拮抗稻瘟病病菌放线菌Amy-627的筛选及鉴定.docVIP

拮抗稻瘟病病菌放线菌Amy-627的筛选及鉴定 　　摘要：菌株Ａｍｙ－６２７是一株从长白山地区分离纯化出的对２２种植物病原真菌和３种致病细菌都有较明显抑制效果的放线菌，其抗菌谱较广，尤其对水稻稻瘟病病菌（Ｐｙｒｉｃｕｌａｒｉａ ｏｒｙｚａｅ）具有显著的拮抗作用。通过形态特征、培养特征、生理生化检测及抑菌谱等一系列比较。结果表明，发现该菌株与链霉菌属的吸水链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃｕｓ）的特征基本相符，通过１６Ｓ ｒＤＮＡ序列比对同源性达９９％。根据多项分类原则和系统进化树的构建分析，将该菌株暂归入吸水链霉菌（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃｕｓ）类。 　　关键词：水稻稻瘟病病菌；链霉菌；拮抗；筛选；鉴定 　　中图分类号：Ｓ４７６文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）14－2864-03 　　 　　Screening and Identification of Amy-627 Strain against Pathogenic Fungus 　　Pyricularia oryzae 　　 　　ＺＨＡＮＧ Ｌｉ，ＷＡＮＧ Ｙｏｎｇ，ＸＩＥ Ｃｈｅｎｇ－ｃｈｅｎｇ，ＧＯＮＧ Ｌｉ－ｊｉｎｇ，ＷＡＮＧ Ｘｕｅ 　　（Ｓｃｈｏｏｌ ｏｆ Ｃｈｅｍｉｃａｌ Ｅｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ， Ｌｉａｏｎｉｎｇ Ｓｃｉｅｎｃｅ ａｎｄ Ｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ，Ａｎｓｈａｎ １１４０４４，Ｌｉａｏｎｉｎｇ，Ｃｈｉｎａ） 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： Ａｍｙ－６２７， ａｎ ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅ ｓｔｒａｉｎ， ｗａｓ ｏｂｔａｉｎｅｄ ｆｒｏｍ Ｃｈａｎｇbａｉ mｏｕｎｔａｉｎ． Ｉｔ ｈａｄ ｅｘｔｅｎｓｉｖｅ ａｎｔｉｍｉｃｒｏｂｉａｌ ｓｐｅｃｔｒｕｍ ｏｆ ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ ｆｉｌｔｒａｔｅ． Ｔｈｅ ｇｒｏｗｔｈ ｏｆ ２２ ｐｌａｎｔ ｐａｔｈｏｇｅｎｓ ａｎｄ ３ ｂａｃｔｅｒｉａ ｗｅｒｅ ｓｔｒｏｎｇｌｙ ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｂｙ Ａｍｙ－６２７ ｏｎ ＰＤＡ ｐｌａｔｅ． Ｅｓｐｅｃｉａｌｌｙ， ｔｈｅ ｐａｔｈｏｇｅｎｉｃ ｆｕｎｇｕｓ， Ｐｙｒｉｃｕｌａｒｉａ ｏｒｙｚａｅ， ｗａｓ ｉｎｈｉｂｉｔｅｄ ｓｉｇｎｉｆｉｃａｎｔｌｙ ｂｙ ｉｔ． Ｂｅｓｉｄｅｓ， ｔｈｅ ｍｏｒｐｈｏｌｏｇｙ， ｃｕｌｔｕｒａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ， ｐｈｙｓｉｏｌｏｇｉｃａｌ－ｂｉｏｃｈｅｍｉｃａｌ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ａｎｄ antimicrobial spectrum ｏｆ ｔｈｉｓ ｓｔｒａｉｎ ｗｅｒｅ ｓｔｕｄｉｅｄ comparatively． Ｔｈｅ ｒｅｓｕｌｔｓ ｓｈｏｗｅｄ ｔｈａｔ ｔｈｅ ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｓｔｉｃｓ ｏｆ ｔｈｉｓ ｓｔｒａｉｎ ａｎｄ Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃｕ ｗｅｒｅ ｓｉｍｉｌａｒ ａｎｄ ｔｈｅ ｈｏｍｏｌｏｇｙ ｏｆ ｔｈｅｍ ｗａｓ ９９％ by 16S rDNA sequences’ comparison． Base on ｔｈｅ ｐｏｌｙｐｈａｓｉｃ ｔａｘｏｎｏｍｉｃａｌ study and phylogenetic tree analysis， ｔｈｅ ｓｔｒａｉｎ Ａｍｙ－６２７ ｗａｓ ｉｄｅｎｔｉｆｉｅｄ ａｓ Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ ｈｙｇｒｏｓｃｏｐｉｃｕｓ for the time being． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： Ｐｙｒｉｃｕｌａｒｉａ ｏｒｙｚａｅ； ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅ； ａｎｔａｇｏｎｉｓｍ； ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ 　　 　　放线菌种类繁多，代谢功能各异，是一类有着广泛实际用途的生物资源。在抗菌活性物质的种类中，大约有７０％是由放线菌（Ａｃｔｉｎｏｍｙｃｅｔｅｓ）产生的［１，２］。利用具有生命特征的生物体及其代谢分泌物、复制物（生物源）经工艺加工而成的具有农药功能的有害生物控制剂――农用抗生素类药物，由于具有低毒、高效、选择性强、残留时间短、无公害等优点，正日益受到世界各国的重视，并将成为今后农药行业发展的主要方向之一。 　　水稻稻瘟病是一种世界性病害，在我国绝大多数水稻种植区域均有发生。流行年份一般可造成１０％～２０％的经济损失，严重者可达５０％以上。稻瘟病在水稻整个生长阶段皆可发生，具有危害时间长、侵染部位多和症状多样性等特点，使化学防治难以达到预期的目的。近年来利用有益微生物来防治水稻稻瘟病已成为较流行的策略。放线菌广泛存在于不同的自然生态环境里，现今发现的放线菌只占自然界存在的１０％～２０％，其资源利用还具有相当大的空间。因此，对采自长白山地区不同类型土壤进行