基于壳聚糖Ru23SiO2纳米粒子电化学发光传感器用于尿酸检测.docVIP

基于壳聚糖Ru23SiO2纳米粒子电化学发光传感器用于尿酸检测 　　摘要 利用反相微乳液法制备了壳聚糖Ru（bpy）2+3SiO2复合纳米粒子，采用Nafion/MCNT复合膜技术实现了对复合纳米粒子有效而稳定的固定，从而制备了电化学发光传感器，实现了对尿酸的检测。在0.1 mol/L PBS缓冲溶液（pH 7.4）中，当尿酸与修饰电极作用15 min时，电化学发光强度与尿酸浓度（1.0×10 　　Symbolm@@ 10～1.0×10 　　Symbolm@@ 5 mol/L）的负对数呈良好的线性关系，线性方程为IECL= 　　Symbolm@@ 709.52-202.74lgC，相关系数R=0.9936，检出限为6.0 × 10 　　Symbolm@@ 12 mol/L。传感器表现出良好的重现性与稳定性，对1.0 × 10 　　Symbolm@@ 8 mol/L尿酸平行测定11次，发光强度的相对标准偏差为2.9%，测定尿酸实际样品的加标回收率在 98.5%～103.5%之间。 　　[KH*3/4D][HTH]关键词电化学发光； 壳聚糖Ru（bpy）2+3SiO2纳米粒子； 尿酸 　　[HT][HK][FQ（32，X，DY-W][CD15稿受 　　本文系国家自然科学基金（ No.；陕西省科技统筹创新工程计划项目（2012KTDZ0202）；商洛市科技局计划项目（SK20144）及陕西省尾矿资源综合利用重点实验室项目（14SKYFWK06）资助。 　　* Email：fanxuemei527@163.com[HT] 　　1引言 　　尿酸是核蛋白和核酸的代谢产物，人体内尿酸过量是许多疾病的征兆，如痛风、肾功能衰竭、心血管疾病等，故人体内尿酸的检测在临床诊断方面有着重要意义。目前，测定尿酸的方法主要有色谱法摘要 [1，2]、分光光度法摘要 [3，4]、荧光法摘要 [5，6]、化学发光法摘要 [7，8]、电化学法摘要 [9～11]等。 　　电化学发光因其设备简单、灵敏度高、适用范围广等特点而备受关注。但是目前利用电化学发光法测定尿酸的方法较少摘要 [12，13]。近年来，通过将发光试剂固定在电极表面制备得到固相电化学发光传感器，这样既节约了昂贵的发光试剂，又提高了灵敏度，拓宽了电化学发光法在分析化学中的应用。溶胶凝胶膜法和Nafion/MCNT是目前应用最多的固定化技术，但是溶胶凝胶法制备的电化学发光传感器稳定性较差摘要 [14]。利用二氧化硅微球包埋联吡啶钌，可以改善SiO2溶胶凝胶法固定联吡啶钌传感器的稳定性摘要 [15，16]。壳聚糖分子中含有丰富的游离氨基和羟基，具有良好的吸附能力、导电能力和生物相容性，是电化学发光传感器中较优良的材料摘要 [17]。 　　本研究利用反相微乳液法制备得到壳聚糖Ru（bpy）2+3SiO2复合纳米粒子（CRuS NPs），带正电荷的CRuS NPs与带负电荷的Nafion通过静电作用自组装固定于玻碳电极表面，制备了电化学发光传感器。此传感器具有良好的稳定性和重现性，用于尿酸的免标记检测，结果令人满意。与临床上测定尿酸的方法相比，本方法简单、试剂用样量少、选择性好。 　　2实验部分 　　2.1仪器与试剂 　　MPIE型电致化学发光分析系统（西安瑞迈电子科技有限公司），Zennium电化学工作站（德国Zahner公司），UV1600PC 紫外可见分光光度计（中国上海美谱达仪器有限公司），F4600荧光分光光度计（日本日立公司），RT5 POWER电磁搅拌机（德国IKA公司），WF300D超声波清洗机（宁波海曙五方超声设备有限公司），TDL802B型离心机（上海安亭科学仪器厂），PTRO 10L实验室超纯水设备（上海品拓环保工程设备有限公司）。三电极系统：工作电极为裸玻碳电极或修饰电极，Pt丝为对电极，Ag/AgCl（饱和KCl 溶液）为参比电极。 　　多壁碳纳米管（MCNT，中国科学院成都有机化学有限公司， 7.5%，7～15 nm × 0.5～10 μm.）；壳聚糖（MW=60000～120000 g/mol， 乙酰化度≤ 40 mol%）、三联吡啶钌、Nafion 117、正硅酸乙酯、Triton×100、正己醇、环己烷均购于Sigma公司；尿酸（天津市华东试剂厂）；其余试剂均为分析纯。 　　0.5%壳聚糖溶液由1%冰醋酸溶液配制而成。0.01 mol/L Ru（bpy）2+3由0.1 mol/L PBS 溶液（pH 7.4）配制而成。Nafion/MCNT的配制：准确称取0.05 g碳纳米管分散于60 mL 2.2 mol/L HNO3中，超声30 min后，室温放置20 h，然后用超纯水洗至中