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盐酸克伦特罗纳米磁快速检测方法 --试纸法 编制说明 深圳出入境检验检疫局 二00一年十月  1 基本信息 1.1 标准草案名称 中文 盐酸克伦特罗纳米磁快速检测方法--试纸法 英文 Rapid screen of clenbuterol residues in animal? original foods-- nano magnetic particles immunechromatographic assay 2011B225k 1.4 制（修）订情况 √制订 修订 替代的标准编号 1.5 起止时间 2011年4月～2012年4月 1.6 起草单位 中华人民共和国深圳出入境检验检疫局 深圳市检验检疫科学研究院 清华大学深圳研究生院马岚孙洁、吴峰杨俊兴、袁航张彩虹动物源食品中兽药如盐酸克伦特罗和莱克多巴胺等的超限量存在，构成重大公共卫生问题，并严重影响我国养殖业的持续发展进行兽药残留的检测势在必行。盐酸克伦特罗（Clenbuterol），俗称瘦肉精，是一种β兴奋剂。因其能改善脂肪型动物的肉与脂肪的比例，并能加速动物生长，而被广泛添加于动物饲料中，并且可以残留在动物的体内。但这种药物对人有严重的副作用，轻则导致心跳及心律不正常，重则可引发心脏病。目前，我国已禁止其使用。鉴于盐酸克伦特罗仍然被一些人违法添加使用，导致的“瘦肉精中毒事件”层出不穷。最近“双汇瘦肉精”事件导致九部委在全国开展一年的瘦肉精普查监测和整顿工作。盐酸克伦特罗测定使用较多的方法现有酶联免疫和HPLC测定等方法，但这些方法均要求有特殊的仪器设备和专业技术人员，检测成本高、时间长，这些要求大大制约了盐酸克伦特罗检测项目的开展，不能完全满足当前食品安全对盐酸克伦特罗残留量检测的需要。尽管农业部制订了《尿液中盐酸克仑特罗的测定 胶体金免疫层析法》（NY/T 933-2005），但存在有两个严重的不足：一是检测方法灵敏度不够，只能检测到3ng/ml，对于小于3ng/ml的猪尿样，存在有漏检现象；另一方面是不能够现场半定量，只能定性判定，定量则需要送至实验室进行周期更长的判定，缺少现场执法的时效性，给现场的执法造成一定的困难。鉴于“瘦肉精事件”多发频发、社会影响恶劣的特点；鉴于每天大约有5000只活猪供应香港，快速半定量灵敏检测是应对大规模样品，避免“瘦肉精事件”发生的事实，迫切需要一种能够现场快速灵敏半定量检测猪尿中盐酸克伦特罗的新型检测方法。为了能够现场快速、准确、灵敏的检测动物尿液中盐酸克伦特罗，填补国内有关动物尿液中盐酸克伦特罗现场快速灵敏半定量检测方面的空白，确保生猪的安全，避免“瘦肉精事件”的发生，在现场即可开展新型动物尿液中盐酸克伦特罗现场快速灵敏半定量检测的初步检测，必须建立一种快速、准确、灵敏的动物尿液中盐酸克伦特罗现场免疫学检测方法，以规范现场动物尿液中盐酸克伦特罗检测程序，确保能够对动物尿液中盐酸克伦特罗做出准确、灵敏、半定量的判断，进而能够及早采取紧急应对措施，以将损失降至最低。 目前用于现场快速检测的胶体金试纸产品均不能进行客观定量测定，因此开发定量用新型快速检测试纸条及相配套的定量检测仪非常必要，推广使用简便易行、相对准确、比较经济的兽药药物残留的检测产品，对食品安全，维护人民健康，对于促进农业产业的规范化发展，均具有较好的社会与经济意义。本标准涉及的纳米磁免疫层析法盐酸克伦特罗快速检测试纸使用方法简便，省时省力省钱，整个操作过程只须20分钟，灵敏度可达到1ppb，可满足对盐酸克伦特罗快速检测的要求。免疫层析检测技术是20世纪80年代末90年代初发展起来的新兴快速检测技术，其特点是应用抗原-抗体免疫学反应和层析反应，并以干片法试纸的形式，达到在0分钟内快速、准确地显色以检测待测物之目的。目前，国内外的免疫试纸应用的都是胶体金标记技术，如市场上现有的盐酸克伦特罗胶体金试纸等产品，但其敏感度低，只能达到1ng/ml；通过肉眼观察结果只能给出定性结果，且受到不同观察者的影响，无法实现客观化。 目前，我国有关盐酸克伦特罗的检测方法包括免疫学快速筛选检测方法和仪器确证检测方法。免疫学的筛选检测方法包括ELISA筛选检测方法、胶体金试剂条筛选检测方法；仪器确证方法包括GC/MS确证检测方法、LC/MS/MS仪器确证检测方法。但ELISA检测方法标准只能在实验室进行快速筛选检测，且操作程序复杂，需要专门的技术人员进行；胶体金筛选检测方法标准虽然可以在现场进行检测，但由于灵敏度较低，往往造成漏检，对于现在使用微量的盐酸克伦特罗更不能检测出来；仪器确证检测方法需要昂贵的仪器，且检测成本极高，更加不可能在现场进行检测。所以目前缺少一种可以用于现场检测，且灵敏度达到ELISA相同水平的检测试剂条标准。 免疫层析检测技术是20世纪80年代末90年