新加达原饮对慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞影响.docVIP

新加达原饮对慢性乙型肝炎患者外周血树突状细胞影响 　　摘要：目的 观察新加达原饮对慢性乙型肝炎（CHB）患者外周血树突状细胞（DCs）的影响。方法 对20例CHB患者均给予新加达原饮治疗，疗程12周。于治疗前及治疗4、8、12周时采集抗凝外周静脉血，分离扩增单个核细胞中DC，流式细胞法检测DC表型，同步检测患者丙氨酸氨基转移酶（ALT）及HBV DNA水平，并以10例健康人作为正常对照。结果 与正常对照组比较，CHB患者外周血DCs表面CD80、CD86、CD-1α、HLA-DR表达显著下降（P0.01）。经新加达原饮治疗后，DCs表面分子表达水平均提高，在治疗12周时最显著（P0.01）。与治疗前比较，CHB患者治疗后ALT升高，于治疗8周时最显著（P0.01），治疗12周时明显下降（P0.01）；HBV-DNA水平下降，治疗12周时下降最显著（P0.01）。结论 CHB患者外周血DCs表面分子表达水平低下，新加达原饮能上调DC表型表达。 　　关键词：慢性乙型肝炎；新加达原饮；树突状细胞 　　DOI：10.3969/j.issn.1005-5304.2016.08.007 　　中图分类号：R259.126.2 文献标识码：A 文章编号：1005-5304（2016）08-0024-04 　　乙型肝炎是由乙型肝炎病毒（hepatitis B virus，HBV）引起的，以肝脏炎性病变为主的一种传染性疾 　　基金项目：陕西省中医管理局中医药科研课题（13-LC074） 　　病，宿主免疫状态是决定乙型肝炎临床转归和疗效的最主要因素[1]。近年来国内外研究提示，造成慢性乙型肝炎（chronic hepatitis B，CHB）感染慢性化的机制与机体内树突状细胞（DCs）抗原递呈功能缺陷，不能把病毒抗原的信号传递给机体的免疫系统有关[2-6]。新加达原饮是在明代医家吴又可创立的达原饮基础上，经过长期临床实践加减变化组成的经验方，对CHB具有较好治疗效果[7-9]。本研究以3个月为1个疗程，观察其对CHB患者外周血DCs的影响。现报道如下。 　　1 临床资料 　　1.1 一般资料 　　20例均为2013年7月-2014年12月陕西中医药大学第一附属医院门诊患者。其中男14例，女6例，年龄20～54岁，平均年龄（32.4±10.2）岁，病程2～21年。另以10例健康人作为正常对照，均为陕西中医药大学第一附属医院职工。本研究经医学伦理委员会批准。 　　1.2 诊断标准 　　CHB诊断依据2010年中华医学会感染病学分会、肝病学分会联合制定的《慢性乙型肝炎防治指南》的诊断标准[10]。 　　1.3 纳入标准 　　符合上述CHB诊断标准，半年内未服用任何抗病毒药物和免疫调节剂治疗，且不属于排除标准任何一项的病例。 　　1.4 排除标准 　　血清胆红素≥34.2 ?mol/L；ALT400 U/L；血清白蛋白≤30 g/L；重叠感染其他肝炎病毒（如甲、丙、丁、戊型肝炎病毒等），合并肝硬化、肝癌、脂肪肝；合并心脑、肺、肾等器质性疾病及造血系统严重疾病、精神病患者；年龄65岁或18岁妊娠或哺乳期妇女；未按规定服药者。 　　2 方法 　　2.1 治疗药物 　　所有患者均服用新加达原饮散剂（草果6 g，槟榔10 g，黄芩15 g，白芍12 g，厚朴10 g，柴胡15 g，丹参20 g，姜黄10 g，叶下珠15 g，僵蚕10 g，蝉蜕10 g，灵芝10 g等，药物饮片均购自北京同仁堂，经陕西中医药大学制药厂净化烘焙处理后，制成散剂），5 g，口服，每日3次。连续治疗12周为1个疗程。治疗期间禁止服用任何其他抗病毒药物和保肝降酶药物。 　　2.2 主要试剂 　　淋巴细胞分离液，上海博升公司，批重组人白细胞介素4（rh IL-4），美国Peprotech公司，批重组人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（rh GM-CSF），美国 Peprotech公司，批RPMI-1640，吉诺生物医药技术有限公司；10%胎牛血清（fetal calf serum，FCS），美国Hyclone公司，批荧光标记鼠抗人HLA-DR-PE（藻红蛋白荧光素，批、CD80-FITC（异硫氰酸荧光素，批、CD86-PE（批、CD1a-FITC（批，美国 ebioscience公司；磷酸盐缓冲液（PBS），江苏宝莱公司，批噻唑兰（MTT，批、二甲基亚砜（DMSO，批，美国Sigma公司。 　　2.3 观察指标 　　于治疗前及治疗4、8