代谢组学评估胚胎体外发育潜能应用研究综述.docVIP

代谢组学评估胚胎体外发育潜能的应用研究综述 　　摘要：胚胎体外发育能力的评估在人类辅助生殖技术中起关键作用。多胎妊娠带来的围产期死亡和医疗负担日益凸显。因此，如何获得高发育潜能的胚胎以减少多胎率和提高临床妊娠率是目前辅助生殖技术研究的重点。代谢组学作为一种非侵入性检测方法，主要通过对卵泡液或胚胎的培养液进行检测分析，能客观地评价胚胎质量和预测胚胎的发育潜能。因此，通过代谢组学判断和选择具有良好发育潜能的胚胎，对孕育健康后代和减少经济负担具有重要意义。本文首先对代谢组学的概况及研究方法进行了简单介绍，然后对代谢组学在生殖领域的最新应用进行了综述。 　　关键词：代谢组学；胚胎体外发育；卵泡液；胚胎培养液 　　中图分类号： S857.2文献标志码： A 　　文章编号：1002-1302（2016）12-0042-03 　　收稿日期：2016-08-16 　　基金项目：第58批博士后科学基金（编号。 　　作者简介：肖慎华（1963―），男，江苏徐州人，硕士，研究方向为羊生产学。 　　通信作者：张国敏，博士，主要从事羊生产学与动物胚胎生物学研究。E-mail：zhangguomin@njau.edu.cn。 　　随着辅助生殖技术的广泛应用，如何选择高质量胚胎进行移植已成为研究者面临的主要问题。目前，移植胚胎的发育潜能评估主要是依据胚胎的形态学评分。但这种方法重复性低、不能准确反映胚胎的质量，并且可能在无异常表现的胚胎中存在遗传缺陷[1]。因此，寻找一种新的评价配子和胚胎发育潜能的方法迫在眉睫。近年的研究表明，利用代谢组学的方法，通过测定卵泡液或胚胎培养液中代谢物质的变化，探索这种变化与卵母细胞或胚胎质量及其发育潜能的关系，以此来评价配子和胚胎的质量，能达到提高妊娠率并降低多胎妊娠风险的目的[2]。由于卵泡液和培养液是卵母细胞和胚胎发育与成熟的重要微环境，代谢产物的变化可以直接反映卵母细胞和胚胎对基因、营养物质和环境等所产生的生理变化[3- 4]，因此，卵泡液和胚胎培养基的代谢成分就成为人们对胚胎活力评价的潜在指标。 　　1代谢组学概述 　　代谢组学（metabonomics）是继基因组学、转录组学和蛋白质组学之后新发展起来的一门学科，主要对细胞、组织或器官中所有低相对分子质量代谢产物进行定性和定量分析，从而判断或预测细胞、组织或器官的健康状态[5-6]。代谢组学是以组群指标分析为基础、以高通量检测和数据处理为手段，以信息建模与系统整合为目标的系统生物学的一个分支。在特定的环境中，经基因组表达和新陈代谢产生的中间物和终产物，是代谢组学研究的重点，物质的变化能反映生物体系受外部刺激所做出的应答。 　　与基因组学和蛋白质组学以及其他组学相比，代谢组学具有很大的优势：（1）代谢物的种类较少，远少于基因组和蛋白组所检测到的数目；（2）基因和蛋白质的微小变化会在代谢产物上得到放大，从而更易检测；（3）无需建立全基因测序以及大量表达序列标签数据库；（4）目前对大多数小分子内源性代谢物的作用及其所在代谢途径及相关代谢通路的认识更加全面[7]。基于以上优点，代谢组学已成为所有组学研究中的热点之一，有很大的发展和应用前景。 　　2代谢组学的分析技术 　　利用代谢组学分析数据的过程一般分为：代谢组数据的采集、数据预处理、多变量数据分析、标记物识别和途径分析等步骤[8]。通常代谢组学的分析技术包括质谱分析技术（mass spectrometry，MS）、核磁共振波谱分析技术（nuclear magnetic resonance，NMR）、光谱分析技术（spectroscopy）和色谱分析技术（chromatograph）。NMR具有对样品实现?o创性、无偏向的检测，有良好的客观性和重现性，且无需对样品预处理，被认为是唯一能用于活体和原位研究的代谢组学检测技术[9]。质谱适用于生物小分子的分析，尤其是气相色谱-质谱联用（GC/MS）、液相色谱-质谱联用（LC/MS）和电泳-质谱联用（CE/MS）等联用技术在各个研究领域应用较为广泛。由于代谢物种类繁多，各物质之间差异比较大，且浓度分布范围广，仅靠一种分析技术无法完成。因此，必须联合使用几种分析技术才能对代谢产物进行全面分析[3]。目前NMR和色谱-质谱联用是代谢组学检测中最为常用的检测方法。此外，随着代谢组学分析技术的快速发展，对检测仪器的改造也越来越高级。Liu等利用快速高分辨液相色谱系统（rapid resolution liquid chromatography，RRLC）与MS联用技术，也获取了样品的全部内源性小分子代谢物信息[10]，并且此方法有可能成为后续代谢物检测的主要方法。 　　3代谢物对胚胎体外发育潜能预测的研究 　　3.1卵泡液 　　卵母