异氟烷预处理对缺氧复氧引起心肌细胞损伤影响.docVIP

异氟烷预处理对缺氧复氧引起心肌细胞损伤影响 　　[摘要] 目的 探讨异氟烷（Iso）在缺氧/复氧（A/R）诱导的心肌细胞损伤中的影响及其作用机制。 方法 培养心肌细胞H9c2，用不同浓度的Iso（1%、2%、3%）预处理后进行3 h的缺氧和3 h的复氧。MTT检测细胞生长，筛选Iso使用浓度，随后实时定量PCR检测miR-499表达。在3% Iso预处理的A/R损伤心肌细胞中转染miR-499的过表达试剂miR-499 mimic，流式细胞术检测细胞凋亡；Western blot检测Caspase-3、Caspase-9、Bax和Bcl-2的蛋白表达；试剂盒检测细胞中乳酸脱氢酶（LDH）、肌酸激酶（CK）和谷氨酸氨基转移酶（ALT）的含量。 结果 与Control组比较，A/R组的细胞活力显著下降（P 0.05），同时Iso预处理剂量依赖性的诱导细胞活力增加，由而筛选出3%作为Iso预处理浓度。与Control组比较，miR-499的表达在A/R组中显著提升（P 0.05），并在3% Iso预处理心肌细胞（Iso组）中下降（P 0.05）。与Control组比较，A/R组的细胞生长显著降低（P 0.05），细胞凋亡升高（P 0.05），促凋亡蛋白Caspase-3、Caspase-9、Bax表达升高（P 0.05），抑凋亡蛋白Bcl-2表达降低（P 0.05），LDH、CK和ALT的含量明显升高（P 0.05）。Iso预处理抑制以上由A/R诱导的H9c2细胞损伤，并且此心肌细胞保护作用可被miR-499过表达反转。 结论 Iso可以通过抑制miR-499表达减轻A/R引起的心肌细胞损伤。 　　[关键词] 异氟烷；miR-499；心肌细胞；缺氧/复氧 　　[中图分类号] R972 [文?I标识码] A [文章编号] 1673-7210（2018）03（b）-0009-06 　　Effect of Isoflurane on anoxia/reoxygenation-induced cardiocyte injury 　　FU Haiyu QIN Fuen XU Shuai YANG Lin ZHONG Zuling GONG Gu 　　Department of Anesthesiology， General Hospital of Chengdu Military Region of PLA， Sichuan Province， Chengdu 610083， China 　　[Abstract] Objective To investigate the effect of Isoflurane （Iso） on anoxia/reoxygenation （A/R）-induced cardiocyte injury and underlying mechanism. Methods Cultured cardiocytes （H9c2） were pre-treated with Iso （1%， 2%， 3%） and then stimulated with 3 h of anoxia and 3 h of reoxygenation. Cell proliferation was measured by MTT method， and the Iso concentration was selected. The miR-499 overexpression reagent， miR-499 mimic was transfected into cardiocytes pre-treated with 3% Iso and simulated with anoxia/reoxygenation. Cell apoptosis was detected by flow cytometry assay. The expression level of caspase-3， caspase-9， Bax and Bcl-2 were measured by Western blot. The contents of lactic dehydrogenase （LDH）， creatine kinase （CK） and alanine aminotransferase （ALT） were detected by corresponding kit， respectively. Results Compared with the control group， cell proliferation was significantly decreased in A/R group （P 　　[