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IL―22在人早孕期母胎免疫界面中表达研究 　　摘要：目的 通过检测白细胞介素-22（IL-22）在人早孕期母胎界面的表达，探讨其可能的作用。方法 采用酶联免疫吸附法（enzyme-linked immuno sorbent assay， ELISA）检测正常早孕妇女及正常非孕育龄期妇女外周血、正常早孕妇女蜕膜组织及正常非孕育龄期妇女子宫内膜组织中IL-22的表达情况。结果 早孕妇女外周血IL-22表达（105.33±6.61）pg/ml，显著高于正常非孕育龄期妇女外周血（84.71±6.73）pg/ml。与正常非孕育龄期妇女子宫内膜组织IL-22表达水平（86.02±7.79）pg/ml相比，早孕妇女蜕膜组织IL-22表达（109.98±6.87）pg/ml，显著增加。结论 IL-22可能参与了正常妊娠母胎免疫耐受的建立和维持。 　　关键词：IL-22；母-胎界面 　　由于遗传多样性，同种异体间的移植常会导致机体出现排斥反应。妊娠过程从免疫学角度来看与其类似，但成功妊娠的母体并不排斥表达了一半父方基因的胎儿，意味着母体免疫系统对胎儿产生了免疫耐受。母-胎界面是这一过程发生的核心部位，存在其中的多种细胞及其细胞因子参与了这一免疫耐受过程的建立与维持。 　　IL-22是细胞因子IL-10家族的一员，最早在2000年由比利时的研究组发现和定义[1]。不同的条件下可发挥抗炎、促炎、致自身免疫性疾病和促肿瘤生成等多重作用，也可能参与了子宫的固有免疫系统。目前关于IL-22在生殖系统中的研究甚少，本文旨在探讨IL-22在人早孕期母胎界面的表达及可能的作用机制。 　　1资料与方法 　　1.1一般资料 正常早孕妇女蜕膜组织：选取2013年7～12月在广西医科大学第一附属医院自愿行人工流产术的正常妊娠妇女（孕6～9w），本次妊娠后无阴道流血、发热等不适，超声检查可见心管搏动，未见宫腔积液，留取蜕膜组织15例。正常育龄非孕妇女子宫内膜（分泌期）：选取2013年7～12月因男方因素不孕在广西医科大学第一附属医院就诊的女性患者12例，月经规则，B超及HSG均显示子宫腔形态正常，没有输卵管积水及卵巢囊肿声像。所有研究对象年龄25～35岁，均排除全身或感染性疾病，既往无不良孕产史，3个月内未服用甾体类药物，未发现生殖系统感染。标本获取后用PBS缓冲液反复冲洗去除血液，-80℃保存待测。外周血：收集正常早孕妇女肘静脉血3ml 15例，正常非孕育龄妇女肘静脉血3ml 12例，离心分离血清，-80℃保存待测。 　　1.2方法 按照人IL-22 ELISA试剂盒的操作步骤检测血清、组织匀浆中IL-22的浓度。 　　1.3统计学分析 采用SPSSl6.0软件进行数据统计分析，实验数据以（x±s） 表示。应用两样本均数T检验（t-test）和单因素方差分析（one way ANOVA）进行样本均数的比较和统计分析。P0.05为差异具有显著性。 　　2结果 　　早孕期妇女外周血、母-胎界面以及正常非孕妇女外周血、子宫内膜中均存在IL-22的表达。早孕妇女外周血IL-22表达显著高于正常非孕育龄期妇女。与正常非孕育龄期妇女子宫内膜组织相比，早孕妇女蜕膜组织IL-22表达显著增加，且蜕膜组织表达的IL-22水平亦高于外周血。母胎界面中的IL-22与外周血中的表达成正相关（r=0.83，P0.05）。见表1。 　　3讨论 　　IL-22是一类Ⅱ型细胞因子，属于IL-10家族，主要由特定的免疫细胞分泌，如活化的T细胞和NK细胞。与此不同的是，Brosnahan等[2]则发现孕32d-35d的马绒毛中表达IL-22的mRNA。IL-22的受体是由2条链组成的异源二聚体，其中IL-10R2广泛分布于机体各组织，而IL-22R1则相对特异地分布于皮肤、肾脏、胰腺、肝脏、小肠、结肠、肺和气管等器官组织中。在静止的及被刺激的免疫细胞内均未检测到IL22R1，也未在这些细胞中发现IL-22介导的STAT酪氨酸磷酸化[3～5]。IL-22与IL-22R1结合后发生构象改变后进而与IL-10R2结合形成复合物，激活JAK/STAT信号通路进行信号传导。此外，在肿瘤细胞中Lejeune等发现IL-22也可以激活MAPK通路（ERK1/2，JNK，P38激酶） [6]。 　　我们的研究结果显示人早孕期母-胎界面局部存在IL-22，其数量与非孕子宫内膜组织相比显著增加，母胎界面中的IL-22与外周血中的表达成正相关，提示了IL-22在早孕母-胎界面中起了一定的作用。Wang等[7]在正常妊娠妇女和复发性流产妇女的绒毛中发现IL-22R1的表达，并通过共培养人早孕期蜕膜基质细胞与蜕膜NK细胞发现IL-22的分泌增加。同时，利用rhIL-22 刺激滋养细胞系HTR8/SV