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大豆GmeR基因启动子克隆及序列分析 　　摘要：ＧｍｅＲ是一种植物酶学抗病基因，编码的蛋白质具有丝氨酸乙醛酸转氨酶（ＳＧＴ）活性，受水杨酸诱导，与大豆霜霉病抗性密切相关。为了进一步研究ＧｍｅＲ基因的抗病机理，我们利用染色体步移技术克隆得到长为１ ０36 ｂｐ的ＧｍｅＲ基因５′上游片段，序列分析显示此片段含有典型的ＴＡＴＡ－ｂｏｘ、ＣＡＡＴ－ｂｏｘ、Ｇ－ｂｏｘ和ａｓ－１顺式调控元件。 　　关键词：ＧｍｅＲ基因；启动子克隆；染色体步移技术；ａｓ－１调控元件 　　中图分类号：文献标识码：Ａ文章编号：0439－８114（２０11）02－0407-04 　　 　　Ｃｌｏｎｉｎｇ ａｎｄ Ｓｅｑｕｅｎｃｅ Ａｎａｌｙｓｉｓ ｏｆ ｔｈｅ ＧｍｅＲ Ｇｅｎｅ Ｐｒｏｍｏｔｅｒ ｆｒｏｍ Ｓｏｙｂｅａｎ 　　（Ｇｌｙｃｉｎｅ ｍａｘ Ｌ．） 　　 　　ＺＨＡＮＧ Ｙａｎ－ｙａｎ１，２，ＬＩ Ｍｅｉ２，ＤＯＮＧ Ｌｉ－ｑｉａｎｇ１，２，ＳＵＮ Ｗｅｎ－ｌｉ２，ＣＨＥＮ Ｈｏｎｇ－ｍａｎ１，ＬＩＵ Ｙｕ－ｈｕｉ２ 　　（１． Ｐｌａｎｔ ｐａｔｈｏｌｏｇｙ ｄｅｐａｒｔｍｅｎｔ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｕｎｉｖｅｒｓｉｔｙ ，Ｓｈｅｎｙａｎｇ １１０１６１，Ｃｈｉｎａ； 　　２． Ｂｉｏｔｅｃｈｎｏｌｏｇｙ Ｒｅｓｅａｒｃｈ Ｉｎｓｔｉｔｕｔｅ，Ｃｈｉｎｅｓｅ Ａｃａｄｅｍｙ ｏｆ Ａｇｒｉｃｕｌｔｕｒａｌ Ｓｃｉｅｎｃｅｓ，Ｂｅｉｊｉｎｇ １０００８１，Ｃｈｉｎａ） 　　 　　Ａｂｓｔｒａｃｔ： ＧｍｅＲ waｓ ａｎ ｅｎｚｙｍａｔｉｃ ｄｉｓｅａｓｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｃｅ ｇｅｎｅ， the protein coded had the activity of ｓｅｒｉｎｅ ｇｌｙｏｘｙｌａｔｅ ａｍｉｎｏｔｒａｎｓｆｅｒａｓｅ（ＳＧＴ）， ｗｈｉｃｈ ｗａｓ ｉｎｄｕｃｅｄ ｂｙ ｓａｌｉｃｙｌｉｃ ａｃｉｄ（ＳＡ） and was closely related to soybean downey mildew resistance． Ｉｎ ｏｒｄｅｒ ｔｏ ｉｎｖｅｓｔｉｇａｔｅ ｔｈｅ ｒｅｓｉｓｔａｎｔ ｍｅｃｈａｎｉｓｍ ｏｆ ＧｍｅＲ ｇｅｎｅ， ｔｈｅ １ ０36 ｂｐ ５′ ｕｐ ｓｔｒｅａｍ ｒｅｇｉｏｎ ｏｆ ｔｈｅ ＧｍｅＲ ｇｅｎｅ ｗａｓ ｃｌｏｎｅｄ ｂｙ ｔｈｅ genome ｗａｌｋｉｎｇ． Ｓｅｑｕｅｎｃｅ ａｎａｌｙｓｉｓ ｒｅｖｅａｌｓ ｔｈａｔ ｉｔ ｃｏｎｔａｉｎｓ ｃｌａｓｓｉｃａｌ ＴＡＴＡ－ｂｏｘ， ＣＡＡＴ－ｂｏｘ， Ｇ－ｂｏｘ， ｗｈｉｃｈ ａｒｅ ｃｏｎｓｅｒｖｅｄ ｉｎ ｅｕｋａｒｙｏｔｉｃ ｇｅｎｅ ｐｒｏｍｏｔｅｒｓ， ａｎｄ ｏｔｈｅｒ cis-regulatory ｅｌｅｍｅｎｔｓ ｓｕｃｈ ａｓ ａｓ－１ regulatory ｅｌｅｍｅｎｔ． 　　Ｋｅｙ ｗｏｒｄｓ： ＧｍｅＲ ｇｅｎｅ； ｐｒｏｍｏｔｅｒ ｃｌｏｎｉｎｇ； genｏｍｅ ｗａｌｋｉｎｇ； ａｓ－１ regulatory ｅｌｅｍｅｎｔ 　　 　　霜霉病是一种由霜霉菌引起的真菌性植物病害。植株从幼苗到收获各阶段均可发病，且以成株受害较重，主要危害叶片，由基部向上部叶发展。发病初期在叶面形成浅黄色近圆形至多角形病斑，空气潮湿时叶背产生霜状霉层，有时可蔓延到叶面。后期病斑枯死连片，呈黄褐色，严重时全部外叶枯黄死亡。霜霉病在春末夏初或秋季连续阴雨天气最易发生，病害严重时可造成２０％～４０％的产量损失。该病害在甜瓜、黄瓜、大豆等一些作物中经常发生。以大豆霜霉病为例，我国大豆的霜霉病发生区主要分布在东北和华北地区，在大豆生育期，气候凉爽的地区发病较重。病害严重时引起早期落叶、叶片凋枯、种粒霉烂，减产达３０％～５０％。幼苗、成株叶片、荚及豆粒均可被害，带菌种子长出的幼苗可使整个植株发病。对于霜霉病等植物病害的防治，最为根本的措施是培育抗病植株。而与植物抗病性相关的基因则对于抗病植株的培养有着非常重要的作用。近年来，越来越多的试验表明组成型表达的基因在植物的抗病性方面起着重要的作用。Ｗａｎｇ等［１］和Ｈａｏ等［２］报道调节碳代谢的腺苷酸激酶（Ａｄｅｎｏｓｉｎｅ ｋｉｎａｓｅ）和ＳＮＦ１（Ｓｕｃｒｏｓｅ ｎｏｎ－ｆｅｒｍｅｎｔｉｎｇ－１）与植物的抗病毒相关。拟南芥中编码甘油激酶的ＮＨＯ１基因是抗寄生植物抵抗Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ ｓｙｒｉｎｇａｅ菌必需的，而致命的Ｐ． ｓｙｒｉｎｇａｅ对植物的危害则是通过茉莉酸信号途径抑制ＮＨＯ１基因的表达而起作用［３］。Ｔａｌｅｒ等［４］从野生型甜瓜中克隆了两种同源性很高的编码丝氨酸乙醛酸转氨酶（Ｓｅｒ ｇｌｙｏｘｙｌａｔｅ ａｍｉｎｏ