光照对花生网斑病菌生长产孢及致病力影响.docVIP

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光照对花生网斑病菌生长产孢及致病力影响

光照对花生网斑病菌生长产孢及致病力影响   摘要:研究了不同光照条件对花生网斑病菌(Phoma arachidicola Marasas,Pauer Boerema)生长、产孢及致病力的影响。结果表明,在燕麦培养基上培养14 d时,病原菌在近紫光、全光照条件下的菌落直径(分别为6.2 cm和 6.3 cm),显著高于黑暗、光暗交替(12 h-12 h)条件下的菌落直径(分别为3.9 cm和4.3 cm)。在黑暗或光暗交替(12 h-12 h)条件下培养22 d时,花生网斑病菌在燕麦、玉米琼脂或花生叶煎汁培养基上均未产生分生孢子,但在近紫光下,除玉米琼脂培养基外,在燕麦培养基和花生叶煎汁培养基上均产生大量的分生孢子,浓度分别为3.1×106个/mL 和7.0×105个/mL。在近紫光下,花生离体叶片于接种病原菌孢子悬浮液后7 d开始发病,但在黑暗、光暗交替条件下未发病。因此,近紫光有利于花生网斑病菌菌丝生长、产孢及致病。   关键词:花生网斑病菌;光照;生长;产孢;致病力   中图分类号: S435.652   文献标志码: A   文章编号:1002-1302(2016)04-0174-03   花生(Arachis hypogaea L.)是一种重要的油料和经济作物,在世界范围内广泛种植。其中,中国是世界上最大的花生生产、消费和出口国。据统计,2013年我国花生种植面积达4.71×106 hm2[1]。但由于种植面积的增加,花生连作重茬现象也越来越严重,从而导致各种病害也逐年加重,严重限制了花生产量及品质的进一步提高[2]。随着病害控制过程中农药的大量使用,给花生食品安全及出口也带来了极大的隐患[3]。   花生网斑病,又称云斑病、褐纹病、污斑病,1973年在美国德克萨斯州首次发生,1982年首次在我国山东、辽宁等花生产区发现,随后在陕西、河南等省发生[4]。该病害是一种主要危害花生叶部的真菌病害,也是近年来花生上的严重病害之一[2,4]。在花生中后期发病最重,主要危害叶片,其次危害叶柄和茎部,导致花生生长后期大量落叶,影响产量,一般可减产10%~20%,严重时达30%以上[2,4]。目前,国内外学者就该病害的病原学[5-7]、发生条件[8-9]及田间病害流行动态[4]等方面进行了研究。Marasas等用发生学方法,结合产孢方式,将该病原菌的无性阶段鉴定为半知菌亚门、球壳孢目、茎点霉属、花生茎点霉(Phoma arachidicola Marasas,Puaer Boerema)[5],我国李君彦等的鉴定结果[7]与之一致。该病菌一般以菌丝和分生孢子器在残叶组织中越冬,病害田间始发期为6月上旬,高峰期在7月份以后,期间持续阴雨和生长后期低温有利于病害发展[7]。病害的发生与花生生育日数、气温和相对湿度呈正相关,与降雨量呈负相关,其中效应最大的为花生生育日数。因此即使不同年度间温湿度有所变化,第一次病害高峰期出现时间基本一致[8]。不同花生品种间网斑病抗性存在一定差异,在辽宁,花生品种四粒红?白沙1016?花育20?黑花生?白花生[4]。   在花生网斑病菌研究过程中,一株分离自山东省花生研究所莱西试验田的花生网斑病菌,常规培养时菌丝生长缓慢且难以产生分生孢子,成为该病害后续室内研究的瓶颈问题。因此,本试验的主要目的是探索光照对花生网斑病菌菌丝生长、产孢及致病力的影响,为花生网斑病后续研究的展开奠定基础。   1 材料与方法   1.1 光照对花生网斑病菌菌丝生长的影响   将4 ℃冰箱保存的花生网斑病菌,活化后打取直径5 mm菌饼,接种于燕麦培养基平板中央,分别置于黑暗、光暗交替(2 400 lx,12 h-12 h)、光照(日光灯2 400 lx)、近紫光(8 W×3)下,25 ℃培养。每处理4个重复,每重复1皿。培养 14 d 后,取出培养物,按照十字交叉法测量菌落直径,计算平均值。   1.2 营养及光照对花生网斑病菌产孢量的影响   1.2.1 培养基的制作 选用3种产孢培养基,分别为玉米培养基、燕麦培养基和花生叶煎汁培养基。其中,玉米培养基配方:将一定量的自来水煮沸后,加入100 g玉米粉,搅拌均匀,文火煮沸后再煮1 h。趁热用4层纱布过滤,在滤液中加入12 g琼脂粉,加热过程中不断搅拌至充分熔化后,用自来水定容至1 000 mL。调pH值为6.5。燕麦培养基配方:自来水煮沸后加入30 g燕麦片,文火煮沸后1 h。趁热用4层纱布过滤,滤液中加入12 g琼脂粉并不断搅拌至琼脂熔化后,用自来水定容至1 000 mL。调pH值为6.5。花生叶煎汁培养基配方:将200 g去皮马铃薯块和31 g洗净的花生叶片一起文火煮沸30 min。趁热用4层纱布过滤,滤液中加入12 g琼脂粉直至熔化,然后加

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