同时测定血清中4种电解质流动注射微电极串联电化学自动分析系统.docVIP

同时测定血清中4种电解质流动注射微电极串联电化学自动分析系统 　　摘 要 基于流动注射-微电极串联的动态电化学技术，建立了能快速、自动、同时测定血清中K??＋， Na??＋， Cl??－和Ca2＋的分析方法和系统，并成功用于血清样品的测定。为稳定4种电极的基线电位、加快电极响应速度，优化了载流的组分：23 mmol/L Na2B4O7-H3BO3 (pH 7.40)， 0.25 mmol/L K??＋， 48.6 mmol/L Na??＋， 2.5 mmol/L Cl??－和0.25 mmol/L Ca2＋的混合液，流量为1.56 mL/min；混合盘管长度为30 cm （I.D.0.5 mm）。本方法的测定范围分别是2.0～22.0 mmol/L K??＋， 90～253 mmol/L Na??＋， 20～248 mmol/L Cl??－， 0.35～10.0 mmol/L Ca2＋，相对标准偏差小于1.05% (n＝11)，回收率为96.7%～103.7%，分析速度为120样/h，每次测定的样品耗量仅为45 　　??SymbolmA@ L。本系统采用载流连续流动和微量样品注入，实现了系统的自动清洗，解决了样品交叉污染、流通式电极敏感膜表面血清纤维蛋白吸附及堵塞等问题，延长了使用寿命。 　　关键词 流动注射, 流通式微电极, 血清, 钾, 钠, 氯, 钙, 同时测定 　　 2010-10-18收稿；2010-12-20接受 　　本文系四川大学214人才引进振兴计划基金 (No. 0082204127067) 资助项目 　　?? E-mail：lysgxf2005@ 　　1 引 言 　　正常人血清中分别含有3.5～5.4 mmol/L K??＋， 135～145 mmol/L Na??＋， 96～110 mmol/L Cl??－和1.15～1.35 mmol/L Ca2＋的电解质［1］。这些电解质对保持体液酸碱平衡、维持渗透压起重要作用。当人体发生病变时，如糖尿病、酸中毒、肾衰竭、严重呕吐、腹泻、渗出性胸膜炎或腹膜炎等，会引起电解质浓度偏离正常范围。因此，及时测定病人体液中的电解质浓度，对诊断这些疾病具有重大意义。 　　目前，测定电解质浓度的方法有火焰光度法［2］、原子吸收法［3,4］、离子选择性电极法(Ion-selective electrode, ISE)［5,6］等，但是这些方法不能用于血清中K??＋， Na??＋， Cl??－和Ca2＋的同时测定。虽然基于ISE法的电解质分析仪(Electrolyte analyzer, EA)［7］实现了同时测定上述4种离子［8］，但该系统是以电极响应平衡为基础，分析速度较慢；另外，为了获得稳定的电位信号及准确的测定结果，血清样品需长时间滞留在EA系统内，导致系统污染；而且，由于血清样品中的纤维蛋白易吸附在流通式电极敏感膜上［9,10］，导致电极膜很快老化［11,12］，灵敏度急剧降低［13］，最终缩短了流通式电极的寿命。EA系统存在样品交叉污染严重、无法精确控制进样量、检测步骤繁琐、仪器成本高、可靠性差等缺点。 　　流动注射分析(Flow injection analysis, FIA)具有分析速度快、样品用量少、精度高等优点［14～18］。本研究将FIA与ISE结合，建立了FIA-流通微电极串联电化学自动分析方法和系统（Flow-injection mini-electrode electrochemical analysis, FI-ME-ECA），利用此系统同时测定了血清中K??＋， Na??＋， Cl??－和Ca2＋的含量。与传统的电解质分析系统相比，本系统的特点是：载流连续流经微电极敏感膜，能始终保持整个流路清洁，避免了敏感膜表面干-湿变化对其稳定性和灵敏性的影响；被测样品以“样品塞”形式注入系统，不在流通式微电极内停留，解决了血清样品在流路中停留所产生的交叉污染、血清纤维蛋白在电极通道的吸附及堵塞等问题； 显著降低了样品耗量，加快了分析速度，延长了流通式电极敏感膜的使用寿命。 　　2 实验部分 　　2.1 仪器与试剂 　　FIA-3110流动注射仪(北京吉天仪器有限公司）； AUW120D型电子天平(日本岛津公司）； 艾柯KL-UP-IV-10型超纯水器(成都康宁实验专用纯水设备厂）； pH-Meter HM-7B(日本东亚电波株式会社)； 微型流通式管状电极（郑州汇科电子有限公司）； K， Na， Ca和Cl流通式检测器（自制）； 多通道电位信号同时处理软件（自编程序）。 　　NaCl， KCl， Na2B4O7， H3BO3， NaNO3， BaCl2， MnCl2#8226;4H2O， FeCl3#8226;6H2O， ZnCl2，