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他汀类药物对心梗后心房神经分布的影响 　　摘要：目的 探讨瑞舒伐他汀对心肌梗死（MI）后心房神经分布的影响。方法 开胸后结扎前降支制作兔MI模型，24h后将存活兔分为心梗组（MI，n=7）、药物干预组（Rt，n=8），并设假手术组（S，n=9）。瑞舒伐他汀药物干预8w后处死动物，观察心房自主神经分布改变。结果 与假手术组比较，心肌梗死组TH与胆碱乙酰转移酶（choline acetyltransferase，CHAT）表达阳性神经纤维密度增加，且差异均有统计学意义（P0.05）；与心肌梗死组比较， 药物干预组TH与CHAT阳性神经纤维密度减少，差异亦均有统计学意义（P0.05）；且药物干预组与假手术组相比较，TH与CHAT表达阳性神经纤维密度无明显统计学差异。结论 瑞舒伐他汀对MI后心房神经再分布具有抑制效应。 　　关键词：瑞舒伐他汀；心肌梗死；心房神经重构 　　他汀类药物又名羟甲基戊二酸单酰辅酶A （HMG-GoA）还原酶抑制剂是临床上最广泛的调脂药物，近年来随着对其研究的深入，发现其还有许多独立于调脂作用的生物学效应，即他汀药物的“多效应”，如抗炎、抗氧化应激、改善内皮功能、抗血栓、保护心肌、抗心律失常等多重效应。其中他汀类药物抗心律失常及防止心脏重构的作用已得到普遍关注，成为研究的热点之一[1-2]。此外，MI后除发生室性心律失常外，房性心律失常尤其是房颤（atrial fibrillation， AF）的发生亦较常见[3]，他汀类药物对这些房性心律失常具有防治作用[4]，但其机制尚未完全阐明。本研究拟通过观察兔MI后心房肌神经重构变化及瑞舒伐他汀对神经重构影响，旨在为他汀类药物防治MI后房性心律失常的机制提供某种合理解释。 　　1 材料与方法 　　1.1 实验动物模型的建立及分组 选购28只健康新西兰大白兔（普通级），体质量（2.2±0.3）kg。参照Fujita M等[5]报道建立兔心肌梗死模型。应用3%戊巴比妥钠（45mg/kg）经耳缘静脉缓慢注射麻醉，术前30min给予青霉素（10万/kg）肌注。麻醉后将兔固定于小手术台上，术前常规行心电图检查。保持兔自然呼吸，备皮、消毒后紧贴胸骨左缘3、4肋间纵行切开皮肤、游离出3～4cm纵行切口，小心拨开纵膈胸膜，充分暴露心脏，仔细观察兔左冠状动脉及其分支（或左室支）的解剖位置。于前降支中上1/3处结扎。直视下可见左心室前壁和心尖部心肌颜色逐渐变暗乃至苍白，搏动减弱。心电图可见Ⅰ、aVL导联ST段逐渐抬高，表明心肌梗死形成。术后逐层关胸。心肌梗死模型制作完毕24h后将兔随机分为心梗组和药物干预组。假手术组左前降支下穿线，但不结扎。自术后第1d开始，药物干预组给予瑞舒伐他汀（10mg/kg，阿斯利康制药生产）灌胃8w，心梗组及假手术组以等量生理盐水灌胃8w。手术中及手术后死亡兔共4只，最终获得具有完整实验资料的兔共24只，心梗组（MI， n=7）、药物干预组（Rt， n=8）、假手术组（S， n=9）。 　　1.2 标本采集 灌胃8w后称取体重，应用10%的水合氯醛腹腔注射麻醉后再次开胸，迅速取出心脏，分离出左房分成两部分，一部分组织冻存于液氮中，另一部分组织放入4%多聚甲醛固定，石蜡包埋切片。 　　1.3 免疫组化法测定酪氨酸羟化酶及胆碱乙酰转移酶 常规石蜡脱水，浸蜡，包埋，连续切片（厚度3～4μm），脱蜡，水化，抗原修复，清除内源性过氧化物酶。滴加一抗（抗TH抗体采购自PL Laboratories，抗CHAT抗体采购自美国abcam公司）4℃过夜，第2d取出切片于37℃复温30min后滴加辣根过氧化物酶标记的二抗（北京中山金桥公司）。每一操作步骤间均用磷酸盐缓冲溶液（PBS）冲洗，最后用DAB试剂盒显色（显示棕色颗粒为阳性）。分别对各组兔心房肌组织进行免疫组化检测，应用计算机图像分析系统（Image Pro Plus）计算神经密度（density）。每张切片检测5个神经纤维密度最高的区域，用阳性神经纤维在选区中所占的面积比值表示。 　　1.4 统计学方法 计量资料以（均数±标准差）表示，应用SPSS17.0统计软件包进行统计分析，两两比较采用单向方差分析检验。P0.05表示差异具有统计学意义。 　　2 结果 　　心房肌TH与CHAT阳性神经纤维再生现象：实验8周后免疫组化实验结果显示（图1）：假手术组兔心房肌TH和CHAT阳性神经纤维较少，心梗组TH和CHAT阳性神经纤维较多，而药物干预组较少。统计学分析结果示：心肌梗死组兔的心房TH和CHAT阳性神经纤维密度明显高于假手术组，而药物干预组的TH和CHAT阳性神经纤维密度明显低于心梗组，具有统计学差异（P0.05），表1。 　　3 讨论 　　既往研究[7]表明，心肌梗死后心房颤动发生可能与心房结构