实时直接分析―质谱法快速检测饮料和尿液中γ―羟基丁酸.docVIP

实时直接分析―质谱法快速检测饮料和尿液中γ―羟基丁酸 　　摘 要 建立了一种实时直接分析-质谱法（DART-MS）用于饮料（水、碳酸饮料、啤酒）和尿液中γ-羟基丁酸（GHB）快速检测。样品经甲醇-水（1∶1， V/V）溶液稀释后，在负离子模式下，以选择离子扫描（SIR）模式进行直接定量分析。离子化气体温度为 350℃，进样速率为0.5 mm/s。针对水样、碳酸饮料、啤酒、尿液样品，本方法的检出限（S/N=3）为1～2 μg/mL，定量限（S/N=10）为3～5 μg/mL。标准曲线线性相关系数为0.9899～0.9980，加标回收率为80.8%～115.2%，相对标准偏差为1.9%～12.8%。本方法具有样品前处理简单、分析速度快、成本低等优点，有望在大批量饮料和尿液样品的快速筛查分析中发挥作用。 　　关键词 实时直接分析-质谱法；γ-?u基丁酸；快速筛查 　　1 引 言 　　γ-羟基丁酸（γ-Hydroxybutyric acid，GHB）是一种常见的滥用药物，被用作镇静剂和麻醉剂，过度使用会造成暂时性失忆，甚至导致死亡。我国和美国都将其列为管制药物。GHB具有强烈的镇静及健忘效应，易溶于大多数液体基质中，且无色无味，因此常作迷药用于药物辅助性犯罪[1]。对于服用GHB者，尿液中GHB浓度明显高于内生浓度水平（低于10 μg/mL），因此尿液是检测GHB极具参考价值的生物样本，有必要建立快速灵敏的检测饮料和尿液中GHB的方法。 　　目前，GHB的检测方法有显色法、红外光谱法、气相色谱-质谱联用法、液相色谱-质谱联用法、离子色谱法及核磁共振法等。Alston等[2]用化学显色法作为初步筛选药物的方法，但该方法检出限高，且易受干扰； Witkowski等[3]采用傅里叶变换红外法（FTIR）用于GHB的快速筛查，但定量分析存在不足； 色谱-质谱联用是使用最广泛的方法之一，Lenz等[4]在酸性条件下将γ-羟基丁酸（GHB）转变为γ-丁内酯（GBL），浓缩后采用顶空进样方式的气相色谱-质谱联用法（GC-MS）分析； 孟品佳等[5]用五氟卞基溴烷基化衍生后，对衍生物进行了质谱解析，然而提取和衍生化的过程复杂且耗时； Busardo等[6]采用HPLC-MS/MS法检测血浆、尿液、脑脊髓液和头发中的GHB，尽管避免了GC-MS中将GHB进行内酯化或者衍生化的样品前处理问题，但仍然需要耗时的色谱分离，且使用的串联质谱价格昂贵，不利于推广。Liu等[7]采用二维离子色谱法测定了人尿样品中GHB含量，通过离子排斥色谱柱消除尿液基质干扰，再利用柱切换技术，采用离子交换色谱柱测定GHB，由于需要对仪器进行改装，且使用实验室自制离子交换色谱柱，不利于推广。Palomino-Schtzlein等[8]利用核磁共振对尿液和血清中的GHB进行定性和定量检测，在NMR分析中，体液中大分子重叠共振，严重干扰了GHB的检测。Saar-Reismaa等[9]利用毛细管电泳法测定人唾液样本中的GHB，但毛细管电泳中电渗流的不稳定性经常引起迁移时间的变化。 　　实时直接分析离子源（DART）是一种新型的敞开式非表面接触型解析/离子化分析技术，可分析各形态样品，无需繁杂的前处理和冗长的色谱分离过程，分析速度为秒级，可实现对目标物的实时定性与定量分析[10]。Bennett等[11]将DART与飞行时间质谱仪（TOF）联用，检测饮料中GHB； Chen等[12]将DART与四极杆-轨道离子阱质谱（Q-Orbitrap）联用，用于检测包括GHB在内的多种街头药物。但上述工作均未进行GHB的准确定量分析，且未涉及尿液样本的检测； 同时，飞行时间质谱和四极杆-离子阱质谱比单四极杆质谱价格昂贵，测试成本高，不利于普及使用。 　　本研究采用实时直接分析-单四极杆质谱法，建立了快速检测饮料及尿液中的GHB的方法。本方法无需复杂的样品前处理过程，分析速度快，且单重四极杆质谱成本相对较低，体积小，更易于推广，饮料及尿液样本的同时测定更利于刑事案件的侦查。 　　2 实验部分 　　2.1 仪器与试剂 　　实时直接分析离子源DART SVP（美国Ion Sense公司）； ACQUITY QDa质谱检测器（美国Waters公司）； 3K15离心机（德国Sigma公司）、UPR-II-5T超纯水仪（四川优普超纯科技有限公司）、VX-200涡旋搅拌器（美国Labnet公司）、AR223CN电子天平（美国Ohaus公司）、KH7200DB型超声仪（昆山禾创超声仪器有限公司）。 　　甲醇（色谱纯，德国 Merck 公司），实验用水为经UPR-II-5T超纯水仪制备的超纯水； γ-羟基丁酸（美国Cerilliant公司）。3种饮料样品购于当地超市，分别为水、无色碳酸饮料和啤酒