鱼呼肠孤病毒诱导草鱼肾细胞凋亡-附件.pdf

第 卷 第 期 水 生 生 物 学 报 ， # ’ IV 6# 0 6’ 年 月 ， % % % ! ! 1)P1 9T/FRU*RSRC*)1 4*0*)1 0G 6 % % % !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 鱼呼肠孤病毒诱导草鱼肾细胞凋亡 ! ! ! ! 屈三甫 张小榕 郑从义 胡国斌 艾桃山 丁桂珍 喻运珍 刘 颖 （武汉大学生命科学学院，武汉 ；武汉市水产科学研究所，武汉 ） ! #$%% #$%%’( 摘要：采用荧光显微镜、电子显微镜、琼脂糖凝胶电泳、流式细胞仪分析等技术研究鱼呼肠孤 病毒诱导草鱼肾细胞（ ）凋亡。结果显示，鱼呼肠孤病毒感染 细胞后，光镜下可见空斑 )*+ )*+ 形成；荧光染色观察到细胞凋亡碎裂核；且电镜下呈现细胞核裂解，核周裂隙增大，细胞膜内 陷并出泡形成凋亡小体现象；琼脂糖凝胶电泳出现!,%—%%-. 整数倍的/01 梯形带；流式细 胞仪检测到典型的细胞凋亡峰，在病毒感染 ，细胞凋亡百分率达 。上述结果显示，鱼 #,2 !( 3 呼肠孤病毒诱导)*+ 细胞凋亡是其致细胞病变死亡的重要表现形式之一。 关键词：鱼呼肠孤病毒；草鱼肾细胞；细胞凋亡 中图分类号： 7 文献标识码： 文章编号： （ ） 45#!6#! 1 !%%% 8 $% %%% %’ 8 %’!’ 8 %’ 草鱼出血病（ ）是草鱼幼鱼阶段的主要感染性疾病，该 9:;==2?: /@A:A: B C=AA D=. 病死亡率高，造成渔业生产上的巨大损失。现已证实，鱼呼肠孤病毒（ ， ） E@A2 F:G@=HA EFI 是草鱼出血病的病原体。有关鱼呼肠孤病毒特征，受染宿主的病理学变化及草鱼出血病 ［— ］ 的防治等诸多方面已进行了深入研究! $ 。但是鱼呼肠孤病毒致细胞病变死亡机理却一 直悬而未决。本文报道了鱼呼肠孤病毒感染草鱼肾细胞并诱导细胞凋亡（ ）的研 1..JA@A 究结果，为阐明鱼呼肠孤病毒致宿主细胞病变死亡机理提供新的实验依据。 ! 材料与方法 ! 6 ! 材料 鱼呼肠孤病毒由武汉大学中国典型培养物保藏中心保藏并提供，草鱼肾细胞 系（ ）由中国科学院武汉病毒研究所方勤研究员惠赠，