食品中多种微生物检测方法 飞行质谱法 编制说明.docVIP

- PAGE 18 - 检验检疫行业标准 《食品中多种微生物检测方法 飞行质谱法》 编 制 说 明 1 工作简况 1.1 任务来源 根据国家认证认可监督管理委员会下达的标准制（修）订计划（2010B288k），由辽宁出入境检验检疫局负责组织本标准的起草研制工作。 1.2 主要工作过程 标准的制定过程主要分为计划阶段、资料收集分析阶段、标准方法的验证、标准编写、标准征求意见和标准报批。各阶段主要工作工程分述如下： 计划阶段：2010年是项目计划制定阶段。项目负责人组织相关人员，成立了制定《食品中多种微生物检测方法——飞行质谱法》行业标准的起草小组。起草小组召开了标准制定计划会议，大家讨论了本标准的意义及实施方案，并对本标准的工作内容进行分解，制定完善的实施计划和进度表，并落实到人。 资料收集分析阶段：从2010年1月开始，项目组根据分工通过搜索互连网、查阅文献资料等手段在原课题的基础上进一步收集当前国内外有关常见致病菌飞行质谱法检测的各种法规、标准及文献，为本标准的顺利进行打下了良好的基础。 标准方法的验证：工作组就飞行质谱检测点样方法、培养基及培养时间对检测方法的影响、测试方法的稳定性及灵敏度等方面进行考察，并在实际检测应用中将本标准法与经典的微生物检测方法进行了比较，建立了可行、稳定的检验方法。并组织多家单位对本标准进行方法验证。 标准编写：2011年5月通过工作组集中讨论的方式确定标准制定原则及基本框架，按照GB/T1.1-2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则》要求，完成了“食品中多种微生物检测方法——飞行质谱法”标准初稿。 2 标准编制原则及主要内容 2.1 标准编制原则 本标准是根据GB/T1.1-2009《标准化工作导则 第1部分：标准的结构和编写规则》的要求进行编写的。本标准的编制工作系统研究了国内外相关文献。本标准是在由辽宁出入境检验检疫局主持承担的国家质检总局科研课题“食品中微生物飞行质谱检测与溯源技术研究”（课题编号：2010IK175）研究成果的基础上起草的。 2.2 标准主要内容 食品中多种微生物检测方法——飞行质谱法是按照图1所示检测流程进行标准的编写 样品制备 样品制备 增菌肉汤或待鉴定的菌株 样品处理 点样 飞行质谱鉴定 阴性结果 阳性结果 传统方法确认 结果报告 图1 飞行质谱法检测微生物流程图 该标准明确规定了标准的使用范围，规范了标准相关的缩略语、生物安全措施和废弃物处理和防止污染的措施，详细描述了方法的原理、方法提要与检测程序，介绍了标准涉及到的试剂材料和仪器设备。在测定步骤中，对样品制备、点样方式、飞行质谱检测等步骤进行了叙述和规范，并对结果及判断进行了阐述。 3 建立本标准检测方法的试验研究 《食品中多种微生物检测方法 飞行质谱法》标准的建立过程主要进行了以下试验： 3.1 标准菌株 本研究所用标准菌株均购自美国典型菌种保藏中心（ATCC）和中国医学微生物菌种保藏管理中心（CMCC），详见表1。 表1. 试验菌种及其编号 序号 菌株名称 拉丁名 菌株号 菌株数量 1 霍乱弧菌O1群 Vibrio cholerae serotype O1 ATCC 14035 1 2 霍乱弧菌O139群 Vibrio cholerae serotype O139 ATCC 51394 1 3 霍乱弧菌非O1/非O139群 Vibrio choleraee non-O1/non-O139 ATCC 25872 1 4 副溶血性弧菌 Vibrio parahaemolyticus ATCC 17803 1 5 副溶血性弧菌 Vibrio parahaemolyticus ATCC 17802 1 6 单核细胞增生李斯特氏菌 （1a血清型） Listeria monocytogenes ATCC 19111 1 7 单核细胞增生李斯特氏菌 （2a血清型） Listeria monocytogenes ATCC 19112 1 8 单核细胞增生李斯特氏菌 （4a血清型） Listeria monocytogenes ATCC 19114 1 9 单核细胞增生李斯特氏菌 （4b血清型） Listeria monocytogenes ATCC 19115 1 10 单核细胞增生李斯特氏菌 （4e血清型） Listeria monocytogenes ATCC 19118 1 11 单核细胞增生李斯特氏菌（不溶血） Listeria monocytogenes ATCC 15313 1 12 单核细胞增生李斯特氏菌 Listeria monocytogenes ATCC BAA-751 1 13 单核细胞增生李斯特氏菌 Listeria monocytoge