实时荧光定量pcr构建奶牛生殖系统prp基因标准品质粒跟标.pdfVIP

中国农业大学学报 　2007 ,12 (2) :1 4 Journal of China Agricultural University 实时荧光定量 PCR 构建奶牛生殖系统 Pr P 基因 标准品质粒和标准曲线 1 2 1 1 1 1 张太翔 　宁章勇 　赵德明 　周向梅 　杨建民 　尹晓敏 ( 1. 中国农业大学 动物医学院/ 国家动物海绵状脑病实验室 , 北京 100094 ; 2. 华南农业大学 动物医学院 , 广州 510642) 摘 　要 　为阐释 PrP 基因在奶牛生殖系统的正常表达和正常的生理功能 , 以及为确定生殖系统在疯牛病垂直传播 中的地位和其分子机理奠定基础 ,采用实时荧光定量 RTPCR 的方法构建了奶牛生殖系统 PrP 基因的标准质粒和 标准曲线。对含有目的基因质粒的 EcoR Ⅰ酶切鉴定表明所插入的片段大小为302 bp ,与预期的结果一致。所构建 的标准曲线的相关系数 r2 = 0. 999 ,系统生成的回归方程为 y = - 0. 29 x + 9. 48 ,说明成功构建了奶牛生殖系统 PrP 基因的标准质粒和标准曲线 ,为研究 PrP 基因在奶牛其他组织的定量奠定基础。 关键词 　PrP ; RTPCR ; 实时荧光定量 PCR ; 标准曲线 ; 奶牛生殖系统 ; BSE 中图分类号　S 8559 + 9 　　　　文章编号 　1007 4333 (2007) 02 0001 04 　　　　文献标识码 　A Construction of cow reproductive system PrP gene standard pla smid and curve using realtime RTPCR 1 2 1 1 1 1 Zhang Taixiang , Ning Zhangyong , Zhao Deming , Zhou Xiangmei , Yang Jianmin , Yi Xiaomin ( 1. National Laboratory of Animal Transmissible Spongiform Encephalopathies , Colle ge of Veterinary Medicine , China Agricultural University , Beijin g 100094 , China ; 2 . College of Veterinary Medicine , South China Agricultural University , Guangzhou 510642 , China) Abstract 　The purpos e of this study was to elucidate the normal PrP gene expression and its normal physiological func tions , confirm the role of the reproductive s ystem in the maternity transmission route of the BSE and establish a good foundation for further molecular studies on BSE spread. Here we report the construction of cow reproductive s ystem PrP g