复方苦参注射液对肺癌患者CD4CD25调节性T淋巴细胞影响.docVIP

复方苦参注射液对肺癌患者CD4CD25调节性T淋巴细胞影响 　　【中图分类号】 R734.2 【文献标识码】 A 【文章编号】1185-1672(2008)- 08-0710-02 　　摘要 目的研究复方苦参注射液的抗肿瘤作用机制。方法 采用流式细胞计数仪，检 测 30例健康人、60例肺癌患者及65例复方苦参注射液治疗的肺癌患者，其外周血CD4+ CD25 + 调节性T淋巴细胞（CD4+CD25+ Treg）的变化。结果通过与健 康对照组及肺癌对照组的比较，发现肺癌患者外周血CD4+CD25+ Treg显著增高，而使用 复方 苦参注射液治疗后，可显著降低肺癌患者外周血CD4+CD25+ Treg水平。结论肺癌患者外周血CD4+CD25+ Treg水平增高与肿瘤的发生密切相关。而复方苦参 注射液有显著降低肺癌患者CD4+CD25+ Treg水平的作用，该作用可能与其抗肿瘤效应机 制相关。 　　关键词 复方苦参注射液；肺癌；CD4+CD25+调节性T淋巴细胞 　　 　　复方苦参注射液的抗肿瘤效果已引起普遍关注。在临床应用中，不管是局部的腔内注射或是 全身应用，已经观察到复方苦参注射液具有显著抑制肿瘤细胞生长、保护机体免疫功能作用 。但其作用机理还不清楚，有研究认为可能参与了抗肿瘤细胞免疫调节。我们采用流式细胞 术，对125例肺癌患者外周血淋巴细胞中CD4+CD25+ Treg进行检测，观察复方苦参注射 液使用前后肺癌患者外周血CD4+CD25+ Treg的变化，研究其与抗肿瘤免疫的关系并探讨 其抗肿瘤机理。 　　 　　1 材料 　　 　　1．1 标本来源 125例肺癌患者均为我院2006年1月至2007年12月的初诊 手术病人。随机分为药物组和肺癌对照组。药物组为手术后使用复方苦参注射液的患者，共 65例。其中男性39例，女性26例，年龄42～81岁，平均58.8岁。鳞癌30例，腺癌28例，肺小 细胞癌7例；发现淋巴结转移27例，未转移38例。临床分期：Ⅰ期5例，Ⅱ期27例，Ⅲ期33例 。复方苦参注射液的使用为20ml/天，手术后第二天开始，连续静脉滴注10天。肺癌对照组6 0例，其中男性36例，女性24例，年龄39～80岁，平均57.6岁。鳞癌28例，腺癌27例，肺小 细胞癌5例；淋巴结转移27例，未转移33例。临床分期：Ⅰ期6例，Ⅱ期24例，Ⅲ期30例。30 例正常对照组为我院体检中心经体格检查各项指标均正常的健康体检者，其中男20例，女10 例。年龄20～70岁，平均55.6岁。肺癌两组间性别、年龄、临床分期及病理类型比例均无显 著差异。 　　1．2 仪器与试剂 FACS Calibur流式细胞仪， CD25+－PE/CD4+－FITC及作同型对照的羊抗 鼠IgG－FITC/PE单克隆抗体、溶血素均为美国BD公司产品。复方苦参注射液为本院内药房提 供。 　　 　　2方法 　　 　　2．1 标本采集 所有标本均在受检者清晨空腹下，用一次性真空管采集 肘静脉血，以枸椽酸钠抗凝。对肺癌患者分别于术前及术后第15天采集静脉血。 　　2．2 检测方法 取2支专用试管，加入抗凝全 血100ul后分别加入CD25+－PE/CD4+－FITC 及阴性对照单克隆抗体20ul。室温避光放置30分钟后加入溶血剂2.0 ml，10分钟后1500r/mi n离心5min，弃上清液，加入PBS0.5ml，用流式细胞仪的CellQuest软件获取和分析。测定CD 4+CD25+ Treg占CD4+ T细胞的百分比。 　　2．3 统计学方法 用SPSS11.5软件包进行统计分析， 各组数据用χ±s表示，组间比较用t检验。 　　 　　3 结果 　　 　　药物组术前、术后第15天和肺癌对照组术前、术后第15天外周血CD4+CD25+ Tre g均显著高于正常对照组，比较结果见表1。 　　术前药物组和肺癌对照组两组间外周血CD4+CD25+ Treg无显著差异。 术后15 天药物组和肺癌对照组两组间外周血CD4+CD25+ Treg有显著差异。药物组术后第15天外 周血CD4+CD25+ Treg显著低于术前，而肺癌对照组术前与术后第15天比较，外周血CD4 +CD25+ Treg无显著差异。表明使用复方苦参注射液后，患者外周血CD4+CD25+ Tre g显著降低。比较结果见表2。 　　 　　 　　4 讨论 　　 　　在过去10年里，许多新的治疗方法被试用于肿瘤患者，但并未得到稳定的效果［1］。因此中 药的抗肿瘤治疗受到越来越多的重视。中药抗肿瘤作用已展现出较为广阔的前景。临床实践 也已证明，中药在肿瘤治疗上确有显著疗效［2］。但是中药成分复杂，药理作用广 泛，作用 机理也不十分清楚。例如目前被广泛认可的抗