不同剂量中波紫外线对角质形成细胞NF-κBp65及其抑制因子IκBα表达的影响研究-皮肤病与性病学专业论文.docxVIP

基金项目 本研究受国家自然科学青年基金项目； 江苏省基础研究计划（自然科学基金）面上项目（BK2011129）； 2011 年度高等学校博士学科点专项科研基金（20111106110041）资助。 不同剂量中波紫外线对角质形成细胞 N 不同剂量中波紫外线对角质形成细胞 NF-κB p65 及其抑制因子 IκBα 表达的影响研究 中文摘要 I I PAGE PAGE IV 不同剂量中波紫外线对角质形成细胞 NF-κB p65 及其抑制因子 IκBα 表达的影响研究 中文摘要 目的 探讨不同剂量中波紫外线照射对体外培养的人皮肤角质形成 细胞总蛋白中的 NF-κB p65 及其抑制因子 IκBα 表达水平的调控效应。 方法 使用 4.5mJ/cm2、10 mJ/cm2 及 50 mJ/cm2 中波紫外线照射角质 形成细胞，设置未经照射的对照组，在照射后的第 4 小时使用蛋白免疫 印迹法测定细胞总蛋白中 IκBα 及 NF-κB p65 的表达水平。并对人原代角 质形成细胞进行 50mJ/cm2 中波紫外线照射，照射后继续培养至第 2、4、 8、12 小时，分别测定四个时间点 IκBα 及 NF-κB p65 的表达水平。 结果 4.5mJ/cm2 和 10 mJ/cm2UVB 照射后 4h，相对于对照组细胞， 细胞系及原代细胞总蛋白中 IKKβ、IκBα、NF-κB p65 表达水平均无明显 变化（P0.05）；50mJ/cm2UVB 照射后 4h，细胞系及原代细胞中 IKKβ 的 表达水平均无明显变化(P0.05)，原代角质形成细胞中，IκBα 表达水平较 对照细胞(0.356±0.041)显著降低(0.128±0.031，t=43.879,P0.05)，NF-κB p65 较对照细胞（0.102±0.028）也较存在一定程度的降低（0.063±0.032， t=16.887，P0.05），细胞系中 IκBα 的表达水平较对照细胞（0.289±0.037） 轻度下调（0.123±0.031，t=31.074，P0.05），NF-κB p65 的表达水平无 明显变化（P0.05）。50mJ/cm2UVB 照射原代细胞后，相对于对照组细胞 （0.208±0.031），IκBα 表达水平在照射后 2h 开始下调（0.140±0.034， t=17.554,P0.05），并且随照射后时间推进而下调效应更为显著；NF-κB p65 的表达水平在 2h 和 4h 时无明显变化（P0.05），8h 时较对照细胞（1.235 中文摘要 不同剂量中波紫外线对角质形成细胞 NF-κB p65 及其抑制因子 IκBα 表达的影响研究 ±0.349）表达水平下调（1.162±0.345，t=36.671，P0.05），12h 较对照 细胞（1.390±0.226）仍下调（1.061±0.246，t=28.707，P0.05），随着 时间的推进下调效应无明显改变；Phospho-IKKα/β（ser176/180）、IKKβ、 Phospho-IKBα（ser32）、Phospho-NF-κB p65（ser536）表达量均无明显改 变（P0.05）。 结论 高剂量（50 mJ/cm2）中波紫外线辐射可显著抑制人原代角质形 成细胞总蛋白中的 IκBα 表达，同时轻度抑制 NF-κB p65 蛋白的表达，提 示可能存在中波紫外线辐射人原代角质形成细胞引起 NF-κB p65 活化的 另一种通路。 关键词：中波紫外线，角质形成细胞，NF-κB 作 者：丁 兰 指导老师：施 辛 不同剂量中波紫外线对角质形成细胞 N 不同剂量中波紫外线对角质形成细胞 NF-κB p65 及其抑制因子 IκBα 表达的影响研究 英文摘要 III III PAGE PAGE IV Effects of ultraviolet B on the expression level of NF-κB p65 and the inhibiting factor IκBα in human epidermal keratinocytes Abstract Objective This study investigated the regulation effects of different dozes of UVB on NF-κB p65 and its regulatory factor IκBα in human keratinocyte. Methods Ketatinocytes were exposed to 4.5mJ/cm2, 10 mJ/cm2 or 50 mJ/cm2 UVB, and non-exposed cells were us