第6章微生物的生长及其控制-gakusei 幻灯片.pptVIP

第六章 微生物的生长及其控制 微生物生长分 一、获得微生物纯培养的方法 纯培养：是指来源于同一个细胞的细胞群体 方法： 稀释倒平板法 划线法 单细胞挑取法 利用选择培养基培养法 单细胞挑取法 选择培养基分离法 GasPak罐培养法 将厌氧罐中GasPak袋剪开一角，并注入适量的水，水与袋内的化学物质发生反应产生H2和CO2。在钯催化剂作用下，H2与O2发生反应生成水，造成一个厌氧环境。 细胞数目的测定 ?分批培养：把微生物接种于一定容积的培养基中，培养后一次收获的培养方式。 单细胞微生物的典型生长曲线 1）适应期： 细胞形态增大； 细胞内的RNA含量增高； 合成代谢活跃； 生长繁殖速度几乎等于零 对外界不良环境条件敏感。 出现原因：适应新的环境条件，合成新的酶，积累必要的中间产物。为细胞分裂作准备。 菌种的遗传性，菌龄 接种量 培养基成分 发酵工业上需尽量缩短该期，以降低生产成本。 影响指数期微生物代时长短的因素： 菌种 营养成分 营养物的浓度 培养温度 3）稳定期 特点： 1. 生长速率常数R等于0。 2. 菌体产量达到了最高值。 3. 合成次生代谢产物。 4. 细胞内出现储藏物质，芽孢杆菌内开始产生芽孢。 产生原因： 1. 营养物尤其是生长限制因子的耗尽。 2. 营养物的比例失调，如碳氮比不合适。 3. 有害代谢废物的积累。 4. 理化条件不适应。 4）衰亡期 特点： 1. 生长速率常数R为负值。 2. 细胞的形态发生变化。 3. 释放次生代谢产物，芽孢等。 4. 菌体开始自溶。 产生原因： 生长条件的进一步恶化，使细胞内的分解代谢大大超过合成代谢，继而导致菌体的死亡。 2.氧与不同微生物的关系 （1）严格厌氧微生物并不是被氧所杀死，而是由于不能解除某些氧代谢产物(过氧化氢、超氧阴离子自由基等)的毒性而死亡。 （2）好氧微生物具有降解这些产物的酶，如过氧化氢酶、过氧化物酶、超氧化物歧化酶(SOD)等，严格厌氧微生物则缺乏全部或部分这些酶。 （3）专性好氧微生物和大多数兼性好氧微生物都含有超氧化物歧化酶和过氧化氢酶，某些兼性好氧微生物和耐氧厌氧微生物只含有SOD，而缺乏过氧化氢酶。因此在生长过程中产生的超氧阴离子自由基被分解去毒，过氧化氢则通过细胞内某些代谢产物进一步氧化而解毒，这是耐氧厌氧菌在有氧条件下仍可生存的内在机制。 氧气影响微生物生长的机制 厌氧菌氧毒害的机制： 由于厌氧菌细胞内缺乏SOD和过氧化氢酶，无法消除02.- （超氧阴离子自由基）是活性氧的形式之一，带奇数电子，负电荷。即有分子性质，也有离子性质，反应力极强，性质极不稳定。在体内可破坏各种重要生物高分子和膜，也可形成其他活性氧化物。 好氧与耐氧菌驱除02.-机制： 过氧化氢酶 H2O+1/202 SOD 2 02.-+2H + H2O2+ 02 好氧及耐氧菌 过氧化物酶（耐氧菌） 2H2O 3、微生物的抗药性 抗药性：微生物对以抗生素为主的药物的抵抗性 2. 丝状微生物群体生长曲线 丝状微生物的群体生长有着与单细胞微生物类似规律 可划分为： 生长延滞期 快速生长期 衰亡期 三、微生物的连续培养 连续培养：不断地补充营养物质，改善培养条件，使微生物长期保持在指数期的培养方式。 结果：培养物达到动态平衡，形成微生物高速连续生长 第三节 影响微生物生长的因素 化学因素 物理因素 温度 氧气 PH 氧化还原电位 水分 超音波与微波 酸 碱 重金属及其化合物 卤族元素及其化合物 有机化合物 染料 一、温度 温度对微生物生长的影响是通过影响细胞内的生物化学反应而实现 最适生长温度：某菌分裂代时最短和生长速率最高时的温度。 二、氧气 分子氧对它们有毒，在大气环境下，只能在固体培养基或半固体培养基深层无氧处或在低氧化还原条件下生长；生命活动所需要能量借发酵，无氧呼吸，循环光合磷酸化提供，缺乏SOD和细胞色素氧化酶，多数无过氧化氢酶。如产甲烷菌 SOD：一切好氧微生物或耐氧微生物含有的可使剧毒的超氧阴离子自由基变为过氧化氢的酶 好氧菌 NADH2 N