转染窖蛋白1基因对脂多糖诱导的人支气管上皮细胞toll样受体4表达的影响及大黄素的干预效应-effect of transfecting celluar protein 1 gene on lipopolysaccharide-induced toll - like receptor 4 expression in human bronchial epithelial cells and the intervention effect of.docxVIP

华中 科技 大 华 中 科 技 大 学 硕 士 学 位 论 文 PAGE 10 PAGE 10 英文缩略词表 英文缩写 英文全称 中文全称 ALI LPS Acute lung injury Lipopolysaccharide 急性肺损伤 脂多糖 CAV-1 Caveolin-1 窖蛋白 1 CAV Caveolae 胞膜窖 TLRs TLR4 HBE Toll-like receptors Toll-like receptor 4 Human bronchial epithelial cells Toll 样受体 Toll 样受体 4 人支气管上皮细胞 CSD Caveolin scafolding domain 窖蛋白绞手架区 ICAM-1 HO-1 PMN Intercellular adhesion molecule-1 Hemoglobin oxidase -1 Polymorphonuclear 细胞间黏附分子-1 血红蛋白氧化酶-1 中性粒细胞 转染窖蛋白 1 基因对脂多糖诱导的人支气管上皮细胞 To l 样受体 4 表达的影响及大黄素的干预效应 硕士研究生：樊 琼 导 师：杨胜兰 教授 （华中科技大学同济医学院附属协和医院中西医结合科） 中文摘要 目的 研究转染窖蛋白 1（Caveolin- 1，CAV-1）基因对脂多糖（Lipopolysaccharide， LPS）诱导的人支气管上皮细胞（Human bronchial epithelial cells，HBE）Toll 样受体 4 （Toll-like receptor 4，TLR-4）表达的影响，以及大黄素(Emodin)对 LPS 诱导的 HBE 细胞 CAV-1 和 TLR-4 表达的干预效应。 方法 本实验分为两部分：第一部分，对 LPS 诱导的 HBE 细胞给予不同浓度的 Emodin 干预，并设立正常对照组、单纯 LPS 干预组、阳性对照组（Atorvastatin,阿托 伐他汀）和阴性对照组（溶媒 DMSO ），用免疫印记法（Western blot）检测并比较各 组细胞 CAV-1 的表达水平；第二部分，构建 Cav-EGFP 重组质粒，瞬时转染 HBE 细 胞，设立正常对照组和空质粒转染组，Western blot 检测并比较三组细胞 CAV-1 的表 达；于质粒转染 HBE 细胞 48h 后给予 LPS 刺激，Western blot 检测并比较 CAV-1 过表 达组与空质粒转染组 TLR-4 的表达，并给予 Emodin 干预转染后 LPS 诱导的 HBE 细 胞，Western blot 检测比较各组细胞 TLR-4 的表达。 结果 第一部分：与正常对照组相比，单纯 LPS 干预组 HBE 细胞经 LPS 刺激后， CAV-1 蛋白的表达量明显上调（P0.05)；中、高剂量 Emodin 干预组、阳性对照组与 单 纯 LPS 干 预组 相 比 ,CAV-1 蛋 白的 表 达 量均 明 显 下降 （ P0.05）； 第二 部 分 ： CAV-1-EGFP 重组质粒转染组与正常对照组、空质粒转染组比较，CAV-1 的表达量明 显上调（P0.05）,而空质粒转染组与正常对照组相比，CAV-1 的表达量无统计差异 （P0.05）；与空质粒转染组相比，CAV-1 过表达组能上调 LPS 诱导的 HBE 细胞 TLR-4 的表达,Emodin 能抑制该效应(P0.05)。 结论 Emodin 能抑制 LPS 诱导的 HBE 细胞 CAV-1 的表达；转染 CAV-1 基因能 上调 LPS 诱导的 HBE 细胞 TLR-4 的表达，Emodin 能抑制该效应。 关键词 转染；脂多糖；窖蛋白 1；Toll 样受体 4；大黄素 E fect of caveolin-1 gene transfected on the expression of to l-like receptor 4 induced by lipopolysaccharide in human bronchial epithelial ce ls and the intervention effect of emodin Candidate : Qiong,Fan Supervisor : Prof. Yang Shenglan Department of Integrated Chinese and Western Medicine, Union Hospital ， Tong ji Medical College , Huazhong Science Technology University Abstract Objective To investi