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复方鲜竹沥口服液质量标准研究 　　摘 要：目的：建立了复方鲜竹沥口服液的质量标准。方法：采用薄层色谱法对鱼腥草、桔梗进行定性鉴别，采用HPLC测定枇杷叶中熊果酸的含量。结果：薄层色谱法能准确鉴别鱼腥草、桔梗，HPLC能准确测定熊果酸的含量，测得熊果酸的线性范围为2.04～40.84μg?mL-1，R=0.9999；平均回收率为99.32%，RSD（%）=0.58%。结论：该方法准确、可行，可作为复方鲜竹沥口服液的质量标准。 　　关键词：复方鲜竹沥口服液；熊果酸；薄层色谱法；HPLC 　　复方鲜竹沥口服液为祛痰剂，具有清热化痰，止咳之功效，主治痰热咳嗽，痰黄黏稠。由鲜竹沥、鱼腥草、枇杷叶、桔梗、半夏、生姜、薄荷油加工而成的中药复方口服液。为了更好的控制本品质量，建立了复方鲜竹沥口服液的质量标准研究，采用薄层色谱法对鱼腥草、桔梗进行定性鉴别，采用HPLC法测定枇杷叶中熊果酸的含量。 　　1 仪器、试药及样品 　　高效液相色谱仪（岛津Nexera XR）；迪马C18（250×4.6mm，5μm）色谱柱；熊果酸对照品（中检所，批号：110742-201220），甲基正壬酮对照品、桔梗对照药材（中检所）；乙腈为色谱纯，水为纯净水，其它试剂均为分析纯；复方鲜竹沥口服液（市售样品，规格：10ml*10支）。 　　2 薄层鉴别 　　薄层鉴别 结合本产品特点，参照药典，建立了鱼腥草、桔梗、半夏药材的薄层定性鉴别方法。 　　2.1 鱼腥草鉴别。取本品200ml，置圆底烧瓶中，加水100ml，连接挥发油测定器。自测定器上端加水使充满刻度部分，再加醋酸乙酯1ml，连接回流冷凝管，加热回流1小时，停止加热，放置片刻，分取醋酸乙酯层，作为供试品溶液。另取甲基正壬酮对照品，加醋酸乙酯制成每1ml含10μg的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述供试品溶液10μl，对照品溶液5μl，分别点于同一以羧甲基纤维素钠为黏合剂的硅胶G薄层板上，以正己烷-醋酸乙酯（8：2）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以二硝基苯肼试液，供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同的黄色斑点。 　　2.2 桔梗鉴别。取本品10ml，加7%硫酸乙醇-水（1：3）混合溶液10ml，加热回流30分钟，放冷，用三氯甲烷振摇提取2次，每次20m1，合并三氯甲烷液，加水洗涤2次，每次30ml，弃去洗液，三氯甲烷液用无水硫酸钠脱水，滤过，滤液蒸干，残渣加甲醇1ml使溶解，作为供试品溶液。另取桔梗对照药材1g，加7%硫酸乙醇-水（1：3）混合溶液20ml，加热回流2小时，同法制成对照药材溶液。照薄层色谱法试验，吸取上述两种溶液各10μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以三氯甲烷-乙醚（2：1）为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加热至斑点显色清晰。供试品色谱中，在与对照药材色谱相应的位置上，显相同颜色的斑点。 　　2.3 专属性试验。分别取不含鱼腥草的阴性样品、不含桔梗的阴性样品，按上述各自方法制成阴性样品供试品溶液。结果在与甲基正壬酮对照品色谱相应的位置上，鱼腥草阴性样品不显相同的黄色斑点。在与桔梗对照药材色谱相应的位置上，不含桔梗的阴性样品不显相同颜色的斑点。本品其他成分不干扰鱼腥草、桔梗的定性鉴别，专属性良好。 　　3 含量测定 建立了HPLC法测定本品中枇杷叶主要有效成分熊果酸含量方法 　　3.1 色?V条件。以十八烷基砝烷键合硅胶为填充剂；以乙腈-甲醇-0.5%醋酸铵溶液（65：15：20）为流动相；柱温35℃；进样量20μl；检测波长为210nm。理论板数按熊果酸峰计算应不低于5000。 　　3.2 对照品溶液的制备。取熊果酸对照品适量，精密称定，加95%乙醇制成每1ml含熊果酸20μg的溶液，即得。 　　3.3 供试品溶液的制备。精密取本品5ml，置50ml量瓶中，加入95%乙醇适量，超声处理（功率250W，频率50kHz）10分钟，放冷，加95%乙醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得。 　　3.4 专属性试验。按处方比例制备不含枇杷叶的阴性样品，按供试品方法制备阴性样品溶液，结果表明，阴性样品溶液在熊果酸色谱峰处无干扰峰，方法专属性良好。 　　3.5 线性关系考察。精密称取熊果酸对照品10.21mg，置50ml量瓶中，加95%乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀，作为对照品原液。精密量取对照品原液0.1、0.5、1.0、1.5、2.0ml，分别置10ml量瓶中，加95%乙醇稀释至刻度，摇匀，作为不同浓度的对照品溶液。照含量测定法，精密量取20μl，注入高效液相色谱仪，记录色谱图，以浓度为横坐标，峰面积为纵坐标作线性回归，详见表1。 　　结果表明，熊果酸在浓度为2.04～40.84μg?mL-1的范围内线性关系良好。