基于Keap1―Nrf2―ARE探讨强直性脊柱炎患者肺功能降低机制.docVIP

基于Keap1―Nrf2―ARE探讨强直性脊柱炎患者肺功能降低机制 　　【摘 要】目的：基于Keap1-Nrf2-ARE通路探讨强直性脊柱炎患者肺功能降低的机制。方法：选取120例强直性脊柱炎患者作为研究组，并从体检中心抽取60例健康人作为正常对照组。采用德国Jager MasterScreen自动肺功能检测仪测定两组肺功能参数[用力肺活量（FVC）、第1秒用力呼气容积（FEV1）、最大通气量（MVV）、最大呼气流量（PEF）、25%肺活量位的最大呼气流量（FEF25）、50%肺活量位的最大呼气流量（FEF50）、75%肺活量位的最大呼气流量（FEF75）]；采用酶联免疫分析法（ELISA法）检测两组血清中通路蛋白[Kelch样ECH相关蛋白l（Keap1）、核因子NF-E2相关因子（Nrf2）]、氧化应激指标[丙二醛（MDA）、活性氧（ROS）、活性氮（RNS）、超氧化物歧化酶（SOD）、过氧化氢酶（CAT）、总抗氧化能力（TAOC）]和细胞因子[白细胞介素（IL）-18、肿瘤坏死因子（TNF）-α、IL-4、IL-35]含量；采用魏氏法检测炎性指标红细胞沉降率（ESR）；采用日立7060型全自动生化分析仪检测C-反应蛋白（CRP）、免疫球蛋白。结果：与正常对照组比较：①强直性脊柱炎患者FEV1、MVV、PEF、FEF50、FEF75值均显著降低（P 0.01或P 0.05）；与强直性脊柱炎患者Keap1、Nrf2正常组比较，Keap1、Nrf2异常组FEV1、MVV、PEF、FEF50、FEF75值显著降低（P 0.05或P 0.01）。②强直性脊柱炎患者血清中Keap1、Nrf2、ROS、RNS、MDA值显著升高（P 0.01或P 0.05），SOD、CAT、TAOC值均显著降低（P 0.01或P 0.05）。③强直性脊柱炎患者IL-18、TNF-α、ESR、CRP值显著升高（P 0.01），IL-4、IL-35值显著降低（P 0.01或P 0.05）。④Spearman相关性分析显示，FEV1、MVV、PEF、FEF50、FEF75与SOD、CAT、TAOC、IL-4、IL-35呈正相关，与Keap1、Nrf2、ROS、RNS、MDA、IL-18、TNF-α、ESR、CRP、胸闷、气短、呼吸困难呈负相关（P 0.01或P 0.05）。 　　结论：58.33%的强直性脊柱炎患者存在肺功能降低，表现为肺功能参数FEV1、MVV、PEF、FEF50、FEF75值均显著降低，以上肺功能参数与抗氧化指标、抑炎细胞因子呈正相关，与通路蛋白（Keap1、Nrf2）、氧化指标、致炎细胞因子、炎症指标呈负相关。Keap1、Nrf2表达上升，Keap1-Nrf2-ARE信号通路活化后，机体抗氧化能力下降，促使细胞因子失衡、炎症指标升高，导致免疫复合物异常沉积增多，在引起强直性脊柱炎发病的同时使肺组织或器官受损或破坏，最终出现肺功能降低。 　　【关键词】 脊柱炎，强直性；Keap1-Nrf2-ARE；肺功能；Keap1；Nrf2；氧化应激 　　强直性脊柱炎（ankylosing spondylitis，AS）是一种慢性进行性自身免疫性疾病，其病变并非局限于关节，多引起关节以外的结缔组织的病变。肺脏因富含丰富的结缔组织与血管，很容易受累。前瞻性研究表明，AS肺部受累发生率达1.5%～30.0%[1]。 　　一般认为其发病与感染、遗传和免疫有关，但确切发病机制至今尚未明确。近年来研究表明，氧化应激（oxidative stress，OS）可能在AS相关的肺脏疾病发生、发展中起重要作用。 　　研究发现，核因子NF-E2相关因子（nuclear factor erythroid2-related factor 2，Nrf2）通过与抗氧化反应元件（antioxidant response element，ARE）相互作用调节编码抗氧化蛋白，是迄今为止发现的最为重要的内源性抗氧化应激通路。Kelch样ECH相关蛋白l（Kelch-like ECH-associated protein1， 　　Keap1）-Nrf2-ARE作为机体内有效的抗氧化调节通路，对于防御、减轻氧化应激对人体的危害起着举足轻重的作用[2-3]。 　　Nrf2广泛存在于多种组织和细胞中，在调节氧化应激反应中起重要作用。正常情况下，Keap1将Nrf2以二聚体形式锚定于胞浆，促使胞浆内Nrf2持续泛素化并被蛋白酶不断降解，从而抑制Nrf2激活[4]。应激状态下，活性氧、活性氮和内外源性电子激活剂可氧化Keap1上的巯基或磷酸化Nrf2分子中的丝氨酸和苏氨酸残基，从而改变Keap1或Nrf2空间构象，抑制Keap1活性，导致Nrf2与Keap