中国人喉鳞癌egfr突变基因的分析-analysis of egfr mutation gene in chinese laryngeal squamous cell carcinoma.docxVIP

PAGE PAGE 4 中国人喉鳞癌 EGFR 突变基因的研究 硕士研究生：赖海春 导 师： 王德生 副教授 摘 要 目的：研究中国人喉鳞癌 EGFR 基因突变情况 方法：1. QI Aamp DNA Mi ni Ki t 试剂盒法提取 28 例喉癌及其癌旁组织、10 例声带 息肉患者喉部正常组织 DNA，采用突变富集 PCR 法提取新鲜组织标本中突变 EGFR 基 因，通过 EGFR 基因突变液相芯片检测 EGFR 基因突变的情况，从而比较肿瘤组织与 癌旁组织、肿瘤组织与喉部正常组织 EGFR 基因突变的差异；2. QI Aamp DNA Mi ni Ki t 试剂盒法分别提取 28 例喉癌患者手术前、手术后第 1 天、手术后第 5 天和手术后第 10 天等不同时期共 112 份血清中的游离 DNA，以突变富集 PCR 法富集 EGFR 突变基因， 通过 EGFR 基因突变液相芯片的检测, 观察肿瘤切除术前、术后 EGFR 基因突变的动态 变化。 结果：1. 喉部鳞癌标本 28 例，组织表达 EGFR 突变基因阳性者 4 例，占全部病例数 的 14. 3％，4 例突变均位于外显子 20 中，其中 3 例突变类型为 T790M，另外 1 例突 变类型则尚未明确；癌旁组织以及喉部良性病变正常组织中均未检测出 EGFR 基因突 变；但是这种比较在统计学上没有显著性差异（P 0. 05）；2. 112 份血清样本中， 术前血清只有 1 例检出 EGFR 突变基因，术后血清 EGFR 突变基因阳性者总共 7 例， 其中 6 例突变位于外显子 21，类型为 L858R；1 例突变位于外显子 20，突变类型为 T790M；这其中还有 1 例同时具有外显子 20、21 上突变，外显子 21 上为 L858R，外 显子 20 上突变类型则尚未明确。从时序上看，患者血清中 EGFR 基因突变似乎存在 动态波动性，但绝大部分都出现在手术后第 5 天。但是，这些数据在统计学上仍然 没有显著性差异（P 0. 05）。 结论：1. 虽然喉癌组织中 4 例存在 EGFR 突变（占全部病例的 14. 3%）, 但与癌旁组 织、喉部正常组织比较无统计学意义（P0. 05），因此认为喉部鳞癌中 EGFR 基因突 变可能仅是偶然现象，尚不能作为检测中、早期喉癌存在与否或者指导肿瘤靶向治 疗的指标，需进一步扩大样本量深入研究。 2. 血清中 EGFR 突变基因的动态变化虽然在统计学中无显著性差别（P0. 05），但我 们认为可能系病例数太少所致，而创伤或者别的原因可能是血清游离 DNA 产生的可 能机制。因此，血清游离 DNA 的来源机制有待进一步阐明。 关键词：喉肿瘤 鳞状细胞癌 EGFR 基因 基因突变 The St udy on t he Somat i c Mut at i ons of EGFR i n Chi nese Squamous Cel l Car ci noma of Lar ynx Post gr aduat e: Hai chun, Lai Tut or s: Associ at e Pr of. Desheng, Wang Abst r act [ OBJECTI VE] To det ect i ve t he Epi der mal gr owt h f act or r ecept or ( EGFR) gene mut at i on i n Chi nese l ar ynx squamous cell car ci noma and ser um, and t o anal yze t he aff ect of EGFR gene mut at i on det ect i on i n cl i ni cal wor ks. [ METHODS] The DNA was col l ect ed by Qi Aamp DNA Mi ni Ki t. The EGFR gene mut at i ons wer e exami ned i n f r esh t i ssues of 28 cases of l ar yngeal squamous cell car ci noma, adj acent nont umor ous l ar yngeal epi t hel i um and t i ssues of 10 cases of nor mal ot her di seases. Besi des, t he EGFR gene mut at i ons of t he ser um of 28 cases wer e det