。阳性标准：阳