中药复方多糖对鸡红细胞免疫功能和SOD活性影响.docVIP

中药复方多糖对鸡红细胞免疫功能和SOD活性的影响 　　摘要：将300羽雄性良凤青脚麻鸡随机分为6组，即对照组、盐酸左旋咪唑组、黄芪多糖组、高、中、低剂量一定纯度中药复方多糖组，每组50羽。分别于8日龄皮下注射生理盐水及盐酸左旋咪唑、黄芪多糖和不同剂量的一定纯度中药复方多糖，连续7 d，在免疫后8、14、21、35、42 d采血，测定外周血中红细胞C3b受体花环率、红细胞免疫复合物花环率、SOD含量。试验结果表明，黄芪多糖和一定纯度中药复方多糖均能显著升高红细胞-C3b花环率和红细胞-IC花环率，增强SOD活性，最佳纯度中药复方多糖组免疫效果优于黄芪多糖，以中剂量中药复方多糖效果最好。 　　关键词：鸡;中药复方多糖;黄芪多糖;盐酸左旋咪唑;红细胞免疫功能;超氧化物歧化酶 　　中图分类号： S858.312.4 文献标志码： A 　　文章编号：1002-1302（2015）04-0214-03 　　收稿日期：2014-12-17 　　基金项目：国家自然科学基金（编号。 　　作者简介：商云霞（1965―），女，新疆奎屯人，高级实验师，研究方向为动物疫病防治。E-mail：shangyunxia@shzu.edu.cn。 　　中医药与免疫学的关系极为密切。我国古代就已认识到疾病的发生和机体的抵抗力（免疫力）密切相关，在世界上最早应用免疫学的方法防治疾病。免疫学对中医药的发展具有极其重要的推动作用，在阐明中医药防病、治病机理，研究中药有效成分，提高中药临床疗效等方面都具有十分重要的意义。随着现代免疫学和分子生物学的发展，人们发现许多中草药中的多糖成分能通过促进淋巴细胞增殖、转化和抗体生成，增加红细胞数量，升高红细胞-C3b花环率、红细胞-IC花环率及红细胞补体受体1（CR1）数量和活性等方式来提高机体免疫力，改善机体免疫状态。并且红细胞上的多种免疫相关的物质，如超氧化物歧化酶（SOD）、CR1、CR3[1]等分工合作，使红细胞具有识别、黏附、浓缩抗体和清除免疫复合物、增加LAK细胞数量、激活NK细胞，参与机体免疫调控作用[2]。与此同时，从中草药提取的粗提物中含有大量杂质，影响在应用时的稳定性[3]。本研究通过比较已证实能增强小鼠免疫力的经AB-8大孔吸附树脂吸附解吸附后得到的对小鼠免疫增强效果最好的一定纯度中药复方多糖（cCHMPS）、单味中药多糖黄芪多糖（APS）、人工合成免疫增强剂盐酸左旋咪唑（LM）对鸡红细胞C3b受体花环率、红细胞免疫复合物花环率和SOD活性的动态变化，为筛选出一定纯度中药复方多糖的最适免疫增强剂量提供理论依据。 　　1 材料与方法 　　1.1 药物 　　中药复方由党参、山植、熟地、川芎、何首乌、当归等11味中药组成，各单味药均购自新疆石河子市医药公司;中药复方多糖粗提物是从中药复方中采用水提-醇沉法提取。纯化后中药复方多糖是中药复方多糖粗提物经AB-8大孔吸附树脂吸附解吸附后获得。多糖含量采用苯酚-硫酸法测定，纯化后中药复方多糖的含糖量为77.10%。用灭菌蒸馏水将纯化后中药复方多糖配制成高、中、低（50、25、12.5 mg/mL）3个剂量浓度，经0.22 μm微孔滤膜滤过后4 ℃储存备用;黄芪多糖由石河子大学化工学院采用水提-醇沉法提取，含糖量为29.42%，用灭菌蒸馏水配制成25 mg/mL的剂量浓度，经0.22 μm微孔滤膜滤过后4 ℃储存备用;盐酸左旋咪唑注射剂购自上海申亚动物保健品有限公司;鸡新城疫疫苗（La Sota株和CS2株）购自新疆石河子市八师兽医站;冻干补体致敏酵母多糖和未致敏酵母多糖由第二军医大学长海医院免疫室提供;鸡超氧化物歧化酶试剂盒（ELISA）购自上海蓝基生物科技有限公司。 　　1.2 动物及分组 　　一定纯度中药复方多糖组（1）高剂量（cCHMPSH 50 mg/mL）;（2）中剂量（cCHMPSM 25 mg/mL）;（3）低剂量（cCHMPSL 12.5 mg/mL）;（4）黄芪多糖组（25 mg/mL APS）;（5）盐酸左旋咪唑组50 mg/mL LM唑;（6）生理盐水组（对照）。1日龄雄性良凤青脚麻鸡由新疆石河子市某养鸡场提供，临床检查健康。将试验鸡于7日龄时随机分为6组，每组50羽。于8日龄分别皮下注射，0.2 mL/羽，连续注射7 d。 　　所有试验鸡于7日龄时用鸡新城疫活疫苗（La Sota株）滴鼻、点眼免疫，27日龄用鸡新城疫疫苗（CS2株）进行二免。 　　1.3 饲养管理 　　饲料购自新疆天康饲料厂，0～4周龄，饲料中粗蛋白质≥20.0%、粗纤维≤4.5%、钙0.80%～1.30%、总磷≥060%、食盐0.30%～0.80%;5～8周龄，饲料中粗蛋白质≥19.0%、粗纤维≤5.5%、钙0.70%～1.2