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四种方法检测淋病奈瑟球菌临床应用对比研究 　　【摘要】目的：探究与分析四种检测法在淋病奈瑟球菌的临床应用。方法：选取我院自2012年8月至2014年8月收治的400例疑似淋病奈瑟菌感染患者作为临床研究对象，分别给予以下四种检测方法包括直接涂片染色法、培养鉴定法、聚合酶连反应法及斑点金免疫渗滤法对标本进行检测，以培养鉴定法作为对照组，对比四组检测方法对淋球菌的阳性检出率以及检测淋球菌的符合度情况。结果：培养鉴定法与斑点金免疫渗滤法阳性检出率相比无显著差异（χ2=289，P005）；培养鉴定法分别与直接涂片染色法、聚合酶连反应法阳性检出率相比具有显著差异（χ2=435，P005）。结论：在临床工作中对微生物进行诊断时建议选择两种以上的检测方法以保证阳性检出率，为临床治疗提供合理依据。 　　【关键词】淋球奈瑟球菌法；直接图片染色法；培养鉴定法；聚合酶链反应法；斑点金免疫渗滤法 　　【中图分类号】R7592【文献标志码】A 　　淋病作为目前临床上一类发病率较高的性传播疾病，据调查研究资料显示，每年新增的淋病病例可高达6000万[1]。由于淋病主要病原体为淋病奈瑟菌，在发病过程中可诱发附睾炎、盆腔炎等，对患者的身心健康带来了较大的伤害，因此，对于淋病奈瑟球菌的早期诊断至关重要。目前实验室中对淋病奈瑟球菌的检测方法较多，包括直接涂片染色法、培养鉴定法、聚合酶连反应法及斑点金免疫渗滤法[2]。本文现针对上述四种检测方法在淋病奈瑟球菌中的临床应用价值展开分析，将研究结果总结报告如下。 　　1资料与方法 　　11一般资料 　　采取随机数字表法选取我院自2012年8月至2014年8月来院检查的400例疑似淋病奈瑟菌感染患者作为临床研究对象，全部患者均在我院行尿液及分泌物检查，其中男198例，女202例，年龄在30至52岁之间，平均年龄为（432±25）岁，病程在1至3个月之间，平均病程为（21±06）个月。 　　12标本采集 　　由门诊医师对该组患者进行标本采集，其中对于男性患者标本的采集方法为：将一次性拭子插入到男性患者尿道内的2至3cm处对分泌物进行采集。对于女性患者标本的采集方法为：将一次性拭子插入到宫颈口05cm至1cm处进行采集，将上述所采集到的分泌物分别置于4支无菌管中，将其放置在35℃的环境中予以保存后及时送检。 　　13主要仪器与设备 　　淋球菌培养基购自天津市金章科技发展有限公司，氧化酶试剂、APINH生化鉴定纸条由法国生物梅里埃公司提供，快速革兰染色液由珠海备索生物技术有限公司提供，聚合酶链反应试剂盒购自上海科华生物工程股份有限公司，斑点金免疫渗滤所用的试剂购买自蓝波生物科技有限公司。 　　14检测方法 　　直接涂片染色法：将采集到的分泌物立即进行涂片出后直至风干，对其采用革兰染色法于显微镜下进行观察。于胃镜下可见涂片染色呈粉红色或红色，形状呈半圆形对称排列或肾形对称作为淋病奈瑟球菌阳性。 　　培养鉴定法：在进行培养前对所使用的培养基于35℃环境中予以保温，将采集到的分泌物直接连续划线接种于TM淋球菌专业培养基上，后将其放置于5%二氧化碳培养箱内连续培养1～2d。 　　聚合酶连反应法及斑点金免疫渗滤法严格按照各试剂说明书进行操作。 　　15统计学指标 　　采用SPSS180统计软件对本次研究所取得的数据进行分析，计数资料采用χ2检验，两种方法的一致性检验采用Kappa分析，以P005代表有统计学意义。 　　2结果 　　21四种淋病奈瑟球菌检测方法对疑似淋病奈瑟球菌感染患者阳性检出率对比培养鉴定法阳性检出率为2175%，直接涂片染色法阳性检出率为1700%，斑点金免疫渗滤法阳性检出率为2100%，聚合酶链反应法阳性检出率为2500%，培养鉴定法与斑点金免疫渗滤法阳性检出率相比无显著差异（χ2=289，P005）；培养鉴定法分别与直接涂片染色法、聚合酶连反应法阳性检出率相比具有显著差异（χ2=435，P005；χ2=457，P005）。见表1。 　　22四种检测方法对淋病奈瑟球菌的符合度对比 　　培养鉴定法检测淋病奈瑟球菌阳性例数87例，其中直接涂片染色法检测为阴性22例（5500%），斑点金免疫渗滤法检测为阴性7例（175%），聚合酶连反应法检测为阴性2例（500%）。另外，直接涂片染色法检测出阳性3例（075%）与斑点金免疫渗滤法检测出阳性4例（100%），在行培养鉴定法检测时为阴性，聚合酶链反应法检测出阳性15例（3750%）而培养鉴定法检测为阴性。培养鉴定法与聚合酶连法在检测淋球菌方面存在一致性（K=0890，P005）。见表2。 　　3讨论 　　目前临床上用于诊断淋病奈瑟球菌的方法种类较多，本次研究选取了其中四种检测方法包括直接涂片染色法、培养鉴定法、聚合酶连反应法及斑点金