TNF-α诱导fgl2表达在心脏微循环障碍的作用及机制分析-内科学(心血管病)专业论文.docxVIP

目 录 英文缩略词表和中文对照 ….1 中文摘要 2 Abstract 5 前言 ...9 第一部分：缺血再灌注大鼠心肌中 TNF-α与 fgl2 表达的研究 13 材料和方法14 结果 ..24 讨论28 参考文献…………………………………………………………………………31 第 二 部 分 ： 促 炎 因 子 TNF-α 对 大 鼠 微 血 管 内 皮 细 胞 fgl2 表 达 影 响 的 研 究……………………………..………………………………………………37 材料和方法38 结果48 讨论56 参考文献…………………………………………………………………………59 第 三 部 分 ： TNF-α 诱 导 大 鼠 心 肌 微 血 管 内 皮 细 胞 fgl2 表 达 信 号 通 路 机 制 的 研 究64 材料和方法 ..65 结果 ..66 讨论 ..68 参考文献…………………………………………………………………………70 综述 ..75 致谢 ..85 PAGE PAGE 1 英文缩略词表 英文简称 英文全称 中文全称 AAR area at risk 缺血危险区 LV left ventricle 左室 PDTC pyrrolidinethio carbamate 二硫代氨基甲酸吡咯烷 eNOS endothelial nitric oxide synthase 内皮型一氧化氮合酶 Fgl2 Fibrinogen-like protein 2/fibroleukin 纤维介素蛋白 TNF-α Tumor necrosis factor- α 肿瘤坏死因子-α MAPK mitogen-activated protein kinase 丝裂原活化蛋白激酶 CMECs cardiac microvascular endothelial cells 氯化三苯基四氮唑 TTC triphenyltetrazolium chloride 氯化三苯基四氮唑( CLSM confocal laser scanning microscopy 激光共焦扫描显微镜 MI/R myocardial ischemia/reperfusion 心肌缺血再灌注 NF-κB nuclear factor kappa B 核因子-KB NO nitric oxide 一氧化氮 IS Infarct size 梗死面积 HE staining hematoxylin-eosin staining 苏木精-伊红染色 AP Ammonnium persulfate 过硫酸铵 HRP horseradish peroxidase 辣根过氧化酶 LAD Left anterior descending 左前降支 PCI percutaneous coronary intervention 经皮冠状动脉介入 LPS lipopolysaccharide 脂多糖内毒素 ACS acute coronary syndomes 急性冠脉综合征 TNF-α诱导 fgl2 表达在心脏 微循环障碍的作用及机制研究 博士研究生 贾 鹏 导 师 王朝晖 教授 华中科技大学同济医学院附属协和医院心内科 中文摘要 第一部分 缺血再灌注大鼠心肌中 TNF-α与 fgl2 表达的研究 目的：大量的实验已经研究了 TNF-α在心肌缺血再灌注中的作用。但是 TNF-α在缺血 再灌注微循环障碍中的作用还不明确。我们通过检测大鼠缺血再灌注中 TNF-α和 fgl2 的表达量来明确在动物模型中 fgl2 的表达与 TNF-α是否有关。 方法：建立大鼠缺血再灌注模型，将大鼠分为假手术组，缺血再灌注 1 天组，3 天组， 7 天组。另外设立 TNF-α中和性抗体干预组，并设立假手术组+ TNF-α中和性抗体组、 缺血再灌注+非免疫性抗体组作为对照。将大鼠心脏左前降支（LAD）结扎 30 分钟， 给予 1 天，3 天，7 天不同再灌注。用 Evans 和 TTC 双染法确定心肌梗死面积。用 Western blot 方法检测 TNF-α和 fgl2 的表达量。TNF-α中和性抗体干预实验中，缺血再 灌注前 3 小时腹腔内注射 TNF-α中和性抗体，观察 fgl2 的表达量。 结果：缺血再灌注 3 天组的大鼠梗死面积明显大于 1 天组，和 7 天组。大鼠缺血再灌 注后 TNF-α和 fgl2 表达升高，TNF-α和 fgl2 蛋白在缺血再灌注 3 天组中表达量明显比 1 天组和 7 天组高，当 TNF-α被 TNF-α中和性抗体中和后，fgl2 蛋白表达量下降。 结论：大鼠缺血再灌注后心肌组织 T